氣相色譜法測定復方丹參片中冰片的含量及含量均勻度

黃 捷， 吳桂凡

(廣西食品藥品檢驗所，廣西南寧 530021)

復方丹參片是由三七、丹參、冰片三味藥加工而成的片劑，具有活血化瘀、理氣止痛的功效［1］580。其中丹參祛瘀止痛，活血通經，清心除煩［1］70，三七散瘀止血，消腫定痛［1］11，冰片開竅醒神，清熱止痛［1］136，三味藥相輔相成，缺一不可。復方丹參片中丹參和三七的成分定量測定研究文獻較多［2-4］，且已采用指紋圖譜的方法進行了控制研究，而冰片定量測定報道較少［5-6］，冰片在處方中投料量較少［7-8］，且具有揮發性，在生產總混不易混勻，為考察本品中冰片的含量均勻度，特制定本法，從而達到控制本品中冰片的含量均勻度，經試驗研究選用氣相色譜法來測定本品中冰片的含量，方法可行，質量可控。

1 儀器與試藥

日本島津公司2010氣相色譜儀，FID檢測器;龍腦對照品(中國藥品生物制品檢定所提供，批號:110881-200706，含量以99.2%計，供含量測定用);異龍腦對照品(中國藥品生物制品檢定所提供，批號:1512-200201，供含量測定用);其余試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱 DB-WAX(柱長 30 m，內徑 0.53 mm，膜厚度0.25 μm)，進樣口溫度180℃，檢測器溫度200℃，柱溫135℃，進樣量為 1 μL，分流比5 ∶1。

2.2 對照品溶液的制備

取水楊酸甲酯適量，精密稱定，加乙酸乙酯制成每1 mL含5 mg的溶液，作為內標溶液。另取龍腦對照品和異龍腦對照品各10 mg，置20 mL量瓶中，加乙酸乙酯使溶解并稀釋至刻度。精密量取5 mL，至10 mL量瓶中，加內標溶液1 mL，加乙酸乙酯至刻度，搖勻即得。

2.3 供試品溶液的制備

取本品10片，糖衣片除去包衣，研細，精密稱取0.3 g，置10 mL量瓶中，加乙酸乙酯8 mL，超聲處理(功率320 W，頻率40 kHz)30 min，放冷，加內標溶液1 mL，加乙酸乙酯至刻度，搖勻，濾過，即得。

2.4 線性關系考察

2.4.1 對照品貯備液制備 精密稱取龍腦對照品30.40 mg，異龍腦對照品26.45 mg，置20 mL量瓶中，加乙酸乙酯溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得(濃度為1.037 mg/mL)。

2.4.2 線性測定 分別精密吸取2.2項的對照品溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、8.0 mL 至10 mL 量瓶中，加乙酸乙酯稀釋至刻度，搖勻。進樣1 μL。

結果得龍腦回歸方程為:Y=17.3X－0.094 8(n=6，r=0.999 7)。

異龍腦回歸方程為:Y=17.2X－0.083 7(n=6，r=0.999 7)。

結果表明:龍腦在進樣量為7.6～121.6 ng范圍內時，進樣量與龍腦峰面積呈良好的線性關系。異龍腦在進樣量為6.6～105.8 ng范圍內時，進樣量與異龍腦峰面積呈良好的線性關系。

2.5 精密度試驗

對同一供試品溶液，按正文擬訂的色譜條件，連續測定6次。結果6次測定平均含龍腦為2.392 0 mg/片，RSD為0.31%(n=6)，異龍腦為 1.403 8 mg/片，RSD 為 0.38%(n=6)，試驗表明，本法的精密度較好。

2.6 重復性試驗

對同一批樣品，按定量測定的方法平行測定6份，結果含龍腦平均值為2.383 8 mg/片，RSD 為 0.79%(n=6)，含異龍腦平均值為1.394 7 mg/片，RSD為0.81%(n=6)，結果表明，本法的重現性較好。

2.7 穩定性考察

對同一供試品溶液，每隔一定時間測定一次，共測定4次，試驗表明，在25 h內，被測物穩定。

2.8 加樣回收率測定

2.8.1 對照品貯備液的制備 精密稱取龍腦對照品14.98 mg，異龍腦對照品10.01 mg，置25 mL量瓶中，加乙酸乙酯溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品貯備液。

2.8.2 回收率的測定 取已測定的樣品(龍腦7.645 mg/g，異龍腦 4.473 mg/g)9 份，稱取約0.15 g，精密稱定，置10 mL量瓶中，第1～3份精密加入對照品貯備液1 mL，第4～6份精密加入對照品貯備液2 mL，第7～9份精密加入對照品貯備液3 mL，照供試品溶液項下的方法制備、測定。結果表明，用本法測定龍腦、異龍腦的量，回收率符合規定。結果見表 1，表 2。

表1 龍腦加樣回收試驗結果

圖1 GC色譜圖

表2 異龍腦加樣回收試驗結果

2.9 干擾試驗

按處方量比例稱取除冰片外其余藥味，按制法制成陰性樣品，照供試品溶液制備項下的方法提取，測定。結果在龍腦和異龍腦峰相應的保留時間無干擾峰，表明處方中其它成分對測定無影響，見圖1。

2.10 樣品的測定

取5批樣品，按2.3項下方法制備供試品溶液，平行測定2份，計算冰片的含量，結果見表3。

表3 5批樣品冰片測定結果

2.11 樣品含量均勻度

取本品1片，糖衣片除去包衣，研細，置10 mL量瓶中，用乙酸乙酯8 mL分次洗滌研缽，洗滌液并入量瓶中，超聲處理30 min，放冷，加內標溶液1 mL，加乙酸乙酯至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，按樣品的定量測定方法測定冰片含量均勻度，結果見表4。

3 討論

3.1 內標的選擇

表4 5批樣品含量均勻度測定結果

取水楊酸甲酯和異丙醇，各加乙酸乙酯配制成每1 mL含5 mg，做為內標溶液。按上述方法測試，結果水楊酸甲酯出峰時間(24 min)和龍腦峰(18 min)較接近，峰面積大小也較合適，而異丙醇在35 min都未出峰，故內標溶劑選擇水楊酸甲酯。

3.2 不同廠家，不同的批號之間，冰片的含量差異較大，冰片的均勻度均較差，處方中冰片投藥量較少，每片只有8 mg，從均勻度的測定結果提示對于少量、易揮發的冰片，與大量的中藥浸膏較難混合均勻，結果冰片損失和均勻度出現較大差異。從測定樣品結果反映出復方丹參片中冰片的含量和均勻度均有必要進一步制定標準進行質量控制。

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