兩個不同廠家試劑盒檢測EB病毒EA-IgA、VCA-IgA的比較

羅玲 曾樺 羅曉紅

EB病毒(Epstein-Barr)感染與鼻咽癌等人類惡性疾病的發生密切相關，對診斷鼻咽癌有較高的特異性。定性檢測血清中EB病毒抗體已成為早期診斷鼻咽癌的有力工具。近年來隨著免疫分析技術的發展，國內外已廣泛采用ELISA法檢測EB病毒抗體用于鼻咽癌的診斷和篩查。本文就兩個不同廠家的試劑盒在檢測EB病毒EA-IgA、VCA-IgA的臨床價值進行比較。

1 資料與方法

1.1 標本來源 收集本院2010年1月1日至2010年12月31日在門診和住院部經病理檢查確診為鼻咽癌的患者的血清標本184例，另外本院同期健康體檢者的血清標本184例，年齡為25～65歲。

1.2 試劑

1.2.1 國內IBL公司生產的EB病毒EA-IgA試劑，批號:EAA-158;VCA-IgA試劑，批號:EBA-193。

1.2.2 德國歐蒙公司生產的EB病毒EA-IgA試劑，批號:E100708BO;VCA-IgA試劑，批號:E100909AR。兩個廠家的試劑均在有效期內使用。

1.3 儀器 MULTISKAN MK3酶標儀(芬蘭雷勃)，HHB型電熱恒溫溫育箱(廣州)等。

1.4 方法 實驗操作嚴格按照說明書進行，常規條件下進行測定。對于檢測結果不一致的樣本，則需要結合留樣樣本原來的病理及臨床診斷結果作為金標準進行判斷，如果臨床留樣前病理檢測結果為陽性，或者臨床診斷為鼻咽癌，則樣本判為真陽性(實驗試劑陽性時)，或者假陰性(實驗試劑陰性時);如果臨床留樣前病理檢測結果為陰性，則判為真陰性(實驗試劑陰性時)，或者假陽性(實驗試劑陽性時)。對比兩個廠家試劑的檢測結果，比較分析兩種試劑的陽性符合率，陰性符合率以及總體符合率，采用卡帕檢驗，驗證方法的一致性。卡帕檢驗采用Cohen氏法。當卡帕值為0.4～0.7 h，兩種方法具有高度一致性;當卡帕＞0.75時，兩種方法具有極端的一致性。

2 結果

2.1 兩個試劑盒檢測結果與臨床病理檢測結果比較 歐蒙試劑檢測EA-IgA的診斷效率為73.91%，IBL試劑檢測EAIgA的診斷效率為74.18%。歐蒙試劑檢測VCA-IgA的診斷效率為76.09%，IBL試劑檢測 VCA-IgA的診斷效率為81.25%。兩者比較，差異無統計學意義(P＞0.05)，見表1和表2。

表1 歐蒙試劑與IBL試劑對EA-IgA的檢測結果(例，%)

表2 歐蒙試劑與IBL試劑對VCA-IgA的檢測結果

2.2 IBL試劑與歐蒙試劑的符合率統計

2.2.1 IBL試劑與歐蒙試劑檢測EA-IgA的對比陽性符合率為66.07%;陰性符合率為89.45%;總符合率為82.34%。Kappa值=0.57，說明此兩個試劑盒在驗證EA-IgA時，具有高度一致性。見表3

表3 IBL試劑與歐蒙試劑檢測EA-IgA的對比

2.2.2 IBL試劑與歐蒙試劑檢測VCA-IgA的對比 陽性符合率為67.57%;陰性符合率為99.32%;總符合率為80.16%。Kappa值=0.62，說明此兩個試劑盒在驗證VCA-IgA時，具有高度一致性。見表4

表4 IBL試劑與歐蒙試劑檢測VCA-IgA的對比

3 討論

EB病毒(Eostein-Barr virus，EBV)是1964年Epstein和Barr在研究非洲兒童的惡性淋巴瘤時，從瘤細胞培養中發現的一種嗜人類B淋巴細胞的γ皰疹病毒，能夠在B淋巴細胞中建立起隱性感染，刺激細胞的增生與轉化，基因組全長184 kb。目前可感染人類的EBV有兩種亞型:EBV-1和EBV-2，其區別在于編碼核抗原的基因構成不同。EBV可引起兩種不同類型的感染，一種是增殖性感染，另一種是非增殖性感染，在一定條件下或某些誘導因子的作用下，潛伏的EBV基因組可被激活而轉化為增殖性感染［1］。被病毒感染的細胞可產生各種抗原，能刺激機體產生相應的抗體，EB病毒的抗原成分有:EB病毒核抗原(EBNA)、早期抗原(EA)和晚期抗原等，病毒的晚期抗原主要有組成病毒核衣殼的病毒衣殼抗原(VCA)、淋巴細胞識別病毒靶抗原(YDMA)和病毒的晚期膜抗原(MA)。EB病毒引發了全球癌癥的1%，并占所有感染性癌癥的5.6%，根據國際癌癥研究署對致癌因子的分類標準，EB病毒被列在第一組致癌因子中。EBV感染與多種人類腫瘤發生相關，包括鼻咽癌(NPC)、伯基特淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、胃癌等，NPC與Burkitt淋巴瘤的發生具有明顯的地區限制，據WHO統計，大約80%的NPC發生在中國［2］。

大量研究已證明:EB病毒與鼻咽癌關系密切，EB病毒VCA-IgA抗體可出現于鼻咽癌確診前4～46個月，VCA-IgA抗體陽性鼻咽癌發生率是抗體陰性發生率的111.5倍，通過免疫酶法檢測人群血清EB病毒VCA-IgA高危人群，對鼻咽癌的早期診斷有重要意義，目前常規應用的EB病毒血清學檢查項目VCA-IgA和EA-IgA仍是鼻咽癌患者臨床篩查、輔助診斷以及判斷的療效的觀察指標［3］。對于就診的患者及時、準確地作出病原學診斷，就可以為臨床醫生提供診治依據，及時采取治療措施保證患者健康。

目前很多醫院采用進口的德國歐蒙公司生產的試劑來進行EA-IgA和VCA-IgA抗體檢測，但進口試劑價格較貴，我們用國內IBL公司生產的試劑和進口試劑比較，從實驗數據可知，德國歐蒙公司生產的EA-IgA和VCA-IgA試劑對NPC的診斷效率與國內IBL公司生產的EA-IgA和VCA-IgA試劑的差異無統計學意義。兩個廠家生產的試劑盒檢測的符合率比較，在分別驗證EA-IgA和VCA-IgA時，Kappa值分別為0.57和0.62，具有高度一致性。可以認為，國內IBL公司生產的EA-IgA和VCA-IgA試劑盒可以和進口的德國歐蒙公司生產的試劑盒相媲美，符合臨床要求，能較好的檢測EB病毒感染者血清中的IgA抗體，起到輔助臨床診斷鼻咽癌的作用。而且國產試劑的價格比進口試劑便宜，可以代替進口試劑進行臨床應用。

［1］劉勇，楊海玉，路名芝.EB病毒與腫瘤的關系.江西醫藥，2007，42(4):354-355.

［2］陳莉，朱遠源.腫瘤研究的新熱點-EB病毒.腫瘤防治研究，2008，35(10):750-754.

［3］唐國全，周向陽，陽茂春.EB病毒IgA滴度在鼻咽癌診斷的敏感性和特異性.廣西醫學，2008，30(6):831-832.