魏建林
隨著血細胞計數儀的廣泛應用,在減輕檢驗人員勞動強度的同時,也提高了實驗結果的準確性、精密度和重復性,給臨床快速診斷提供了可靠依據。但由于儀器的局限性和疾病的某些病理變化等干擾因素直接影響血細胞計數儀的準確性,因而造成實驗誤差,甚至得出與臨床相矛盾的結果,給臨床診斷帶來極大困惑。因此正確運用高精設備進行檢測,對于某些結果與臨床不符的病例,進行顯微鏡直接計數尤為重要。我們發現在急、慢性乙型重癥肝炎患者中,隨著血清膽紅素濃度的進行性增高,血細胞分析計數的白細胞優勢出現假性增高,報告如下。
1.1 一般資料 選擇我院2009至2011年收治的急、慢性乙型重癥肝炎患者19例,男15例,女4例;年齡32~55歲;全部病例符合全國病毒性肝炎診斷標準[1],住院治療期間進行肝功、腎功、總蛋白、白蛋白、電解質等血清生化常規動態監測,并采用保肝、對癥、抗生素防止感染等綜合治療措施。
1.2 儀器及試劑 CELL-DYN1800型血細胞分析儀:Accute-40型全自動生化分析儀。Olympus生物顯微鏡。CELL-DYN1800型血型分析儀配套試劑和質控品。Accute-40型全自動生化分析儀所用試劑(批號:20101203)和質控品(批號:20100906)分別為北京九強公司和朗道公司提供;瑞士-姬姆薩染色均在效期內使用。
1.3 方法 生化分析儀與血液分析儀均按說明書嚴格操作。顯微鏡細胞計數和分類計數按《全國臨床檢驗技術操作規程》操作,實驗方法采用上述儀器并與手工計數法,所選病例分別重復計數4次,取其平均值。
19例急、慢性乙型重癥肝炎患者入院后血清總膽紅素檢測均>140 μmol/L,治療過程中呈進行性增高,最高達785 mol/L。19例患者入院時測白細胞,10.0×109/L 1例,12.0×109~20.0×109/L 3例,21.0×109~38.0×109/L 13例,高于38.0×109/L 2例,其中淋巴細胞絕對計數均明顯高于正常。隨著總膽紅素進行性增高,白細胞計數亦呈進行性增高,達32.0×109~44.0×109/L,淋巴細胞絕對計數顯著提高;患者谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、總蛋白、白蛋白、電解質及血紅蛋白、紅細胞、血小板等均符合病情變化,19例患者均無發熱癥狀。根據患者白細胞計數的增高,臨床對19例患者均采取加大抗病毒劑量和增加抗生素種類治療,但白細胞計數仍呈持續性或進行性增高,考慮有假性增高的可能,隨時采用手工法計數和瑞士-姬姆薩染色法進行手工分類。結果10例患者白細胞計數4.2×109~9.7×109/L,分類正常,外周末梢血涂片檢測粒、紅細胞及血小板大致正常,未發現異性淋巴細胞。
血細胞計數儀大都采用電阻抗原理,不同大小的細胞通過微孔時產生不同的電脈沖,儀器將脈沖信號放大,根據脈沖信號的大小不同按進行分群和計數,而儀器本身不能識別細胞的類型。計數白細胞時,若含有未溶解或未破壞的紅細胞必將誤認為小白細胞[2]。黃疸是慢性重癥肝炎的主要表現之一,主要是由于肝細胞受損、壞死后攝取、轉化、排泄膽紅素能力下降使得血液中膽紅素濃度增高所致。主要見于病毒性肝炎、中毒性肝炎或肝癌、肝內或肝外膽道阻塞、新生兒生理性黃疸、Gilger-Najjar綜合征、Gilger病和Dubin-Jhknson綜合征等。因此,膽紅素的高低與肝細胞壞死程度和病情有著密切關系[3]。19例急、慢性乙型重癥肝炎患者均表現為膽紅素呈進行性增高,隨著膽紅素的增高,血細胞計數儀出現白細胞計數假性增高。后經手工白細胞計數和分類都在正常范圍。究其原因可能是高膽紅素血癥影響紅細胞的韌性,以及肝病患者紅細胞膜脂類異常或紅細胞內含有大量的sHb、sHb-CO,抵抗溶血素作用,造成紅細胞在溶血素作用下溶解破壞不徹底,導致細胞計數儀誤將紅細胞計入小白細胞,導致白細胞計數假性增高。臨床對19例患者均采取了加大抗病毒劑量和增加抗生素類的治療,給患者的病情變化造成了一定影響,并給患者造成了一定的經濟負擔。同時,基于血細胞計數儀對細胞檢測與顯微鏡下細胞形態學計數原理截然不同,報告方式是兩個截然不同的概念,因此,血細胞計數儀決不可代替顯微鏡的細胞形態學檢查;對于高膽紅素血癥患者,一旦出現血細胞分析儀白細胞計數增高,伴隨淋巴細胞絕對值增高,應及時進行手工復查,以防由于紅細胞因破壞不完全致使白細胞計數的假性增高,給臨床治療帶來不良后果。
1 中華傳染病寄生蟲學分會,肝臟病學分會.病毒性肝炎防治方案.中華肝臟病雜志,2000,8:324-329.
2 叢玉隆主編.當代血液分析技術與臨床.第1版.北京:人民衛生出版社,1997.12.
3 葉應嫵,王毓三,申子瑜主編.全國臨床檢測操作規程.第3版.南京:東南大學出版社,2006.11.