應用乙二胺四乙酸二鉀抗凝劑引起血小板假性減少14例分析

范亞敏， 張立紅， 李鳳俠， 王曉成， 閻澤君

(河北省承德市中心醫院檢驗科， 河北 承德 067000)

近年來，各種血液分析儀已廣泛應用于臨床常規檢測，對血小板計數準確性的問題也一直引起關注和討論。我們在應用全自動血液分析儀過程中發現應用乙二胺四乙酸(EDTA)二鉀作為抗凝劑對血細胞形態和血小板計數影響很小，但會誘導血小板發生聚集。目前，乙二胺四乙酸(EDTA)二鉀抗凝劑誘導的血小板聚集引起血小板假性減少的相關報道較多，但其機制尚待進一步研究。本文對2009年3月至2010年5月我院應用EDTA鹽抗凝劑引起血小板假性減少的14例檢驗結果進行回顧分析，現報告如下。

1 材料與方法

1.1 檢測對象:2009年3月至2010年5月我院住院患者，儀器血小板計數＜70×109L-1患者3621例，其中經手工鏡檢復核證實為血小板聚集引起的假性血小板減少14例。女4例，男10例，年齡1d至-82歲。標本來源:骨傷科2例，男性;骨一科2例，男性;神經外科2例，男性;消化科2例，女性;婦科2例，女性;循環內科1例，女性;神經內科2例，男性;兒科1例，女性。

1.2 儀器和試劑

1.2.1 HDORIBA ABX 120 RETIC全自動血液分析儀及原裝進口配套試劑。

1.2.2 OLYMPUS光學顯微鏡。

1.2.3 瑞氏－姬姆薩染液購自貝索公司。

1.3 檢測方法:標本經血液分析儀檢測后，篩選出血小板計數＜70×109L-1的標本推制血涂片，經瑞氏-姬姆薩染液染色后，由經驗豐富的檢驗人員于鏡下觀察血小板有無聚集。對有血小板聚集的標本分別用EDTA-K2抗凝劑和枸櫞酸鈉抗凝劑二管同時重新抽血馬上送檢。

2 結果

血小板計數＜70×109L-1的標本3621例，經涂片鏡下觀察有血小板聚集14例。神經外科2例均為同一患者，此患者住院期間共化驗9次血細胞分析，2次有聚集現象，其他幾次無血小板聚集現象。消化科2例均為同一患者，此患者住院期間的幾次化驗有2次聚集現象，其他幾次無發現血小板聚集現象。此現象可排除單一由EDTA鹽誘導的血小板聚集，說明引起血小板聚集尚有其他機制的存在。14例血小板假性減少要求重新抽血，立即送檢，有2例應用乙二胺四乙酸(EDTA)二鉀抗凝儀器檢測血小板計數仍減少，應用枸櫞酸鈉抗凝標本儀器檢測血小板計數正常，其發生率14.3%。14例血小板假性減少兩種抗凝劑PLT檢驗結果比較見表1

表1 14例血小板假性減少不同抗凝劑的比較

EDTA-K2抗凝劑與枸櫞酸鈉抗凝劑檢測血小板結果有明顯差異(P＜0.01)，具有統計學意義。

3 討論

由于EDTA鹽對血細胞形態和血小板計數影響很小，國際血液學標準化委員會推薦使用EDTA-K2做為血細胞分析用抗凝劑，但在抗凝血涂片檢查中發現，部分血片中出現大量血小板聚集現象，一般為3個-5個血小板聚集一起，或10-20個血小板聚集一起，更大的聚集可有50-60個以上，這樣就會影響血小板的數量，導致血小板假性減少，而應用枸櫞酸鈉抗凝劑的血涂片，PLT呈散在分布，無聚集現象。曾有報道EDTA可引起血小板聚集，導致血小板假性減少［1］。也有報道認為與血小板表面相關抗原的自身抗體及血清中抗心磷脂抗體的滴度有關，血細胞分析儀對凝集體的結構不能確認而使血小板假性減少［2］，也有文獻報道可能由于EDTA鹽啟動了機體免疫應答而導致血小板聚集，為EDTA依賴的假性血小板減少，并伴有假性血細胞增多［3］。

血小板聚集成團現象可能會造成血小板計數的降低和/或WBC計數的升高，這些血小板團塊可以激發儀器L1、LL、LL1報警標記，此時必須分別用EDTAK2抗凝劑和枸櫞酸鈉抗凝劑二管同時重新抽血馬上送檢，應用枸櫞酸鈉抗凝劑樣本只針對血小板計數進行再分析。14例血小板假性減少標本，重新采血，立即送檢，血小板聚集的發生率比較低，說明送檢時間以及采血方法是影響血小板計數的重要環節。血小板計數干擾因素有很多，如:小紅細胞，紅細胞碎片，白細胞碎片，以及血小板和紅細胞的大小分布出現交迭，從而導致血小板計數不可靠，總之，致血小板聚集引起血小板假性減少原因復雜，機制有待進一步分析。我們認為為了檢驗結果的準確性，檢驗人員必須加強責任心，血液分析儀血小板計數低于正常的標本均應手工涂片復檢，觀察血小板形態以及有無聚集，及時與臨床溝通，避免不必要的誤診發生。

［1］ 羅春麗.臨床檢驗［M］.北京:人民衛生出版社，1997.22.

［2］ 郭建，孫蔡英，孫濱.抗凝劑選擇對全血細胞分析的影響［J］.臨床檢驗雜志，1998，16(5):311.

［3］ 宓慶梅，施巍宇，郝婉瑩，等.EDTA依賴性假性血小板減少癥1例［J］.中華檢驗醫學雜志，2004，27(10):719-720.