血脂康對db/db糖尿病小鼠坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度影響的研究1)

程茅薇,顧 萍,馬 健,杜 宏,盧 斌,邵加慶

糖尿病周圍神經(jīng)病變是糖尿病最常見、最嚴重的并發(fā)癥之一,其主要臨床表現(xiàn)為肢體麻木、疼痛和肌肉萎縮[1,2]。調(diào)脂藥他汀類或貝特類不僅能夠改善患者血脂情況,還能使患者發(fā)生神經(jīng)病變的風(fēng)險減少35%～48%[1]。本研究觀察血脂康對db/db糖尿病小鼠坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度的影響,探討對糖尿病周圍神經(jīng)病變的影響。

1 材料與方法

1.1 動物 60只12周齡清潔級雄性db/db小鼠(先天性糖尿病小鼠模型),體重35 g～45 g。隨機分為3組,每組 20只,分別給予8周血脂康低劑量0.3 g/(kg?d)、高劑量0.6 g/(kg?d)和安慰劑(5%阿拉伯膠)灌胃8周。20只同周齡同窩出生的db/m小鼠為非糖尿病對照組。

1.2 檢測指標

1.2.1 生理生化指標檢測 每周監(jiān)測體重和血糖,投藥前和8周后測定空腹膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、三酰甘油(TG)、空腹血糖(FBG)、空腹胰島素(FSI),血漿胰島素測定使用小鼠胰島素ELISA試劑盒。

1.2.2 腹腔葡萄糖耐量試驗(IPGTT)投藥8周后,每組隨機選取10只小鼠進入試驗。A UC-insulin評價胰島分泌功能。

1.2.3 坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度 采用丹麥KEYPOINT NET肌電圖儀測定。將清醒db/db糖尿病小鼠及db/m小鼠俯臥位固定,刺激針電極置于股骨大粗隆與坐骨結(jié)節(jié)之間坐骨神經(jīng)傳出部位,記錄針電極置于踝關(guān)節(jié)處坐骨神經(jīng)經(jīng)過部位,參考電極置于刺激電極與記錄電極之間,與記錄電極相距1 cm,三種電極均采用針電極。刺激用單脈沖方波,波寬0.1 ms,強度1.5倍閾值。每兩個刺激間隔6 s以上。嚴格控制室溫(20±0.5)℃,并保持動物體溫37℃。記錄刺激開始到肌肉出現(xiàn)誘發(fā)電位的時間(即潛伏時間),測定刺激電極到記錄電極之間的距離,計算運動神經(jīng)傳導(dǎo)速度(MNCV)。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 使用SPSS 11.0軟件分析。計量資料以均數(shù)±標準差(±s)表示,多組間均數(shù)比較采用單因素方差分析,兩兩比較采用LSD檢驗,實驗前后的資料比較用配對t檢驗。

2 結(jié) 果

2.1 生理生化指標結(jié)果 db/db糖尿病小鼠坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度較db/m正常對照組明顯降低,證實其存在周圍神經(jīng)損害。基線時,血脂康低劑量組、血脂康高劑量組和db/db安慰劑對照組的 TC、LDL-C、TG、FBG和FSI無明顯差異。治療 8周后血脂康低、高劑量組在 TC、LDL-C、TG、FBG和 FSI顯著低于db/db對照組(P＜0.05)。而血脂康兩組之間無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。詳見表 1。

表1 基線及終點時生理及代謝指標比較(±s)

表1 基線及終點時生理及代謝指標比較(±s)

