總有機碳法檢測設備清潔時烏苯美司的殘留量

蔡旭萍，吳彩萍，趙愛桔，葛孝忠

（1.浙江普洛康裕制藥有限公司，浙江 東陽 322118； 2.浙江省醫藥經濟發展中心，浙江 杭州 310012）

烏苯美司是化學藥物，可增強免疫功能，用于抗癌時化學治療、放射治療的輔助治療，老年性免疫功能缺陷等。根據《藥品生產質量管理規范》（GMP）要求，藥品生產的每道工序完成后，應對設備進行清洗，以防止藥品污染和交叉污染。設備清洗要求的烏苯美司殘留量，淋洗法取樣時為10×10－6以下，擦拭法取樣時為0.8 mg/棉簽（25 cm2）以下。此時紫外吸收峰吸光度小，不能用液相、紫外、容量法等進行殘留檢測。筆者采用總有機碳（TOC）法測定烏苯美司的殘留量，能在低濃度下快速檢測分析，確保生產及產品一致性、安全性，現報道如下。

1 儀器與試藥

TOC－VCPH檢測儀（日本島津）。蔗糖對照品（USP，批號為G1E317）；1，4－對苯醌對照品（USP，批號為H1G332）；水為超純水，其他試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 系統適用性試驗[1]

精密稱取1，4－苯醌對照品，溶解于超純水，制成質量濃度為0.75 mg/L的溶液（含碳0.50 mg/L），即為1，4－苯醌對照品溶液。精密量取蔗糖對照品，溶解于超純水中，制成含1.19mg/L的溶液（含碳0.50mg/L），即為蔗糖對照品溶液。取超純水、1，4－苯醌對照品溶液、蔗糖對照品溶液，各進樣0.5mL，響應效率符合規定。

2.2 溶液配制

取烏苯美司原料藥10 mg，精密稱定，置100 mL量瓶中，用0.1 mol/L鹽酸溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，制成質量濃度為100μg/mL的溶液，精密量取上述溶液10 mL，置100 mL量瓶中，用0.1 mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液（10μg/mL）。將擦拭棉簽（25 cm2）放入干凈的具塞玻璃瓶中，精密加入0.1mol/L鹽酸溶液100mL，充分振搖，取上層液作為供試品溶液。將預先用0.1mol/L鹽酸溶液浸泡24h的空白擦拭棉簽，擠干溶劑后放入具塞玻璃瓶中，精密加入0.1mol/L鹽酸溶液100mL，充分振搖，取上層液作為空白溶液。

2.3 烏苯美司殘留量測定法

取空白溶液、對照品溶液、供試品溶液，用總有機碳法測定其峰面積，供試品溶液的峰面積應不大于對照品溶液峰面積的4/5，即≤0.8mg/棉簽（25 cm2）。

2.4 最小檢出限和最小定量限確定

先取空白溶液測定6次。以0.1 mol/L鹽酸溶液為溶劑，配制一系列低質量濃度的烏苯美司對照品溶液，測定對照品溶液的峰面積 S。在S/N=2～3時，檢出限為0.16μg/mL；在S/N≈10時，定量限為0.67μg/mL。

2.5 方法學考察

線性關系考察：精密量取質量濃度為100μg/mL的對照品溶液各1，3，5，7，10，12mL，置100mL量瓶中，用0.1mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，分別得質量濃度為1，3，5，7，10，12μg/mL的對照品溶液，測定峰面積，以峰面積 A對烏苯美司質量濃度 C（μg/mL）進行線性回歸，得回歸方程 A=31.91 C－0.603 7，r=0.999 9（n=6）。

精密度試驗：取質量濃度為1μg/mL的對照品溶液，重復測定6次，以峰面積計算，其精密度的 RSD為0.9％（n=6）。

回收率試驗：取烏苯美司原料藥80mg，精密稱定，置100mL量瓶中，用0.1mol/L鹽酸溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取1mL溶液16份，分別均勻分散在16格不銹鋼板中，每小格50mm× 50 mm，使每一格的區域內烏苯美司的理論含量為0.8 mg。用0.1 mol/L鹽酸溶液潤濕并擠干的棉簽，按擦拭取樣方法擦拭鋼板，每格一根棉簽，擦拭中間的8個小方塊。將擦拭后的棉簽分別置150mL具塞玻璃瓶中，分別精密加入100mL 0.1mol/L鹽酸溶液，充分搖動，使棉簽上的烏苯美司完全溶解，取上清液作為供試品溶液。按烏苯美司殘留量測定法測定并計算回收率。結果見表1。

3 討論

烏苯美司在水與乙醇中微溶，在稀酸與稀堿中有較大的溶解度，酸在生產設備中的殘留比堿在生產設備中的殘留更易清洗，所以在生產時用0.1 mol/L鹽酸溶液來清潔所用的反應釜和離心機等設備。烏苯美司殘留量測定也用0.1 mol/L鹽酸溶液作溶劑。

表1 烏苯美司回收率試驗結果（n=8）

紫外吸收峰吸光度小，不能檢測小于10×10－6的濃度。采用總有機碳法測定烏苯美司殘留量，方法學考察結果證實，其對生產設備清洗烏苯美司殘留量的檢測控制，在生產效率與檢測結果方面考慮均是一種切實可行的方法。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（二部）[M].北京：化學工業出版社，2010：附錄67.