中藥定心膠囊的提取工藝研究

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(1.遼寧中醫藥大學附屬醫院，遼寧 沈陽 110032；2.遼寧省中醫藥研究院，遼寧 沈陽 110034；3.遼寧中醫藥大學,遼寧 沈陽 110032)

定心膠囊是臨床應用治療心律失常20余年的有效方劑，在《傷寒論》“炙甘草湯”的基礎上加減化裁而來，以益氣滋陰、活血化瘀、通陽復脈的中醫理論為依據研制的中藥制劑。本方為臨床經驗方，由黃芪，人參，甘草，麥冬，酸棗仁等藥物組成。筆者對其提取工藝進行了探索。人參和黃芪為方中的主藥，其有效成分為人參皂苷和黃芪皂苷，以總皂苷含量為評價指標，采用正交試驗設計法，確定了定心膠囊的最佳提取工藝條件。

1 儀器與材料

LC-10P液相泵LC-10UV紫外檢測器(大連江申分離科學技術有限公司生產)。色譜柱：Hypersil(大連依利特有限公司提供)5 μ，4.6 mm×200 mm.Spheri gel(大連江申分離科學有限公司提供)5 μ，4.6 mm×200 mm.所用試劑乙腈為色譜純(山東禹王實業有限公司禹城化工廠)，水為重蒸餾水，其它試劑為分析純。人參皂苷Rg 1對照品(中國藥品生物制品檢定所提供，含量測定用，批號0703-9812)；

2 方法與結果

2.1 提取液中總皂苷含量測定

2.1.1 人參皂苷Rg 1標準曲線制備 分別精密吸取1.08 mg/mL的人參皂苷Rg 1對照品溶液20、40、60、80、100和120 μL，分別置干燥具塞試管中，蒸干，分別精密加入5%香草醛-冰醋酸溶液0.2 mL及高氯酸溶液0.8 mL，搖勻，水浴70 ℃顯色15 min,流水冷卻，分別加入冰醋酸5 mL，搖勻，在540 nm波長處測定吸收度，計算，得標準曲線方程為：C=121.98A+5.70，r=0.999 2。

2.1.2 供試液的制備 精密吸取提取液適量，水浴蒸至無醇味，加水稀釋至50 mL，用水飽和正丁醇提取3次(30，30，20 mL)，合并正丁醇液，用氨試液洗滌2次，每次50 mL，棄去氨試液，正丁醇液續用水洗滌2次，每次50 mL，棄去水洗脫液，正丁醇液水浴蒸干，殘渣加甲醇使溶解，并定容于5 mL容量瓶中。精密吸取各供試液適量，分別置干燥具塞試管中，蒸干，按“標準曲線制備”項下操作，測定吸光度，計算，得出各次試驗提取液中總皂苷含量。

2.2 正交實驗設計

2.2.1 藥材提取正交試驗因素、水平的確定 根據文獻資料報道:總皂苷在水及乙醇溶液中有良好的溶解性，因此在正交實驗中，選擇水及乙醇回流提取方法。在預實驗中，以提取液中總皂苷含量為考察指標，對提取次數進行選擇，結果發現:50%乙醇提取2次與提取3次提取液中總皂苷含量相差無幾，故把提取次數限定為2次,同時以提取溶媒、加入量、提取時間等為考察因素，以提取液總皂苷含量為考察指標，按L9(3)4正交試驗表進行實驗，根據實驗數據的方差分析結果確定藥材提取的最佳工藝。正交試驗因素水平表見表1。

表1 人參、黃芪等藥材提取正交試驗因素水平表

2.2.2 試驗方法及實驗結果 稱取人參100 g，黃芪200 g，甘草200 g，麥冬200 g，酸棗仁200 g，共計9分，每分900 g，分別按正交試驗表進行試驗，提取液過濾,合并濾液,量取體積,按上述方法分別測定提取液中總皂苷含量,其正交試驗安排表及結果見表2。

從方差分析結果可以看出，提取溶媒(A)對提取液中總皂苷含量有顯著性影響，加入量(B)及提取時間(C)無顯著性影響，從節約生產成本角度， 擬選擇定心膠囊是由生地黃、人參、黃芪、麥冬、甘草、酸棗仁、丹參、紅花等8味中藥組成的復方制劑，方以炙甘草湯加黃芪補益心氣，氣血旺盛則血脈充盈，不續之脈得以復生，達到益氣滋陰養血復脈；加丹參、紅花等活血化瘀通脈，使炙甘草湯藥力更猛，直達病所，并且可以預防房顫血栓栓塞并發癥的發生。諸藥合用有益心氣助心陽，滋心陰養心血，通血脈復心脈之效，使心脈平復房顫減少或消失。經現代藥理學研究，定心方有很好的抗心律失常的作用。

表2 人參、黃芪等藥材提取正交試驗表及試驗結果

表3 人參、黃芪等藥材提取總皂苷方差分析結果

3 討論

定心膠囊為中藥復方制劑，考察生產工藝的優劣之一，是通過考察制劑中的有效成分含量進行的。該復方中主藥人參和黃芪的有效成分為人參皂苷和黃芪皂苷，因此將方中的有效成分總皂苷含量作為優選正交方案的指標，可以較好的反映本品的質量。本試驗篩選的定心膠囊優化工藝為A1B3C3,即藥材加水8倍量和6倍量提取2次,每次提取1 h。該工藝穩定可行，可作為定心膠囊生產的提取工藝。本方制備工藝簡單,生產成本低,適合醫院制劑生產。經本院臨床使用,療效確切,服用方便,深受患者歡迎。