頸康片揮發油的提取及其包合物的制備工藝研究

林向前

(福建省漳州市中醫院，福建 漳州 363000)

表1 提取工藝因素水平表

頸康片由桑枝、馬錢子、白芍、葛根、天麻、羌活、川芎等藥材組方，具有解肌鎮痛、舒筋通絡、祛風除濕的功效，用于治療頸椎病、頸背肌筋膜炎、肩周炎等。羌活、川芎為方中主要成分，其揮發油含量很高，是重要的藥理活性成分。為了充分發揮揮發油的效用，增加其在制劑中的穩定性，減少不良氣味，筆者將其揮發油提取后用β－環糊精包合，并對提取及包合的工藝條件進行研究，以得出最佳制備工藝。

1 儀器與試藥

TG328B型電光分析天平(上海天平儀器廠)；SH21－1型磁力恒溫攪拌器(上海梅穎浦儀器儀表制造有限公司)；FM101－2型鼓風干燥箱(長沙儀器廠)；揮發油測定器(上海玻璃儀器廠)。β－環糊精(陜西省佳縣生物化學工業公司)；羌活、川芎(廣州片仔癀醫藥有限公司，批號分別為091008，1006031)；無水乙醇、乙醚、無水硫酸鈉均為分析純。

2 方法與結果

2.1 揮發油提取工藝研究

2.1.1 揮發油提取與分離

按處方比例稱取羌活、川芎藥材粉碎，過2號篩，置揮發油提取器中，加水浸泡后連續提取數小時，提取液冷卻后，用乙醚萃取3次，合并乙醚液，40℃以下回收乙醚，加無水硫酸鈉脫水，過濾，轉移至稱量瓶中，水浴加熱揮干殘存乙醚，得純揮發油，密閉保存。

2.1.2 提取工藝優選[1－2]

因素水平設計：根據初步試驗結果，考察混合揮發油提取工藝中影響較大的3種因素，即浸泡時間(因素A)、加水量(因素B)、回流時間(因素C)，每個因素取3個水平，詳見表1。

正交試驗設計與結果：本試驗采用 L9(34)設計試驗表安排試驗，以揮發油總質量為考察指標，結果見表2，方差分析結果見表3。方差分析結果表明，影響因素排序為C＞B＞A。結合直觀分析與生產實際，確定最優提取工藝條件為A1B1C3，即藥材浸泡1 h、加6倍量水、加熱回流提取7 h。

2.2 β－環糊精包合工藝研究

2.2.1 混合揮發油回收率測定[3]

精密量取混合揮發油1 mL，置500 mL燒杯中，加入蒸餾水200mL，按照2010年版《中國藥典(一部)》附錄揮發油測定項下甲法測定揮發油，用10mL乙醚洗滌揮發油測定器中殘留揮發油，分取乙醚，并入揮發油中，室溫放置4 h，使乙醚自然揮發，量取揮發油，計算回收率，重復操作3次。結果平均回收率為85.55%。

表2 提取工藝正交試驗設計與結果

表3 提取工藝方差分析結果

2.2.2 包合物制備

采用飽和水溶液法，精密稱取β－環糊精，置100mL具塞三角錐形瓶中，按1∶10的比例加入蒸餾水，加熱使之完全溶解，制成飽和水溶液，冷卻至所需溫度，用恒溫磁力攪拌器攪拌。精密移取混合揮發油1 mL置試管中，用無水乙醇稀釋，使揮發油與無水乙醇之比為1∶1。將揮發油的醇溶液用注射器緩緩注入錐形瓶中，邊加邊攪拌至規定時間，混合液靜置并冷藏24 h，抽濾并用乙醚洗滌3次，于40℃干燥至恒重，即得包合物。

2.2.3 包合率測定

取干燥至恒重的包合物精密稱重，測定其揮發油含量。按下列公式計算包合物收率、揮發油包合率。包合物收得率=包合物質量/(β－環糊精加入量+揮發油加入量)×100%，揮發油包合率=包合物揮發油測得量/(揮發油加入量×空白回收率)×100%，包合物收得率評分=包合物收得率×30，揮發油包合率評分=揮發油包合率×70，綜合評分=包合物收率評分+揮發油包合率評分。揮發油包合率權重系數定為0.7，包合物收得率作為次要篩選指標，權重系數定為0.3，用綜合評分方法來確定最佳包合工藝。

2.2.4 包合工藝優選[2－3]

因素水平設計：根據預試驗，對混合揮發油包合工藝影響較大的因素有3個，即揮發油與β－環糊精的比例(因素A)、包合溫度(因素B)、攪拌時間(因素C)，每個因素取3個水平，詳見表4。

表4 包合工藝因素水平表

正交試驗設計與結果：采用 L9(34)設計試驗表安排試驗，以包合物收率、揮發油包合率為評價指標，結果見表5，方差分析結果見表6。方差分析結果表明，影響因素排序為A＞C＞B。結合直觀分析與生產實際，確定最佳包合工藝條件是A3B1C2，即揮發油與β－環糊精比例為1∶10，包合溫度為30℃，磁力攪拌時間為2 h。

表5 包合工藝正交試驗設計與結果

表6 包合工藝方差分析結果

2.3 驗證試驗

按處方比例稱取羌活、川芎，按最佳工藝條件進行3批驗證試驗。結果揮發油總質量分別為0.98g，1.13g，0.96g，β－環糊精包合物的綜合評分分別為91.17，90.72，92.33分。結果表明，正交試驗優選的最佳提取工藝及包合工藝在揮發油提取總質量和包合物的綜合評分方面均優于試驗中其他工藝。

3 討論

中藥制劑中多含揮發油與揮發性成分，由于揮發油對空氣、日光及溫度比較敏感，所以使用一般制劑方法難以對其進行有效的質量控制。β－環糊精是一種較新的藥物包合材料，具有環狀中空筒形和環外親水、環內疏水的特殊結構，使其能與許多化學物質，特別是使揮發性成分形成較穩定的包合物，并在增加藥物的溶解度和穩定性、防止揮發性成分揮散、減少刺激、降低毒副作用、掩蓋藥物臭味等方面有良好效果。本試驗采用正交試驗法對頸康片揮發油的提取及其包合物的制備工藝進行了研究，驗證試驗說明所選用的最佳工藝穩定、可行。

[1]劉 梅，王擁軍，施 杞，等.復方芪麝片中川芎揮發油提取及包合工藝研究[J].上海中醫藥大學學報，2006(1)：66－68.

[2]郭愛國，李 偉，陳 興.羌活、蒼術混合提取揮發油的包合工藝研究[J].中國現代藥物應用，2008，2(17)：9－10.

[3]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[M].北京：中國醫藥科技出版社，2010：附錄63.