復方中草藥抗真菌研究進展

張 平，劉海燕

（成都農業科技職業技術學院，成都 611130）

近年來，由于各種激素、抗生素和新型免疫抑制劑的臨床使用，真菌病的發病率逐年升高，但現在臨床上多使用的是西藥抗真菌藥物，這類藥物普遍存在著易產生耐藥性、療效一般、對機體毒性大及危害公共安全等問題[1]。目前，學者的研究方向是尋找高效、廣譜、低毒的抗真菌新藥，特別是從中草藥中尋找新型抗真菌藥物。中草藥具有價格低廉、毒副作用小、來源廣、不易出現耐藥性等優點，使研發臨床實用的抗真菌中草藥具備良好前景。從20世紀初開始，我國學者從中草藥中尋找抗真菌藥物，至今已發現300余種中草藥臨床表現有抗真菌的效果，同時進行了化學成分及藥物機理的研究。

1 體外抗真菌實驗

中草藥抗真菌的機理較復雜，研究顯示，有些中草藥單味藥并無明顯的抗真菌療效，但中草藥復方卻表現出顯著的臨床效果。中草藥抑菌實驗常應用于中草藥的篩選、提取過程的追蹤、抑菌譜效價的測定及臨床藥敏實驗等工作中。中草藥的體外抑菌實驗，目前的實驗方法主要有定性的瓊脂擴散法、定量測定的稀釋法。在試管內中草藥抗真菌實驗應注意選用不同的培養基及調整培養基的pH；應用平板瓊脂擴散法應注意平板中培養基的含量；擴大供檢真菌的種類及株數；注意接種量及接種真菌后判斷結果的時間等[2]。由于中草藥粗提物中含有多種化學成分，成分與藥理作用復雜，并且受多種因素影響，應用體外半固體藥基法篩選抗真菌中藥簡便經濟，是很便捷的初步篩選方法。宮毓靜等觀察164種中草藥95%乙醇提取物對白色念珠菌、啤酒酵母和威克海姆原藻3種真菌的作用，并對其中抑菌效果明顯的中草藥中的主要成分進行抗真菌藥敏試驗，結果表明，22種中草藥乙醇提取物對1種或幾種真菌顯示較強的抑制作用，單體化合物對3種真菌無顯著抑制作用，土槿皮、牡丹皮95%乙醇粗提物對3種真菌均有較強的抑制作用[3]。多數研究者認為試管稀釋法是一種比較好的中草藥抑菌實驗方法，但由于大多數中草藥制劑往往含有色素和雜質，本身帶有顏色，不易用肉眼直接辯明被檢測藥物抑菌效價，用分光光度計測定結果也不準確，所以要從各實驗管中取出一接種環轉種瓊脂培養基，再經37℃恒溫培養24 h后，觀察有無細菌生長加以確定其MIC和MBC[4]。楊國晶等實驗證實，10%和20%中草藥復方苦槿霜抑菌效果相當，顯著優于5%復方苦槿霜的抑菌效果（P＜0.05），復方苦槿霜的提取配方是白蘚皮、川芍、苦參、土槿皮、黃柏、地膚子、兒茶，兩種濃度的苦槿霜對皮膚常見致病性真菌（石膏樣毛癬菌、紅色毛癬菌、絮狀表皮癬菌）都有一定的抑制作用，同時與達克寧的抑菌效果相當（P＞0.05）[5]。林靜瑜等報道，癬藥膏的提取配方是丁香、蜂房等8味中草藥組成，研究表明，濃度＞5%對石膏樣毛癬菌、紅色表皮癬菌、絮狀表皮癬菌均有明顯的抗菌作用，1%濃度的提取液僅對石膏樣毛癬菌有一定的抗菌作用[6]。郭建輝等發現，癬凈散（地膚子、土荊皮、白蘚皮、苦參、金銀花、夏枯草、丁香）對紅色毛癬菌、絮狀表皮癬菌、石膏樣小孢子菌具有較強的抑制作用[7]。

2 中藥復方對真菌感染動物模型的臨床治療效果

在新型抗真菌藥物的研發中，一般是先在實驗室的試管中實驗，對有一定效果的藥物再制造動物真菌病的模型進行在體臨床實驗。但在試管內實驗所取得的結果與其在動物實驗所取得療效差別較大，如碘化鉀在試管實驗中無明顯的抗真菌效果，而臨床試驗中顯示其對某些深部真菌病具有臨床治療效果[8]。在實驗室試管實驗中，十全大補湯對白色念珠菌無抗真菌效果，但能明顯延長感染白色念珠菌小鼠的壽命。多年臨床證明，在實驗室試管中有效的藥物進行在體內實驗未必有效，相反某些在試管實驗中無明顯抗真菌作用的藥物在動物模型實驗則表現出一定的臨床治療效果。因此，動物模型實驗是考察中草藥對真菌病的療效及研究其耐藥性、毒副性、吸收等情況不可缺少的實驗項目。

