辛伐他汀聯(lián)合杞菊地黃丸對糖尿病大鼠心臟的保護作用

陳 宇 李 華 (鄭州大學第一附屬醫(yī)院老年內(nèi)分泌科,河南 鄭州 450052)

糖尿病性心肌病是一種與冠心病、瓣膜疾病無關(guān)的特異性糖尿病相關(guān)性心臟疾病,是導致糖尿病心衰、死亡的主要原因〔1〕。辛伐他汀為羥甲基戊二酰輔酶 A還原酶抑制劑,可調(diào)節(jié)血脂、抗氧化、改善心室重構(gòu)〔2〕。杞菊地黃丸具有滋腎養(yǎng)肝功效,對高血壓合并糖尿病具有良好的療效,可減輕胰島素抵抗〔3,4〕。本研究探討辛伐他汀與杞菊地黃丸聯(lián)合應(yīng)用對糖尿病大鼠心臟的保護作用。

1 資料與方法

1.1 藥品與試劑 杞菊地黃丸,北京同仁堂科技發(fā)展股份有限公司制藥廠;辛伐他汀片,山東羅欣藥業(yè)股份有限公司;鏈脲佐菌素(STZ,Sigma公司);肌酸激酶(CK)、乳酸脫氫酶(LDH)、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶、蛋白質(zhì)羰基、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px),南京建成生物工程研究所。

1.2 儀器 血糖儀,羅氏公司;AU-5400全自動生化分析儀,奧林巴斯公司;AR-2140型萬分之一電子天平,梅特勒-托利多儀器有限公司;多功能酶標儀,Thermo公司。

1.3 實驗動物及分組 雄性 SD大鼠,體重 230～250 g,由鄭州大學實驗動物中心提供,合格證號:410116。將大鼠隨機分為正常組、模型組、辛伐他汀(10 mg/kg)組、杞菊地黃丸(1 g/kg)組,辛伐他汀與杞菊地黃丸聯(lián)合治療組,每組 8只。各給藥組大鼠于造模后 72 h開始灌胃給藥,1次/d,連續(xù)給藥14 d。正常組和模型組大鼠給予等量的玉米油(10 ml/kg)。

1.4 模型制備 取大鼠,腹腔注射新鮮配制的STZ 60 mg/kg,72 h后取大鼠尾靜脈血測定血糖,凡血糖≥16.7 mmol/L確定為造模成功的糖尿病大鼠。正常組大鼠腹腔注射等量的檸檬酸緩沖溶液。

1.5 指標的測定 大鼠尾靜脈取血,測定血糖、CK、LDH。取血后,打開胸腔,取心臟,剪除包膜、血管及心房組織,加冰生理鹽水制成 10%的組織勻漿,3 000 r/min離心15min,取上清液,檢測 Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶、蛋白質(zhì)羰基、MDA、SOD、GSH-Px。

1.6 統(tǒng)計學方法 應(yīng)用 SPSS13.0統(tǒng)計軟件,數(shù)據(jù)以±s表示,組間比較采用單因素方差分析,兩兩比較采用LSD法。

2 結(jié) 果

2.1 辛伐他汀與杞菊地黃丸聯(lián)合應(yīng)用對血糖的影響 模型組鼠血糖水平 〔(19.49±2.14)mmol/L〕明顯高于正常組〔(6.08±0.64)mmol/L〕(P＜0.01),說明糖尿病模型建立成功。與模型組比較,辛伐他汀組、杞菊地黃丸組及聯(lián)合治療組血糖水平均有降低〔(18.90±2.09)、(17.10±1.76)、(11.94±1.43)mmol/L〕,但聯(lián)合治療組血糖水平降低更為明顯(P＜0.01)。

2.2 辛伐他汀與杞菊地黃丸聯(lián)合應(yīng)用對心肌損傷的影響 模型組大鼠較正常組 LDH、CK水平升高,Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性降低(P＜0.01),糖尿病大鼠心肌受到損傷。各給藥組 LDH、CK水平下降,ATP酶活性增強,聯(lián)合治療組與模型組比較具有極顯著性差異(P＜0.01)。見表 1,表 2。

表1 各組 LDH、CK水平(±s,n=8,U/L)

表1 各組 LDH、CK水平(±s,n=8,U/L)

與正常組比較:1)P＜0.01;與模型組比較:2)P＜0.05,3)P＜0.01;下表同

組別 LDH CK正常組 469.98±50.20 193.65±21.81模型組 682.55±71.601) 286.73±31.591)辛伐他汀組 595.50±60.162) 251.89±28.372)杞菊地黃丸組 634.14±121.67 279.70±29.30聯(lián)合治療組 503.24±50.233) 204.77±23.523)

表2 各組 Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性(±s,n=8,μmol/mg prot)

表2 各組 Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性(±s,n=8,μmol/mg prot)

