輸血前不規則抗體篩查結果分析

潘志勇

根據我國《臨床輸血技術規范》的要求對輸血史或妊娠史的患者進行不規則抗體篩選，該項陽性的患者一旦輸入具有相應抗原的紅細胞，抗原、抗體就會發生免疫性結合，在補體的參與下，輸入的紅細胞發生溶解，即發生急性溶血性輸血反應或者發生遲發性溶血性輸血反應。急性溶血性輸血反應患者出現發熱、貧血、黃疸和血紅蛋白尿，嚴重時甚至危及其生命。因此，在輸血中要警惕這種輸血反應發生的可能性。當不規則抗體篩選陽性時，必須進一步作抗體鑒定，確定其特異性后，再輸入無相應抗原的紅細胞或交叉配血相合的紅細胞，才能達到安全輸血的目的。因此，進行不規則抗體篩查非常重要。本文對我院2010年到2011年的配血標本進行不規則抗體篩查和抗體鑒定，現將鑒定結果報道如下:

1 材料與方法

1.1 材料 檢測標本均為對2010年到2011年本院住院患者需要輸血的患者血標本。微柱凝膠卡由Diana公司提供;篩選細胞、譜細胞、紅細胞血型定型免疫試劑由上海生物醫藥制品有限公司提供;單克隆血型抗體試劑均為國外原裝進口。

1.2 儀器 血清學專用離心機(KA-2200)，普通離心機80-2(上海手術器械廠)，HZS-M水浴振蕩儀(哈爾濱東聯電子技術有限公司)，水浴恒溫箱(上海醫用恒溫設備廠)，OLMPUS顯微鏡(日本)及Diana微柱凝膠專用設備。

1.3 微柱凝集法，向標示好Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的3個微柱反應池中加40 μl備檢血清，再加10 μl 5%相應篩檢紅細胞;每孔加1滴BLISS液，置37℃孵育10 min;取出置專用水平離心機離心5 min，觀察結果:紅細胞全部沉于微柱底部者為陰性，聚于微柱上面者為陽性(將陽性血清再用間接抗球蛋白試驗確證)。如抗體篩選陽性需進一步進行抗體鑒定，操作方法與上相同。自身抗體陽性的標本采用微柱凝膠自身抗體分型卡進行抗體分型，操作方法同上。

1.4 抗球蛋白試驗(試管法)取5支標識好Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、陽性對照、陰性對照的試管，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ管加5%相應篩檢紅細胞2滴和被檢血清2滴，陽性對照管加5%Rh(D)陽性紅細胞和IgG抗-D血清各2滴，陰性對照管加5%Rh(D)陽性紅細胞和AB型血清各2滴;各管37℃孵育1 h后用生理鹽水洗滌3次，再加抗球蛋白試劑2滴，2000r/min離心1 min，觀察結果:當陽性對照管和被檢管出現凝集，而陰性對照管不凝集時，即為陽性，說明血清中有不規則抗體存在。需進一步進行抗體鑒定，操作方法與上相同。

2 結果

不規則抗體檢測結果見表1。從表1中可見，不規則抗體陽性32例，其中同種抗體18例(56.25%)，自身抗體14例(43.75%)，同種抗體中以Rh血型系統最為常見，伴混合抗體的比率為30%(3/10);抗體類型多為IgG型抗體，與IgM型的比率為12∶7。自身抗體中冷自身抗體4例，抗體類型為IgM型;溫自身抗體10例，單純抗IgG抗體陽性2例，抗IgG、C3 d抗體同時陽性8例，抗體類型均為IgG型。對有同種抗體的患者輸入無相應抗原的紅細胞后，患者未發生溶血性輸血反應。有自身抗體的患者按自身溶血性貧血的輸血原則輸注洗滌紅細胞，首次不超過1 U單位，采用少量多次緩慢輸入后，患者貧血癥狀緩解。

