豬精液稀釋和保存試驗

王玉祥,譚錫國,金德平,楊開梅

(永勝縣畜牧局畜牧站,云南 永勝 674200)

為了更好地推廣、普及豬人工授精工作,延長稀釋精液的保存時間,2010年 5～9月,筆者選擇了 3種稀釋液配方和2種保存溫度進行豬精液稀釋、保存的試驗,以供當地生產使用,現將試驗結果報告如下:

1 材料和方法

1.1 材料

(1)供試精液:取自永勝縣生豬標準化生產核心群種豬場、三川鎮希望生態養殖場、三川鎮興旺養殖場、永勝縣豬統一供精站(南片)的長白、大約克、杜洛克種公豬。供精豬年齡為 1.5～4.0歲,體質健壯而健康,飼養管理相近,供試鮮精液的活力≥0.8。

(2)稀釋液配方:見表 1。

表 1 豬精液稀釋液配方

1.2 方法

(1)稀釋液配制:稀釋液使用前 1 h,用電子秤按500mL蒸餾水劑量分別稱量Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ配方中的藥品(青、鏈霉素除外)進行配制。配制好的稀釋液分別貼上Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ標簽后置于高壓滅菌器中進行15 Ib 30min消毒,消毒結束后取出,冷卻后加入定量的青、鏈霉素備用(Ⅲ配方除外)。

(2)精液的采樣:從上述豬場(供精站點)中隨機抽取種公豬進行采精。

(3)精液的稀釋:將采集后的同一公豬精液均勻分成 3份,分別用 3種配方稀釋液按 1∶1比例及時進行稀釋(一般不超過 30m in),稀釋前后精子活力與原精液無顯著差異者作保存試驗。

采精和精液稀釋嚴格按豬人工授精相關操作技術規程進行。

(4)稀釋精液保存:將按各個配方稀釋后的精液用一次性精液分裝瓶分裝,靜置 2 h后,分別同時置于常溫(15～28℃)和 17℃恒溫箱中保存。保存中的稀釋精液每間隔12 h輕輕搖動并倒置1次。

1.3 測定項目

(1)精子活力:在 100～200倍鏡下觀察精液中呈直線運動精子所占的百分比,按 0.1～1.0的十級評分法測定。活力每間隔 12 h測定 1次,測定時需將精液樣片置于 37℃的恒溫板上。

(2)精子的存活時間:包括精子達 0.5級活力的存活時間和最大存活時間(直至無活動精子為止)。每間隔 12 h觀察 1次。

(3)稀釋液 pH值:用 pH比色試紙進行測定。

(4)每天作好鏡檢活力、存活時間、室溫等詳細記錄。

1.4 試驗處理

本試驗按如下處理進行 8次重復稀釋、保存試驗。

表 2 各處理保存溫度

2 結果與分析

2.1 稀釋液 pH值 見表 3。

表 3 稀釋液pH值

2.2 存活時間

將 8次重復稀釋、保存試驗所得的數據進行統計整理后,去掉數值最大和最小 2次試驗數據,將其余試驗數據整理后進行方差分析,并用SSR(新復極差)法進行差異顯著性檢驗。經檢驗,T2與 T1間差異極顯著,B2與 B1間差異極顯著,B2與B3間差異顯著,B1與 B3間差異不顯著(見表 4)。

(1)稀釋保存效果:見表 4、4-1～4-4。

表 4 稀釋保存效果 h

(2)0.5級活力存活時間平均數比較:見表 4-1、4-2。

表 4-1 保存溫度(T)間平均數比較 h

表 4-2 配方(B)間平均數比較 h

(3)最大存活時間平均數比較:見表 4-3、4-4。

表 4-3 保存溫度(T)間平均數比較 h

表 4-4 配方(B)間平均數比較 h

3 結論

(1)在所選的3種稀釋液配方中,Ⅱ(B2)配方的稀釋液效果最好;保存溫度以 17℃保存的效果顯著優于常溫保存。

(2)Ⅲ(B3)配方系市場上出售的稀釋粉成品,雖然取用方便,但成本較高(一般售價在 10元以上),而且每袋開啟后需一次性用完,不適于一般的小規模供精站(點)。

(3)試驗結果表明:在整個試驗處理組中,T2B2的效果最好,即采用Ⅱ(B2)配方稀釋后置于 17℃中保存的稀釋精液精子存活時間最長,保存 3～4 d仍然可以用于輸精,而且費用低廉,比較適合于一般規模的人工供精站(點)使用。