組別 Na+-K+-ATP酶 Ca2+-Mg2+-ATP酶正常組 2.31±0.23 2.74±0.28模型組 1.59±0.172) 1.87±0.201)辛伐他汀組 1.87±0.232) 2.19±0.302)杞菊地黃丸組 1.66±0.20 1.97±0.24聯(lián)合治療組 2.11±0.243) 2.65±0.333)

表3 各組羰基、MDA含量(±s,n=8,nmol/mg prot)

表3 各組羰基、MDA含量(±s,n=8,nmol/mg prot)

組別 羰基 MDA正常組 1.16±0.20 1.76±0.19模型組 2.77±0.421) 3.59±0.411)辛伐他汀組 2.39±0.36 3.27±0.48杞菊地黃丸組 2.24±0.312) 3.11±0.312)聯(lián)合治療組 1.58±0.243) 2.45±0.333)

2.3 辛伐他汀與杞菊地黃丸聯(lián)合應(yīng)用對氧化應(yīng)激的影響 造模后,模型組及給藥各組大鼠心肌組織中羰基、MDA含量增高,SOD、GSH-Px活性減弱,說明糖尿病大鼠心肌中存在氧化應(yīng)激。而辛伐他汀與杞菊地黃丸聯(lián)合應(yīng)用能極顯著地降低心肌組織中羰基、MDA含量,增強 SOD、GSH-Px活性(P＜0.01)。見表 3,表 4。

表4 各組 SOD、GSH-Px活性(±s,n=8,U/mg prot)

表4 各組 SOD、GSH-Px活性(±s,n=8,U/mg prot)

組別 SOD GSH-Px正常組 113.37±10.25 57.51±6.48模型組 89.64±8.721) 38.60±4.161)辛伐他汀組 94.35±8.81 40.80±6.26杞菊地黃丸組 96.17±9.972) 45.72±6.672)聯(lián)合治療組 105.89±10.503) 49.01±7.273)

3 討 論

LDH、CK是評價心肌損傷的敏感指標。Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶調(diào)節(jié)細胞內(nèi)外離子平衡,維持細胞膜電位〔5〕。本研究結(jié)果顯示,糖尿病大鼠 LDH、CK水平升高,ATP酶活性下降,說明糖尿病大鼠心臟受到損傷。聯(lián)合治療組大鼠ATP酶活性明顯高于模型組,LDH、CK水平顯著低于模型組,且優(yōu)于單一用藥組,提示辛伐他汀和杞菊地黃丸可通過增強ATP酶活性減輕心臟損傷,聯(lián)用效果更佳。

STZ誘發(fā)的糖尿病大鼠表現(xiàn)出抗氧化物酶活性降低和心肌脂質(zhì)過氧化,表明氧化應(yīng)激參與了糖尿病發(fā)展〔6〕。體內(nèi)羰基含量的變化可反映蛋白質(zhì)氧化損傷過程。MDA是一種脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物,可反映心肌組織中過氧化脂質(zhì)的含量。SOD可間接反映機體清除活性氧的能力。結(jié)果顯示,辛伐他汀與杞菊地黃丸聯(lián)合應(yīng)用可以增強糖尿病大鼠SOD活性,降低羰基、MDA含量,效果優(yōu)于單一用藥組。提示辛伐他汀聯(lián)合杞菊地黃丸較單一用藥更能有效地提高抗氧化物酶活性,減輕心臟氧化損傷。

辛伐他汀能夠改善心功能,抑制左心室肥厚;杞菊地黃丸可以降血糖,抑制脂質(zhì)過氧化,增強抗氧化物酶活性,二者在糖尿病性心肌病中具有協(xié)同作用,聯(lián)合應(yīng)用值得推廣。

1 Maya L,Villarreal FJ.Diagnostic approaches for diabetic cardiomyopath and myocardial fibrosis〔J〕.J Mol Cell Cardiol,2010;48(3):524-9.

2 張 焱,劉素筠.辛伐他汀對 I型糖尿病大鼠心肌中 TNF-α的影響〔J〕.中國醫(yī)療前沿(上半月),2009;4(11):4-6.

3 王艷君,李愛華.杞菊地黃丸致不良反應(yīng) 1例〔J〕.中國中醫(yī)藥現(xiàn)代遠程教育,2007;5(12):50.

4 劉立群.杞菊地黃丸治療高血壓合并糖尿病 50例〔J〕.陜西中醫(yī),2009;30(11):1492-3.

5 錢秋海,劉大文,趙 懿,等.糖心通對心肌缺血大鼠心肌酶及炎性因子的影響〔J〕.中國藥師,2009;12(3):298-300.

6 Singal PK,Bello-Kldn A,Farahmand F,et al.Oxidative stress and functional deficit in diabetic cardiomyopathy〔J〕.Adv Exp Med Biol,2001;498:213-20.