p16蛋白及Ki-67在所謂肺硬化性血管瘤細胞中的表達及意義

齊鳳杰，趙樹鵬

(1遼寧醫學院，遼寧錦州121001;2遼寧醫學院附屬第一醫院)

所謂肺硬化性血管瘤(PSH)是一種迄今未能確定其組織來源及性質的少見肺腫瘤。多年來PSH的組織發生及生物學行為一直是人們爭論的焦點［1，2］。雖然大多數學者認為該腫瘤是“良性腫瘤”，有著較好的臨床經過，但一些學者觀察到部分腫瘤患者術后多年出現復發和轉移［3，4］，因此對于該腫瘤的起源及生物學行為做進一步探討具有重要意義。p16基因是比p53基因更重要的一種新型抑癌基因，其缺失突變參與腫瘤的形成，并與疾病的臨床進展及預后密切相關［5］。Ki67抗原是目前檢測腫瘤細胞增殖活性最可靠的指標，它存在于細胞周期中除G0期以外的所有階段。且Ki67有可能作為確定癌前人群中高危個體的生物學標志物［6］。本實驗將探討p16蛋白及Ki-67在PSH組織兩種主要細胞中的表達及意義。

1 材料與方法

1.1 材料 收集遼寧醫學院附屬第一醫院1998～2008年病理診斷為PSH的病變及病變旁正常肺組織蠟塊標本30例、肺炎性假瘤10例。30例PSH中，女28例、男2例。其中12例無自覺癥狀，為體檢時發現;18例有癥狀，分別表現為胸痛、咳嗽、痰中帶血。X線胸片或胸部CT顯示均為孤立性腫塊，多位于肺周邊，邊緣光滑，呈圓形、卵圓形高密度影，無毛刺及分葉狀改變。腫塊位于右肺18例，左肺12例。未發現多發病灶及轉移病例。

1.2 免疫組化 將蠟塊標本制成4 μm連續切片，經脫蠟、脫苯、水化后進行HE和SP法免疫組化染色。以已知陽性組織為陽性對照，PBS緩沖液代替一抗為陰性對照。每張切片隨機選取5個高倍視野，每個高倍視野計數100個瘤細胞。p16及Ki-67的判斷標準為:無著色及陽性細胞數≤5%為(-)，陽性細胞數＞5%為(+)。

2 結果

2.1 組織學觀察結果PSH瘤組織主要由兩種細胞組成，肺泡上皮細胞和上皮下間質中圓形或卵圓形核的多角形細胞，兩種細胞構成多樣結構:乳頭狀、實性區、海綿狀血管瘤樣區和硬化區。4種結構之間相互移形、混合存在。腫瘤細胞常發生透明變，泡沫細胞和淋巴細胞浸潤，含鐵血黃素沉積，并見鈣化和骨化等現象。其中1例PSH瘤組織與周圍正常組織界限不清，有向周圍間質浸潤傾向。但腫瘤細胞無明顯異型，未見核分裂像。

2.2 免疫組化結果PSH組織中p16蛋白僅1例多角形細胞呈陽性表達，而立方細胞均無表達;Ki-67在5例PSH多角形細胞陽性表達，立方細胞無表達;肺炎性假瘤中的肺泡Ⅱ型上皮細胞p16蛋白及Ki-67均陰性表達。其中瘤組織向周圍間質浸潤的PSH中，p16及Ki-67在多角形細胞中均呈陽性表達，兩種細胞中p16及Ki-67的陽性率無統計學意義。

2.3 隨訪結果 患者均采用電話或門診隨訪方式，時間為患者手術日期至2010年5月31日，具體為28～148個月，目前均健在，無一例出現復發及轉移現象。

3 討論

PSH由于組織學形態的多樣性及細胞成分的混雜，曾被認為是一種非腫瘤性增生性病變。直至1999年WHO才把PSH從非腫瘤性病變修改為真性腫瘤。PSH的組織起源曾有多種學說，目前多數學者認為PSH是一種來自原始呼吸道上皮的真性腫瘤，間質內的多角形細胞和襯覆在乳頭和腔隙內表面的立方細胞是腫瘤的主要成分，一些學者應用激光捕獲顯微切割技術及克隆性分析技術證實了這兩種細胞具有相同的起源［7］，但兩種細胞的形態及免疫表型存在顯著差異。Nakatani等［8］認為PSH組織中的多角形細胞與表面立方細胞上的差異是由于這兩種細胞處于不同的分化階段所致，表面立方細胞分化較成熟，所以上皮抗原表達強，而多角形細胞分化較差，處于過渡階段，所以一些抗原表達較弱。

本研究發現，PSH組織中p16蛋白在多角形細胞中僅見1例陽性表達，Ki-67也僅在5例多角形細胞陽性表達，兩種蛋白在表面立方細胞均呈陰性表達，提示PSH組織中多角形細胞增殖活性高，盡管兩者無統計學意義。在瘤組織向周圍間質浸潤的1例PSH組織中，p16及Ki-67在多角形細胞中均呈陽性表達。結合本實驗小組以前的研究結果［9］，PSH組織多角形細胞的p53基因突變率高于表面立方上皮細胞，提示多角形細胞可能比表面立方上皮細胞更具有侵襲潛能，這也有助于解釋為什么在轉移灶中出現的大部分是多角形細胞，而非表面立方上皮細胞。多角形細胞在PSH的生物學行為中可能起一定的決定作用。盡管隨訪的所有患者目前健在，無1例出現復發及轉移現象，但本組病例隨訪時間短，研究的指標也較單一，PSH的生物學行為有待今后增加研究指標和病例數及延長隨訪時間以進一步探討。

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［9］齊鳳杰，張秀偉，張永興，等.p53蛋白表達和基因突變在所謂肺硬化性血管瘤組織中的意義［J］.中國肺癌雜志，2006，9(2):147-151.