分光光度法測定阿奇霉素分散片的含量

郝萬福

阿奇霉素為新一代15元大環內酯類抗生素。其結構和紅霉素相似，但與紅霉素相比，其化學性質更穩定，口服吸收好、耐胃酸，血藥濃度尤其是組織內藥濃度比紅霉素高且半衰期較長，抗菌譜比紅霉素廣，抗菌作用強。2005年版《中國藥典》(二部)規定其含量測定方法[1]為微生物效價測定法，此法操作煩瑣、耗時。筆者選用分光光度法測定阿奇霉素分散片中阿奇霉素的含量，現報告如下。

1 儀器與試劑

CHB-1抗生素效價測量儀(北京潮聲);島津UV-2201型紫外分光光度計(日本島津);阿奇霉素標準品(中國藥品生物制品檢定所，批號為30352-200405，含量每毫克相當于936單位);阿奇霉素分散片(本廠生產，批號為 0510001、0510002、0512004);鹽酸、磷酸氫二鈉為分析純。

2 方法與結果

2.1 檢測波長的選擇 精密稱取阿奇霉素標準品適量，加乙醇(每2 mg約加入乙醇1 ml)使其溶解后，用pH6.0的磷酸鹽緩沖液稀釋成每ml中約含50 μg，阿奇霉素的溶液，精密量取5.0 ml，精密加入75%的硫酸溶液5.0 ml，振搖混勻，放置30 min，冷卻至室溫。以溶出介質為空白，在190 nm～700 nm范圍內進行掃描，結果阿奇霉素在482 nm處有最大吸收，且輔料在此波長處無吸收，故選擇482 nm作為測定波長。

2.2 線性關系試驗 精密稱取阿奇霉素標準品50 mg置100 ml量瓶中，加乙醇25 ml超聲使其溶解后，用pH6.0的磷酸鹽緩沖液稀釋至刻度，搖勻，得對照品溶液。精密量取該溶液適量，用pH6.0的磷酸鹽緩沖液稀釋成阿奇霉素濃度分別為 20 μg/ml、30 μg/ml、40 μg/ml、50 μg/ml、80 μg/ml 的溶液，分別精密量取5.0 ml，各精密加入75%的硫酸溶液5.0 ml，振搖混勻，放置30 min，冷卻至室溫。分別在482nm處測定其吸收度，以濃度C(μg/ml)對吸收度(A)進行線性回歸，回歸方程為C=95.308A+4.2142，r=0.9936，n=5。結果表明阿奇霉素的濃度在20～80 μg/ml范圍內與吸收度呈良好線性關系。

2.3 精密度與穩定性試驗 取上述線性回歸分析中顯色后的對照品溶液(阿奇霉素濃度為50 μg/ml)依法測定吸收度5次，結果吸收度的RSD為0.11%(n=5)，表明儀器精密度良好。

將顯色后的該溶液放置 1、2、3、4、8、10、24 h，在 482 nm處測定其吸收度。結果吸收度的RSD為0.54%，表明溶液在24 h內穩定。

2.4 重現性試驗 取同一批號的樣品5份，按樣品含量測定項下方法測定，結果含量的RSD為0.80%，表明方法重現性較好。

2.5 回收率的測定 精密稱取阿奇霉素標準品適量，按阿奇霉素分散片處方比例加入其他輔料，照“樣品含量測定”項下測定阿奇霉素含量，計算回收率。高、中、低3個濃度的回收率分別分為99.2%，99.0%，99.8%;RSD＜0.42%。

表1 樣品含量測定結果(標示量的%)

2.6 樣品含量測定 取阿奇霉素分散片20片，精密稱定，研細，精密稱取適量(約相當于阿奇霉素50 mg)，置10 ml量瓶中，加入乙醇25 ml超聲使其溶解后，用pH6.0的磷酸鹽緩沖液稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取5 ml置50 ml量瓶中，用用pH6.0的磷酸鹽緩沖液稀釋至刻度，搖勻再精密量取5 ml，精密加入75%的硫酸溶液5.0 ml，振搖混勻，放置30 min，冷卻至室溫，在482nm處測定其吸收度。另取阿奇霉素標準品，同法測定，按吸收度計算。并與2005年版《中國藥典》(二部)的微生物效價測定結果進行比較，結果(見表1)。

3 討論

3.1 阿奇霉素易溶于無水乙醇和稀鹽酸中，筆者曾采用三種不同pH值的溶劑作為溶出人質，結果發現，用0.1 mol/L磷酸氫二鈉溶液(0H約為9.39)和0.1 mol/L鹽酸溶液作為溶出介質時，所測得的阿奇霉素含量均偏高，故以pH6.0的磷酸鹽緩沖液作為溶劑，結果滿意。

3.2 用分光光度法測定阿奇霉素分散片的含量與微生物效價測定的結果比較一致，而前者簡便、快速、準確，適合于對產品的質量控制。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(二部).北京:化學工業出版社，2005:293.