破傷風疫苗免疫供血漿者抗-TT血漿效價觀察與分析

黃濤 蔣玲

破傷風是由破傷風桿菌侵入人體傷口的一種特異性感染，是致死性傳染病，其高毒力的痙攣毒素可阻斷中樞神經系統的抑制性神經遞質，引起肌肉強直和典型的全身痙攣，目前仍是全球眾多地區的一個重要公共衛生問題，尤其是熱帶發展中國家最貧窮地區，母親和新生兒破傷風的發病率較高，發作后病死率高達20%以上。如果采取了主動免疫和被動免疫措施，只要使機體血清的破傷風抗體含量達到 0.1IU/ml，即可獲得免疫保護作用［1］。預防破傷風有自動免疫和被動免疫兩種方法。自動免疫是通過免疫接種含破傷風類毒素(tetanus toxoid，TT)的疫苗來預防，破傷風疫苗與百日咳、白喉疫苗一起作為聯合疫苗(DTP)早已納入我國兒童計劃免疫。然而，在國家免疫計劃低覆蓋率，尤其是計劃免疫實施前出生的人群中會有破傷風的發生，許多育齡期婦女不能預防分娩相關的破傷風。另外，盡管已接受過基礎免疫，為了獲得持久的免疫力，還須加強免疫。被動免疫是注射馬血清破傷風毒素(tetanus antitoxin，TAT)和人破傷風免疫球蛋白(human tetanus immunglobulin，TIG)，由于前者系馬血清制品，常常引起過敏反應，為此，20世紀60年代歐美各國相繼研制出 TIG 用于臨床，并逐漸取代 TAT［2］。TIG 系由供血漿者經吸附破傷風疫苗免疫后采集抗-TT效價高的原料血漿制備。為了分析破傷風疫苗免疫對不同性別和年齡段供血漿者抗-TT效價變化，為提高抗-TT高效價血漿采集量提供參考依據。筆者采用相同劑量和免疫程序分別免疫符合要求的三個年齡段的供血漿者，并以ELISA檢測方法篩查合格的血漿樣品。

材料與方法

1.材料:吸附破傷風疫苗(0.5 ml，含破傷風類毒素效價≥40 IU，批號:20070901-1，20100401-1)由成都生物研究所提供，ELISA定量檢測破傷風抗體診斷試劑(批號 201002011，201007011，201010011，201103011)由上海科華生物工程股份有限公司提供，人破傷風免疫球蛋白標準品(自配)，XJC-2000型全自動血漿采集機(四川南格爾生物醫學股份有限公司)，MK3酶標儀，洗板機(WELLWASHY MK2)。

2.分組方法:將144名志愿供血漿者分成三組(21～35歲組，36～45歲組，45～55歲組)，每組按相同疫苗劑量和免疫程序進行免疫。對那些無應答或抗-TT效價＜8IU/ml的供血漿者于次年實施一次強化免疫。

3.原料血漿采集:按《中華人民共和國藥典》2010年版(三部)“血液制品原料血漿規程”要求采集［3］。

4.檢測方法:采用ELISA定量測定法，按診斷試劑盒說明書進行操作［3］。

5.判定標準:檢測結果達到0.1IU/ml以上的血樣被認為對供血漿者具有保護作用;≥8IU/ml的血樣為高效價抗-TT原料血漿的供血漿者［3］。

結 果

1.不同性別供血漿者，相同疫苗劑量和程序免疫獲得的抗-TT效價分布。從表1可以看出，男女性別中抗-TT效價分布百分比率無明顯差異。見表1。

2.供血漿者持續供血漿后抗-TT效價變化:由表2可以看出，供血漿者隨著采漿次數的增加，其血漿抗-TT效價下降呈平穩趨勢，供血漿者在進行第8次供血漿時抗-TT≥8IU/ml的人數比例下降至50.91%，到第10次時下降至36.36%;到第6個月時下降至18.1%，一年后降至14.55%。見表2。

3.分三個年齡段供血漿者接受破傷風疫苗免疫效果的比較 從表3可以看出，21～35歲組產生抗-TT高效價比例最高，36～45歲組其次，46～55歲組最低。見表3。

表1 不同性別相同疫苗劑量(40IU)和免疫程序免疫供血漿者抗體效價分布

表2 供血漿者持續獻血漿后抗-TT高效價變化

表3 分3個年齡段供血漿者免疫抗-TT效價比較

討 論

144名志愿供血漿者經破傷風疫苗(40IU)基礎免疫后，血漿抗-TT均能轉陽，其中38%供血漿者的血漿抗-TT效價能達到8IU/ml以上，男女性別中抗-TT效價分布百分比例無明顯差異。供血漿者隨著采漿次數的增加，其血漿抗-TT效價下降呈平穩趨勢，在高效價供血漿者中，近50%供血漿者在第8次獻漿后效價高于8IU/ml，18%供血漿者在采漿6個月后效價高于8IU/ml，14%供血漿者在采漿1年后效價持續高于8IU/ml。不同年齡段供血漿者接受破傷風疫苗免疫效果差異明顯，21～35歲組產生抗-TT高效價比例最高，36～45歲組其次，46～55歲組最低。結果表明，選擇45歲以下的合格供血漿者進行破傷風免疫，并對基礎免疫供血漿者宣傳，全程免疫后按國家規定的最短采漿間隔時間持續獻漿6個月以上，可提高抗-TT高效價血漿的比例和采集量。

與此同時，絕大多數志愿供血漿者在完成全程免疫的過程中無嚴重的副反應發生，只有極少數供血漿者局部出現紅腫，1～2天后自行消失;按40IU劑量疫苗，對抗-TT＜8IU/ml的供血漿者適時進行強化免疫也能獲得較好的效果，這一結果與有關文獻報道的情況基本一致［4］，符合制備人破傷風免疫球蛋白的標準。

如WHO最近關于破傷風疫苗的意見書中指出的那樣，“保護性抗體濃度”并不能保證在各種情況下都具有免疫力，目標應是終身維持高水平的抗體濃度［5］。為使體內的抗-TT水平達到上述要求的濃度，必須按規定的要求不間斷地進行破傷風疫苗免疫;其二是為了采集更多的高效價原料血漿制備出安全有效的人破傷風免疫球蛋白(TIG)制品［4-6］，使其取之于民，用之于民，減少或降低因注射馬血清制品(TAT)帶來的過敏反應。

1 嚴有望，李少安.WHO關于破傷風疫苗的意見書［J］.國際生物制品學雜志，2007，30(1):12-14.

2 羅時定.人破傷風免疫球蛋白及其應用［J］.中華急診醫學雜志，2002，11(4):285-286.

3 國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典2010年版三部［M］.北京:中國醫藥科技出版社，2010年.

4 郭中平.特異性人免疫球蛋白及其應用和開發前景［J］.國際生物制品學雜志，2006，29(1):19-22.

5 楊明，葛少華，劉美佳，等.獲得高效價人破傷風抗體原料血漿免疫方法的探討［J］.中國輸血雜志，2005，18(3):217-218.

6 周海云，江麗君.人破傷風免疫球蛋白及其應用［J］.微生物學免疫學進展，2006，34(2):84-86.