辛伐他汀聯合杞菊地黃丸對糖尿病大鼠心臟的保護作用

陳 宇 李 華 (鄭州大學第一附屬醫院老年內分泌科,河南 鄭州 450052)

糖尿病性心肌病是一種與冠心病、瓣膜疾病無關的特異性糖尿病相關性心臟疾病,是導致糖尿病心衰、死亡的主要原因〔1〕。辛伐他汀為羥甲基戊二酰輔酶 A還原酶抑制劑,可調節血脂、抗氧化、改善心室重構〔2〕。杞菊地黃丸具有滋腎養肝功效,對高血壓合并糖尿病具有良好的療效,可減輕胰島素抵抗〔3,4〕。本研究探討辛伐他汀與杞菊地黃丸聯合應用對糖尿病大鼠心臟的保護作用。

1 資料與方法

1.1 藥品與試劑 杞菊地黃丸,北京同仁堂科技發展股份有限公司制藥廠;辛伐他汀片,山東羅欣藥業股份有限公司;鏈脲佐菌素(STZ,Sigma公司);肌酸激酶(CK)、乳酸脫氫酶(LDH)、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶、蛋白質羰基、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px),南京建成生物工程研究所。

1.2 儀器 血糖儀,羅氏公司;AU-5400全自動生化分析儀,奧林巴斯公司;AR-2140型萬分之一電子天平,梅特勒-托利多儀器有限公司;多功能酶標儀,Thermo公司。

1.3 實驗動物及分組 雄性 SD大鼠,體重 230～250 g,由鄭州大學實驗動物中心提供,合格證號:410116。將大鼠隨機分為正常組、模型組、辛伐他汀(10 mg/kg)組、杞菊地黃丸(1 g/kg)組,辛伐他汀與杞菊地黃丸聯合治療組,每組 8只。各給藥組大鼠于造模后 72 h開始灌胃給藥,1次/d,連續給藥14 d。正常組和模型組大鼠給予等量的玉米油(10 ml/kg)。

1.4 模型制備 取大鼠,腹腔注射新鮮配制的STZ 60 mg/kg,72 h后取大鼠尾靜脈血測定血糖,凡血糖≥16.7 mmol/L確定為造模成功的糖尿病大鼠。正常組大鼠腹腔注射等量的檸檬酸緩沖溶液。

1.5 指標的測定 大鼠尾靜脈取血,測定血糖、CK、LDH。取血后,打開胸腔,取心臟,剪除包膜、血管及心房組織,加冰生理鹽水制成 10%的組織勻漿,3 000 r/min離心15min,取上清液,檢測 Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶、蛋白質羰基、MDA、SOD、GSH-Px。

1.6 統計學方法 應用 SPSS13.0統計軟件,數據以±s表示,組間比較采用單因素方差分析,兩兩比較采用LSD法。

2 結 果

2.1 辛伐他汀與杞菊地黃丸聯合應用對血糖的影響 模型組鼠血糖水平 〔(19.49±2.14)mmol/L〕明顯高于正常組〔(6.08±0.64)mmol/L〕(P＜0.01),說明糖尿病模型建立成功。與模型組比較,辛伐他汀組、杞菊地黃丸組及聯合治療組血糖水平均有降低〔(18.90±2.09)、(17.10±1.76)、(11.94±1.43)mmol/L〕,但聯合治療組血糖水平降低更為明顯(P＜0.01)。

2.2 辛伐他汀與杞菊地黃丸聯合應用對心肌損傷的影響 模型組大鼠較正常組 LDH、CK水平升高,Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性降低(P＜0.01),糖尿病大鼠心肌受到損傷。各給藥組 LDH、CK水平下降,ATP酶活性增強,聯合治療組與模型組比較具有極顯著性差異(P＜0.01)。見表 1,表 2。

表1 各組 LDH、CK水平(±s,n=8,U/L)

表1 各組 LDH、CK水平(±s,n=8,U/L)

與正常組比較:1)P＜0.01;與模型組比較:2)P＜0.05,3)P＜0.01;下表同

組別 LDH CK正常組 469.98±50.20 193.65±21.81模型組 682.55±71.601) 286.73±31.591)辛伐他汀組 595.50±60.162) 251.89±28.372)杞菊地黃丸組 634.14±121.67 279.70±29.30聯合治療組 503.24±50.233) 204.77±23.523)

表2 各組 Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性(±s,n=8,μmol/mg prot)

表2 各組 Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性(±s,n=8,μmol/mg prot)