組別 n 體重g FBG mmol/L FSI mIU/L TC mmol/L LDL-C mmol/L TG mmol/L db/m組 基線 20 26.8±0.31) 5.6±0.71) 2.5±0.31) 2.42±0.311) 1.63±0.231) 0.56±0.111)終點 20 32.7±0.51) 5.8±0.81) 2.7±0.41) 2.52±0.251) 1.71±0.281) 0.59±0.151)db/db對照組 基線 20 38.9±3.3 17.1±4.2 8.8±1.5 5.23±0.87 3.68±0.45 3.45±0.56終點 20 47.1±4.3 25.9±2.2 9.8±1.4 6.03±0.93 3.98±0.53 3.75±0.67血脂康低劑量組 基線 20 38.6±2.9 18.1±4.1 9.2±1.4 5.35±0.84 3.57±0.39 3.35±0.48終點 20 42.3±3.8 18.4±3.41) 7.7±0.81) 4.13±0.571) 2.32±0.341) 1.65±0.341)血脂康高劑量組 基線 20 39.2±2.6 17.8±4.2 9.4±1.2 5.29±0.74 3.57±0.39 3.27±0.48終點 20 43.2±3.5 18.2±3.61) 7.5±0.71) 3.93±0.461) 2.12±0.271) 1.53±0.381)與db/db對照組比較,1)P＜0.05

2.2 血脂康對db/db小鼠IPGT T的影響 糖負荷后120 min,血脂康低、高劑量組血糖降低(P＜0.05),葡萄糖曲線下面積及胰島素曲線下面積均低于db/db安慰劑對照組(P＜0.05)。詳見表2。

表2 血糖和胰島素曲線下面積結(jié)果(±s)

表2 血糖和胰島素曲線下面積結(jié)果(±s)

組別 葡萄糖曲線AUC-glucose胰島素曲線A UC-insulin db/m 組 829±471) 336±371)db/db對照組 2 990±126 1 335±85血脂康低劑量組 2 405±961) 1 099±681)血脂康高劑量組 2 325±861) 1 052±701)與db/db對照組比較,1)P＜0.05

2.3 血脂康對db/db小鼠坐骨神經(jīng)M NCV的影響 血脂康兩組治療8周,高劑量組改善程度優(yōu)于低劑量組,血脂康能提高坐骨神經(jīng)MNCV,其作用獨立于降糖、調(diào)脂。詳見表3。

表3 血脂康對db/db小鼠坐骨神經(jīng)M NCV的影響(±s)m/s

表3 血脂康對db/db小鼠坐骨神經(jīng)M NCV的影響(±s)m/s

組別 治療前 治療8周db/m 組 40.56±3.90 41.34±4.20 db/db對照組 31.51±3.45 25.21±2.381)血脂康低劑量組 29.98±2.49 32.20±3.451)2)血脂康高劑量組 30.80±2.33 35.90±2.631)2)3)與本組治療前比較,1)P＜0.05;與db/db對照組比較,2)P＜0.05;與血脂康低劑量組比較,3)P＜0.05

3 討 論

血脂康中富含多種成分,包括多種天然復(fù)合他汀、異黃酮及甾醇等,其有降脂、抗血栓、調(diào)節(jié)免疫功能、抗炎、抗氧化、抑制平滑肌增殖、舒張血管等作用。本研究發(fā)現(xiàn)血脂康不僅可以降低db/db小鼠血脂、血糖,同時能提高坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度,對糖尿病周圍神經(jīng)具有保護作用,且獨立于降糖、調(diào)脂效應(yīng)之外。

在糖尿病中高血糖主要通過多元醇、己糖胺、蛋白激酶C及終末糖基化產(chǎn)物等途徑,導(dǎo)致細胞內(nèi)線粒體氧化還原狀態(tài)失衡及產(chǎn)生過多的活性氧物質(zhì),最終引起周圍神經(jīng)病變。他汀類藥物不僅具有調(diào)脂作用,同時具有抗炎、減少氧化應(yīng)激、抗細胞凋亡、保護內(nèi)皮細胞及改善血流等作用[2,3]。澳大利亞的研究人員對500多名糖尿病患者進行8年隨訪,發(fā)現(xiàn)他汀類藥物能降低糖尿病神經(jīng)病變的危險達35%,其作用可能與他汀調(diào)脂外的多種作用相關(guān),但機制未完全明確[1]。