淺部真菌病和深部真菌病是現在學者們應用廣泛的兩類動物真菌病模型。皮膚癬病和皮膚念珠菌病模型是淺部真菌病模型的代表，多數學者是利用皮膚癬病模型進行研究。實際研究中多用石膏樣毛癬病感染豚鼠制造皮膚癬病動物模型，同時又根據造模方法不同，將其分為皮膚創傷感染法、爪間感染法和穿刺感染法等，前兩者是以病灶的病理變化程度和病灶皮膚屑真菌培養的轉陰率為依據，后者是以病灶發病過程中直徑的變化大小為依據。珠菌病模型、隱球菌病模型和曲菌病模型是深部真菌病模型的代表，實驗的標準主要是造模動物的平均存活天數、生存率、靶器官或血液中活菌的數量和靶器官病變情況等。多數研究者認為，在使用淺部真菌病模型研究藥物療效時，爪間感染法和皮膚創傷感染法所致的動物感染程度較重，穿刺感染法所致的動物感染程度相對較輕，如選用爪間感染法和皮膚創傷感染法等研究中草藥的臨床效果，可考慮用病灶的病理變化程度作為判定的指標，若考慮用感染病灶皮膚屑真菌培養轉陰率作為判定的指標，則判斷較為困難，但選用動物感染程度相對較輕的穿刺感染法對療效一般的抗真菌中草藥也能表現出一定的陽性結果。實驗研究顯示，在研究中草藥治療內臟真菌病時多利用動物深部真菌病模型進行，較選用生存率為實驗指標，選擇用動物的靶器官病變情況、平均存活天數、靶器官或血液中活菌的數量作為判斷中草藥療效的指標則更易表現陽性結果。曾勇等報道，消炎抗癬霜的提取配方是蛇床子、冰片、樟腦等中草藥組成，消炎抗癬霜對須癬毛癬菌和石膏樣小孢子菌感染的豚鼠體癬模型的治療效果，臨床顯示在2周后觀察到消炎抗癬霜能夠提高真菌培養的轉陰率，同時能減輕真菌所致豚鼠皮膚病變程度和真菌的鏡檢檢出率[9]。梁君兒等試驗證實，使用由丁香、黃連、黃柏、薄荷等7味藥制成的香荷藥條治療大白兔白色念珠菌陰道炎，香荷藥條能有效抑制白色念珠菌的生長，使大白兔陰道中的白色念珠菌的轉陰率與達克寧栓無顯著性差異（P＞0.05）[10]。

3 復方中草藥治療真菌感染的臨床觀察

楊國晶等研究復方苦槿液（土槿皮15 g、川芎15 g、苦參15 g、黃柏15 g、白鮮皮15 g、地膚子15 g、兒茶10 g，加水1 200 mL，先以武火煎沸后用文火煎10 min，再用雙層紗布過濾后濃縮出藥液1 000 mL，即為10%復方苦槿液）治療皮膚淺部真菌病患者98例，經1～2個療程后痊愈78例（79.7%），顯效14例（14.3%），有效6例（6.0%），無效0，愈顯率94%。對照組40例，經1～2個療程治療后痊愈20例（50%），顯效12例（30.0%），有效 5例（12.5%），無效 3例（7.5%），愈顯率80%，兩組療效比較輕卡方檢驗有顯著性差異（P＜0.05），且均未出現不良反應，說明復方在臨床上對紅色毛癬菌等有較強的抑制作用[11]。劉慶彤等研究表明，由兒茶、茵陳、冰片、石菖蒲等制成的真菌Ⅰ號、由橘紅、茯苓、黃芪、菟絲子、山豆根、百部、炒黃芩等制成的真菌Ⅱ號和由茵陳、白術、太子參、黃苠、炒黃連等制成真菌Ⅲ號合劑的療效機制在于提高機體自身的免疫力和有抑制真菌生長，3個合劑在治療肺念珠菌病、念珠菌性口腔炎和念珠菌性腸炎都有肯定的療效[12]。

4 中草藥活性成分的抗真菌作用

4.1 蛋白質類

天麻對許多植物致病真菌具有較強的體外抑制作用，實驗從中草藥天麻中分離到的一種具有廣譜抗真菌活性的蛋白質。

4.2 萜類

β-2-松油烯、姜黃醇等中草藥有效成分具有優良的抗真菌作用與真菌細胞的不同部位作用所呈現出來額不同的生物活性有關[13]。

4.3 生物堿類

生物堿是中草藥中重要的有效成分，存在于生物體內的含氮堿性化合物。小檗堿可抑制自色念珠菌等生長和繁殖，紫檀芪、自鮮堿和澳洲茄胺致真菌細胞RNA和DNA的含量發生改變而發揮其抑菌的作用。

4.4 脂肪類化合物

脂肪類化合物主要是長鏈碳烷和脂肪酸。莪術的干燥根莖含有抑制常見皮膚癬菌和某些深部感染真菌繁殖生長的脂肪類物質，抗菌實驗表明，其對曲霉屬和青霉屬具有抗菌活性，實驗證實在莖皮中分離出3種簡單的脂肪類化合物。

4.5 其 他

張文娟研究顯示，肉桂醛有明顯的抗黃曲霉作用，進一步對肉桂醛的抗黃曲霉作用及超微結構的研究中發現，肉桂醛的抗菌機理是通過破壞真菌細胞壁，使藥物滲入細胞內，破壞細胞器而起強大的殺菌作用[14]。

5 小結

開發高效低毒的抗真菌藥物是我們追求的目標，通過臨床治療真菌病和真菌感染動物模型研究來開展中草藥復方的研發，發現臨床療效確切、價格低廉、毒副作用小和公共安全性高的抗真菌中草藥復方，為創制新的臨床抗真菌藥物奠定基礎。

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