氯柳酊的制備與質量控制

石繼和，劉武斌，許 斌

（1.貴州省銅仁地區人民醫院藥劑科，貴州 銅仁 554300； 2.貴州省銅仁地區藥品檢驗所，貴州 銅仁 554300）

氯柳酊為醫院自制的一種外用酊劑，主要由氯霉素和水楊酸組成，具有殺菌、抑制霉菌、溶解角質的作用，臨床用于治療頭皮糠疹、尋常痤瘡、毛囊炎、脂溶性皮炎等。其質量標準中分別采用紫外分光光度法測定氯霉素和中和法測定水楊酸含量，方法費時、煩瑣。為此，筆者參照2010年版《中國藥典（二部）》采用高效液相色譜法同時測定氯霉素和水楊酸含量，效果滿意，現報道如下。

1 儀器與試藥

LC－20AD型高效液相色譜儀，SIL－20A型自動進樣器，AUW－120D型電子天平（日本島津）。氯霉素（南京白敬宇制藥有限責任公司，批號為090606）；水楊酸（鎮江前進化工有限責任公司，批號為20100329）；氯霉素對照品（批號為130555－200602），水楊酸對照品（批號為100106－200303），均購于中國藥品生物制品檢定所；75％乙醇（自制），乙腈為色譜純；氯柳酊（規格為100mL，批號分別為20100704，20100714，20100726，醫院自制）。

2 方法與結果

2.1 處方與制備

處方為氯霉素10g，水楊酸20g，75％乙醇適量，共制成1000mL。取氯霉素與水楊酸，加75％乙醇適量，攪拌使溶解，濾過，自濾器添加75％乙醇至1 000mL，攪勻即得。

2.2 一般質量控制

2.2.1 性狀

本品為無色透明液體。

2.2.2 鑒別

氯霉素：取本品2mL，加1％氯化鈣溶液3mL與鋅粉50mg，置水浴上加熱10min，傾取上清液，加苯甲酰氯約0.1 mL，立即強烈振搖1min，加三氯化鐵試液0.5mL與三氯甲烷2mL，振搖，水層顯紫紅色；取本品5mL，加醇制氫氧化鉀試液2mL，防止乙醇揮散，置水浴上加熱15min，溶液顯氯化物的鑒別反應。

水楊酸：取本品2mL，加三氯化鐵試液2滴，溶液顯紫堇色。

2.2.3 檢查

應符合2010年版《中國藥典（二部）》附錄酊劑項下規定[1]。

2.3 含量測定

2.3.1 色譜條件

色譜柱：Dikma C18柱（200 mm×4.6 mm，5μm）；流動相：0.1％庚烷磺酸鈉溶液（0.1％庚烷磺酸鈉溶液500 mL，加二甲基甲酰胺5 mL、冰醋酸0.5 mL，混勻）－乙腈（75∶25）；柱溫：室溫；檢測波長：272 nm；流速：1.0mL/min；進樣量：20μL。

2.3.2 溶液制備

分別精密稱取氯霉素對照品與水楊酸對照品，加適量乙醇溶解，用流動相稀釋成每1mL含氯霉素50μg與水楊酸100μg的對照品溶液。充分搖勻氯柳酊樣品，精密量取1mL，置50mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，精密量取上述溶液2.5mL，置10mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。按照氯柳酊的處方與制法，制備不含氯霉素與水楊酸的陰性樣品，按照供試品溶液制備方法制備陰性對照品溶液。

2.3.3 方法學考察

系統適用性與干擾性試驗：精密量取對照品溶液、供試品溶液、陰性對照品溶液，在擬訂的色譜條件下各進樣20μL。色譜圖見圖1。結果表明，陰性對照品溶液在上述色譜條件下不干擾氯霉素與水楊酸的含量測定，氯霉素與水楊酸分離度良好。

圖1 高效液相色譜圖

線性關系考察：精密稱取氯霉素對照品9.86 mg與水楊酸對照品19.6mg，置100mL容量瓶中，加乙醇溶解并用流動相稀釋至刻度，搖勻，精密量取1，3，4，5，6，8，12mL，置10mL容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，制成氯霉素質量濃度為9.86，29.58，39.44，49.30，59.16，78.88，118.32μg/mL與水楊酸質量濃度為19.60，58.80，78.40，98.00，117.60，156.80，235.20μg/mL的對照品溶液。精密吸取上述溶液各20μL，注入液相色譜儀，以峰面積（A）對質量濃度（C）進行線性回歸，氯霉素與水楊酸的回歸方程分別為A=13.566+39.165C（r=0.999 8）和 A=18.55+7.522C（r=0.999 8）。結果表明，氯霉素與水楊酸檢測質量濃度線性范圍分別為9.86～118.32μg/mL和19.60～235.20μg/mL。

精密度試驗：取線性關系考察項下含氯霉素49.30μg/mL與含水楊酸98.00μg/mL的對照品溶液，按擬訂的色譜條件重復進樣5次。結果氯霉素與水楊酸峰面積的 RSD分別為0.49％和0.44％（n=5），表明方法精密度較好。

重復性試驗：取同一批樣品（批號為20100704），依法制備同一質量濃度的供試品溶液6份并測定含量。結果氯霉素與水楊酸的RSD分別為0.34％和0.31％（n=6），表明方法重復性良好。

加樣回收試驗：精密吸取已知含量的氯柳酊樣品（批號為20100704）6份，分別精密加入含氯霉素39.44，49.30，59.16μg/mL與含水楊酸78.40，98.00，117.60μg/mL的對照品溶液1mL，依法進樣測定，記錄峰面積并計算回收率。結果見表1。

表1 加樣回收試驗結果（n=6）

穩定性試驗：取同一供試品溶液，室溫放置，分別于0，2，4，8，12，24h時依法進樣，記錄峰面積。結果氯霉素與水楊酸的 RSD分別為0.58％和0.42％（n=6），表明供試品溶液在24h內穩定。

2.3.4 樣品含量測定

取3批樣品，依法制備供試品溶液。分別精密吸取對照品溶液、供試品溶液各20μL，按擬訂的色譜條件進樣，測定氯霉素和水楊酸的峰面積，并按外標法計算含量。結果批號為20100704，20100714，20100726的樣品中，氯霉素與水楊酸含量分別為標示量的99.40％和99.80％，99.60％和100.20％，100.20％和100.60％。

3 討論

氯柳酊是由氯霉素與水楊酸為主藥配制的復方制劑，彭芳玲等[2]采用雙波長法測定其中氯霉素的含量，效果滿意。筆者采用高效液相色譜法在擬訂色譜條件下同時測定氯霉素和水楊酸兩種成分的含量，方法學考察表明，結果準確，方法簡便、靈敏、重現性好。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（二部）[M].北京：中國醫藥科技出版社，2010：附錄7.

[2]彭芳玲，龍 榮.氯柳酊的制備及質量控制[J].現代醫藥衛生，2006，22（5）：673.