血脂康是由特制紅曲提煉而成,其除含有少量洛伐他汀外,還含有同系列的其他他汀(天然復(fù)合他汀)、脂肪酸、氨基酸及微量元素等,臨床不僅用于高脂血癥患者,對于合并糖尿病、糖尿病腎病、脂肪肝亦有一定療效[4-7]。

本研究發(fā)現(xiàn)db/db糖尿病小鼠坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度較正常對照組明顯降低,證實其存在周圍神經(jīng)損害。血脂康干預(yù)db/db小鼠8周后,不僅能降低血脂、血糖、改善葡萄糖耐量及胰島素敏感性,同時提高坐骨神經(jīng)的M NCV。不同劑量組雖然治療后血脂、血糖之間無明顯差異,但大劑量組坐骨神經(jīng)MNCV快于低劑量組,提示血脂康改善周圍神經(jīng)傳導(dǎo)速度的作用是獨立于調(diào)脂、降糖的,其機制可能與血脂康調(diào)脂外的多種作用相關(guān)。血脂康能通過改善血管內(nèi)皮細胞一氧化氮合酶(eNOS)的功能調(diào)節(jié)血流和神經(jīng)傳導(dǎo)[8],降低PAI-1活性和纖維蛋白原(FIB)水平而改善血流變[9],抑制炎癥因子的表達減少氧化應(yīng)激等[10,11],這些作用可能與血脂康改善糖尿病神經(jīng)病變的療效有關(guān),但其確切機制還有待進一步研究。

[1]Davis T M,Yeap BB,Davis W.A lipid-lowering therapy and peripheral sensory neuropathy in type 2 diabetes:T he Fremantle Diabetes Study[J].Diabetologia,2008,51(4):562-566.

[2]Kushner PR.Can intensive statin therapy halt the progression of atherosclerosis?Recent evidence and potential implications for patient management[J].Prog Cardiovasc Nurs,2007,22(4):207-213.

[3]Schalkwijk CG,van Dam B,Stehouwer CD.Mevastatin increases eNO synthase expression and inhibits lipid peroxidation in human endothelial cells[J].Clin Hemorheol Microcirc,2007,37(1-2):179-184.

[4]楊少勇,周建華.血脂康對老年糖尿病血糖的影響[J].當代醫(yī)學(xué),2009,15(3):35-36.

[5]王曦云,盛莉,劉艷萍,等.洛伐他汀治療冠心病高膽固醇血癥對血管內(nèi)皮功能微循環(huán)及胰島素敏感性的影響[J].中國實用內(nèi)科雜志,2003,23(11):660-662.

[6]陳黎,涂燕云,陳枝俏.血脂康膠囊治療合并高脂血癥的非酒精性脂肪性肝病[J].中成藥,2007,29(3):326-329.

[7]王鋒,吳紅梅.血脂康治療糖尿病腎病的系統(tǒng)評價[J].中國循證醫(yī)學(xué)雜志,2009,9(1):63-70.

[8]魏煒,李仁立,涂玲,等.血漿高甘油三酯對老年人血管內(nèi)皮功能的損害及血脂康的修復(fù)作用[J].臨床心血管病雜志,2002,18(7):336-337.

[9]劉志高,辛奠霞,劉浩,等.血脂康對高血壓病患者高脂餐后凝血纖溶功能的影響[J].中國中西醫(yī)結(jié)合雜志,2010,30(2):212-214.

[10]劉尊齊,崔連群,王勇,等.大劑量血脂康在經(jīng)皮冠狀動脈介入術(shù)中的炎癥抑制作用[J].中國病理生理雜志,2007,23(9):1703-1705.

[11]姚巍,張秀蘭,王風(fēng)芝.血脂康對急性冠狀動脈綜合癥的P-選擇素、可溶性細胞間黏附因子-1、基質(zhì)金屬蛋白酶-9的影響[J].中華心血管病雜志,2006,34(11):1004.