組別 Na+-K+-ATP酶 Ca2+-Mg2+-ATP酶正常組 2.31±0.23 2.74±0.28模型組 1.59±0.172) 1.87±0.201)辛伐他汀組 1.87±0.232) 2.19±0.302)杞菊地黃丸組 1.66±0.20 1.97±0.24聯合治療組 2.11±0.243) 2.65±0.333)

表3 各組羰基、MDA含量(±s,n=8,nmol/mg prot)

表3 各組羰基、MDA含量(±s,n=8,nmol/mg prot)

組別 羰基 MDA正常組 1.16±0.20 1.76±0.19模型組 2.77±0.421) 3.59±0.411)辛伐他汀組 2.39±0.36 3.27±0.48杞菊地黃丸組 2.24±0.312) 3.11±0.312)聯合治療組 1.58±0.243) 2.45±0.333)

2.3 辛伐他汀與杞菊地黃丸聯合應用對氧化應激的影響 造模后,模型組及給藥各組大鼠心肌組織中羰基、MDA含量增高,SOD、GSH-Px活性減弱,說明糖尿病大鼠心肌中存在氧化應激。而辛伐他汀與杞菊地黃丸聯合應用能極顯著地降低心肌組織中羰基、MDA含量,增強 SOD、GSH-Px活性(P＜0.01)。見表 3,表 4。

表4 各組 SOD、GSH-Px活性(±s,n=8,U/mg prot)

表4 各組 SOD、GSH-Px活性(±s,n=8,U/mg prot)

組別 SOD GSH-Px正常組 113.37±10.25 57.51±6.48模型組 89.64±8.721) 38.60±4.161)辛伐他汀組 94.35±8.81 40.80±6.26杞菊地黃丸組 96.17±9.972) 45.72±6.672)聯合治療組 105.89±10.503) 49.01±7.273)

3 討 論

LDH、CK是評價心肌損傷的敏感指標。Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶調節細胞內外離子平衡,維持細胞膜電位〔5〕。本研究結果顯示,糖尿病大鼠 LDH、CK水平升高,ATP酶活性下降,說明糖尿病大鼠心臟受到損傷。聯合治療組大鼠ATP酶活性明顯高于模型組,LDH、CK水平顯著低于模型組,且優于單一用藥組,提示辛伐他汀和杞菊地黃丸可通過增強ATP酶活性減輕心臟損傷,聯用效果更佳。

STZ誘發的糖尿病大鼠表現出抗氧化物酶活性降低和心肌脂質過氧化,表明氧化應激參與了糖尿病發展〔6〕。體內羰基含量的變化可反映蛋白質氧化損傷過程。MDA是一種脂質過氧化產物,可反映心肌組織中過氧化脂質的含量。SOD可間接反映機體清除活性氧的能力。結果顯示,辛伐他汀與杞菊地黃丸聯合應用可以增強糖尿病大鼠SOD活性,降低羰基、MDA含量,效果優于單一用藥組。提示辛伐他汀聯合杞菊地黃丸較單一用藥更能有效地提高抗氧化物酶活性,減輕心臟氧化損傷。

辛伐他汀能夠改善心功能,抑制左心室肥厚;杞菊地黃丸可以降血糖,抑制脂質過氧化,增強抗氧化物酶活性,二者在糖尿病性心肌病中具有協同作用,聯合應用值得推廣。

1 Maya L,Villarreal FJ.Diagnostic approaches for diabetic cardiomyopath and myocardial fibrosis〔J〕.J Mol Cell Cardiol,2010;48(3):524-9.

2 張 焱,劉素筠.辛伐他汀對 I型糖尿病大鼠心肌中 TNF-α的影響〔J〕.中國醫療前沿(上半月),2009;4(11):4-6.

3 王艷君,李愛華.杞菊地黃丸致不良反應 1例〔J〕.中國中醫藥現代遠程教育,2007;5(12):50.

4 劉立群.杞菊地黃丸治療高血壓合并糖尿病 50例〔J〕.陜西中醫,2009;30(11):1492-3.

5 錢秋海,劉大文,趙 懿,等.糖心通對心肌缺血大鼠心肌酶及炎性因子的影響〔J〕.中國藥師,2009;12(3):298-300.

6 Singal PK,Bello-Kldn A,Farahmand F,et al.Oxidative stress and functional deficit in diabetic cardiomyopathy〔J〕.Adv Exp Med Biol,2001;498:213-20.