表1 不規則抗體鑒定結果

3 討論

不規則抗體的篩查已廣泛應用于輸血反應的診斷與預防，特別是對有妊娠史和輸血史的患者。雖然不規則抗體在正常人群中檢出率僅為0.3% ～2%［1］，但它是引起遲發性免疫反應的主要原因。由于Rh血型系統抗原性較強，產生免疫性抗體的頻率較高，據報道每輸一個單位血使受血者致敏的風險為1%～1.6%，多次輸血產生同種抗體的幾率為15%～20%，對于連續輸血患者，3 d篩檢1次，或5～6 d篩檢1次［2，3］，以防止開始效價很低不易檢出，但經過輸血刺激，回憶性抗體效價迅速升高而引起溶血反應。因此，輸血前進行常規抗體篩選，以發現有臨床意義的不規則抗體，對臨床輸血安全具有重要的意義。

不規則抗體是指抗-A、抗-B以外的血型抗體，主要經輸血或妊娠等免疫刺激產生，常分為自身抗體和同種抗體，同種抗體一般具有特異性，自身抗體是非特異性的。不規則抗體類型有IgM，也有IgG型。近年來發展起來的微柱凝膠技術對這兩種類型的抗體都有很好的檢測效果，這種技術在國外輸血界已成為常規檢測方法［4，5］，我們在輸血前應用凝膠柱技術對患者標本進行不規則抗體篩查，與手工抗球蛋白法檢測的結果完全一致，可以準確地檢出患者體內的不規則抗體。本次調查結果顯示輸血前患者血清中的同種抗體的主要是Rh系統抗體，而臨床上發生遲發性溶血反應的也絕大部分是由Rh血型抗體引起的，其中以抗-E最多，也有報道抗-D大于抗-E［6］。臺灣的調查資料認為抗-D抗體在臺灣人中較為罕見，僅為1/235000，這與本次調查結果也不一致，可能與調查對象的選擇有關。理論上的解釋為D的抗原性強于E，但是黃種人D陰性頻率約3/1000，而E抗原陰性率為61%，因此，我們認為抗-D產生頻率應小于抗-E。MNSs系統抗體一般為冷反應性抗體，有學者認為其是無臨床意義的抗體，但若在37℃有反應性時，還會引起臨床急性輸血反應，應引起臨床的足夠重視。

對于同種抗體的輸血治療，原則上是然后根據抗體性質提前尋找相合的血液或采用其他方式輸血。在篩出不規則抗體后及時與血站聯系，以提前準備相合血液，或采取自身輸血，為患者提前儲血。對含有自身抗體的自身溶貧患者，抗體篩選也可以出現假陽性結果，但患者自身紅細胞也有凝集，應該進行自身抗體分型，選擇與受血者Rh系統血型完全一致者進行輸血。IgM型抗體一般在37℃有活性，一般在體內不能引起溶血反應，但患者處于低溫麻醉狀態下手術時應注意，因為此類抗體可激活補體途徑導致溶血反應。因此輸血時也要注意加溫輸注。

因此，對于需要輸血的患者進行抗體篩選，可以及早發現不規則抗體，從而提前準備相合的血液，以保證體內有不規則抗體的患者及時用血，避免由血型不合引起的輸血反應。

［1］肖星莆.輸血技術手冊.四川科學技術出版社，1992:95.

［2］胡永紅，李勇.抗體檢測和鑒定.見:李勇，楊貴貞主編.人類紅細胞血型學實用理論與實驗技術.中國科學技術出版社，1999:139-157.

［3］孔令宜.紅細胞檢查.見:孔令宜，馬三科，馬長仁，等編著.成份輸血與臨床應用.遼寧科技出版社，1994:369-429.

［4］Cate JC，Reilly N.Evaluation and implementation of the gel test for indirect antiglobulintesting in a community hospital laboratory.ArchPathol Lab Med，1999，123(8):693.

［5］Langston MM，Procter JL，Cipolin KM，et al.Evaluation of the gel system for ABO grouping and D typing.Transfusion，1999，39(3):300.

［6］張麗，矯淑珍，劉杰，等.抗-D、抗-C、抗-E引起溶血性輸血反應. 中國輸血雜志，1999，12(3):182-183.