高效液相色譜法測定琥珀安神丸中五味子醇甲含量

吳宏巖，孫長仁，孫 坤

(吉林省白山市藥品檢驗所，吉林 白山 134300)

琥珀安神丸是由地黃、當歸、五味子、柏子仁等18味藥材組方，具有育陰養血、補心安神功效，用于心血不足、怔仲健志、心悸失眠、虛煩不安[1]。部頒標準中沒有含量測定方法，為更有效地控制該制劑的質量[2]，筆者采用高效液相色譜法(HPLC)法測定琥珀安神丸的五味子醇甲的含量，現報道如下。

1 儀器與試藥

安捷倫1200型效液相色譜儀。五味子醇甲對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號為171242－200404，供含量測定用);琥珀安神丸(吉林吉特藥業有限公司);甲醇(色譜純)，水(純化水)。

2 方法與結果

2.1 色譜條件與系統適用性試驗

色譜柱:kromasil C18柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm);流動相:甲醇 － 水(65 ∶35);流速:0.8 mL/min;柱溫:室溫;檢測波長:250 nm;進樣量:對照品溶液10 μL，供試品溶液20 μL。在此色譜條件下，理論板數按五味子醇甲峰計不低于3 000，五味子醇甲與雜質峰的分離度大于1.5，峰形良好，陰性對照品溶液無干擾(圖1)。

圖1 高效液相色譜圖

2.2 溶液制備

精密稱取五味子醇甲對照品適量，加甲醇制成每1 mL含10 μg的對照品溶液。取樣品10丸，剪成長約5 mm的碎條，取5 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25 mL，稱定質量，超聲處理40 min，放冷，用甲醇補足減失的質量，搖勻，濾過;精密量取續濾液2 mL，置中性氧化鋁柱(100 ～200 目，1.5 g，內徑 1 cm)上，用 50%甲醇洗脫，收集洗脫液約9 mL，置10 mL量瓶中，加50%甲醇至刻度，搖勻，即得供試品溶液。按處方比例及工藝自制不含五味子陰性樣品，按供試品溶液制備方法制得陰性對照品溶液。

2.3 方法學考察

線性關系考察:精密吸取對照品溶液(23.54 μg/mL)2，4，6，8，10 μL，依法測定，以進樣量為橫坐標、峰面積為縱坐標繪制標準曲線，回歸方程 Y=2 580 869 X －560.3，r=1.000 0(n=5)。結果表明五味子醇甲進樣量線性范圍是 0.047 08 ～ 0.235 4 μg。

精密度試驗:取同一對照品溶液，連續進樣6次，依法測定。結果峰面積的 RSD為1.06%(n=6)，表明儀器精密度良好。

穩定性試驗:取供試品溶液，于 1，5，10，15，20 h 后測定。結果峰面積的 RSD為1.23%(n=5)，表明供試品溶液20 h內穩定。

重復性試驗:取同一批(批號20060201)樣品，依法制備供試品溶液并測定。結果的 RSD為1.52%(n=5)，表明方法重現性良好。

加樣回收試驗:精密稱取已知含量的樣品6份，分別精密加入對照品溶液適量，依法測定含量并計算回收率。結果見表1。

表1 五味子醇甲加樣回收試驗結果(n=6)

2.4 樣品含量測定

依法測定 3批樣品，結果批號為 20050803，20060201，20060401 樣品中五味子醇甲含量分別為 1.08，1.02，1.24 mg/丸。

3 討論

比較了甲醇超聲后使用中性氧化鋁柱的含量測定效果，結果含量穩定，色譜圖中雜質峰較少，且在五味子醇甲峰附近無雜質峰干擾。該方法精密度、重現性好，可以有效地控制產品質量。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[M].北京:化學工業出版社，2005:44.

[2]WS3－B－2621－97，衛生部藥品標準·中藥成方制劑(第十三冊)[S].