伊維菌素預混劑質量標準中鑒別方法的商榷

李躍龍，馮學忠，黎華鵬，葉渭源，方炳虎，張魁華

(1.廣東省獸藥與飼料監察總所，廣州 510230;2.廣東大華農動物保健品股份有限公司，廣東新興 527400;3.華南農業大學獸醫學院，廣州 510642)

伊維菌素是新型的廣譜、高效、低毒抗生素類抗寄生蟲藥，屬大環內酯類，主要含伊維菌素B1(B1a+B1b)［1－3］，對體內外寄生蟲特別是線蟲和節肢動物均有良好驅殺作用［4］。廣泛用于牛、羊、豬、馬的胃腸道線蟲、肺線蟲、牛皮蠅蛆、紋皮蠅蛆、羊鼻蠅蛆、羊癢螨和豬疥螨等，犬的腸道線蟲、耳螨、疥螨、心絲蟲和微絲蚴，以及家禽胃腸線蟲和體外寄生蟲［5－12］。伊維菌素預混劑質量標準收載于《進口獸藥質量標準》一九九九年版，采用薄層色譜法［13］進行檢查。經過反復實驗研究，發現該標準中【鑒別】(1)的檢查方法存在缺陷，需要修正。

1 材料與方法

1.1 材料 CP225D型電子天平，德國賽多利斯有限公司;UV－2450型紫外可見分光光度計;ZF－C型三用紫外分析儀。

伊維菌素對照品，批號為 K0190811，含量93.9%，中國獸醫藥品監察所;伊維菌素，批號10050301，河北威遠動物藥業有限公司;玉米芯細粉，批號20100705，濟南市長清區科農玉米加工廠;伊維菌素預混劑，規格為100 g:0.2 g，批號為20100901、20100902、20100903，廣東大華農動物保健品股份有限公司;硅膠 GF254薄層板，批號20100702，青島海洋化工廠;丙酮、醋酸乙酯、甲醇、二氯甲烷、三氯甲烷為分析純試劑。

1.2 方法

1.2.1 確定檢測波長 取伊維菌素對照品適量，加甲醇制成每1 mL中約含伊維菌素0.015 mg的溶液，搖勻，以甲醇為空白，照紫外分光光度法［13］，在190～400 nm波長范圍內進行紫外吸收圖譜掃描。

1.2.2 伊維菌素對照品溶液的制備 精密稱取伊維菌素對照品25 mg于25 mL量瓶中，加丙酮溶解，并定容稀釋成1mg/mL，搖勻，作為伊維菌素對照品溶液。

1.2.3 供試品溶液的制備 取伊維菌素預混劑適量，加丙酮制成每1 mL中約含伊維菌素1 mg的溶液，置超聲浴中超聲15 min，過濾，取濾液，作為供試品溶液。

1.2.4 原料溶液的制備 取伊維菌素(原料)適量，按1.2.2項下方法稀釋，搖勻，作為原料溶液。

1.2.5 空白溶液的制備 按處方比例稱取輔料適量，制備不含伊維菌素的空白樣品，按1.2.3項下方法稀釋，取濾液，作為空白溶液。

1.2.6 薄層色譜法檢測 把 1.2.2、1.2.3、1.2.4、1.2.5項制備的溶液，按伊維菌素預混劑質量標準中【鑒別】(1)的方法進行前處理，采用薄層色譜法進行檢測，檢測波長為254 nm和365 nm。

2 結果

2.1 檢測波長結果 結果如圖1所示。在波長254 nm處有紫外吸收，而在波長365 nm處沒有紫外吸收。因此，選擇254 nm為檢測波長。

圖1 伊維菌素紫外吸收圖譜

2.2 在波長為365 nm進行檢查的結果 置紫外光燈(365 nm)下檢視，供試品、對照品、原料、空白溶液在硅膠GF254薄層板上都沒有主斑點顯示。

2.3 在波長為254 nm進行檢查的結果 結果如圖2所示。置紫外光燈(254 nm)下檢視，供試品、原料在硅膠GF254薄層板上，所顯主斑點的顏色和位置與對照品溶液的主斑點相同;空白溶液在硅膠GF254薄層板上都沒有主斑點顯示。

圖2 薄層色譜圖(在254 nm紫外光燈下檢視)

3 討論

3.1 取伊維菌素對照品溶液，照“紫外可見分光光度法”進行掃描，結果在365 nm的波長處無紫外吸收，在254 nm的波長處有紫外吸收，而伊維菌素預混劑質量標準中的【鑒別】(1)要求在紫外光燈(365 nm)下進行檢視。這是不能客觀反映出樣品的真實特性。

3.2 伊維菌素預混劑質量標準中【鑒別】(1)要求在硅膠GF254薄層板上點樣，然后在紫外光燈(365 nm)下進行檢視，但實驗結果顯示，在紫外光燈(365 nm)下檢視無斑點，而置紫外光燈(254 nm)下檢視有清晰斑點，此結果與現行質量標準不符。

3.3 為了使伊維菌素預混劑質量標準中【鑒別】(1)的方法具有可操作性，根據實驗情況，筆者建議把“置紫外光燈(365 nm)下檢視，供試品所顯主斑點的顏色和位置應與對照品的主斑點相同。”改為“置紫外光燈(254 nm)下檢視，供試品所顯主斑點的顏色和位置應與對照品的主斑點相同?！?/p>

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