系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者T淋巴細(xì)胞亞群及Th1、Th2類細(xì)胞因子變化的臨床意義

張玉玲，朱 蕓，李 明

(濰坊市人民醫(yī)院，山東濰坊261041)

系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)存在多種免疫調(diào)節(jié)功能的異常，包括B細(xì)胞功能亢進(jìn)、自身反應(yīng)性T細(xì)胞大量增生、自身抗體產(chǎn)生、免疫復(fù)合物清除障礙和細(xì)胞因子表達(dá)異常等［1］。其中輔助性T細(xì)胞及其細(xì)胞因子在自身免疫病發(fā)病機(jī)制中有非常重要的作用。為此，本研究對 SLE患者外周血中 CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞比例及Th1型細(xì)胞因子IFN-γ和Th2型細(xì)胞因子IL-10變化進(jìn)行了探討。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2009年1月～2011年6月本院收治首次就診或未經(jīng)治療的復(fù)發(fā)SLE患者10例(SLE組)，男2例、女8例，平均年齡32歲。均符合1997年美國風(fēng)濕病學(xué)會(huì)(ARA)修訂的SLE診斷標(biāo)準(zhǔn)［2］，SLEDAI評分≥5分。另取10例健康體檢人員為對照組，男2例、女8例，平均年齡33歲;其性別、年齡與SLE組具有可比性。

1.2 方法 ①流式細(xì)胞術(shù)檢測外周血T淋巴細(xì)胞亞群:抽取靜脈血2 ml，分離PBMC，調(diào)整細(xì)胞濃度為1×107懸液，取100 μl細(xì)胞懸液，加入FITC標(biāo)記的CD3單克隆抗體，PE-CY5標(biāo)記的CD4單克隆抗體，R-PE標(biāo)記的CD8單克隆抗體(均按試劑說明書操作)。流式細(xì)胞儀檢測CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞及CD4+/CD8+變化。②血清 IFN-γ，IL-10測定:抽取靜脈血2 ml，分離血清，置于Eppendorf管，深低溫冰箱保存待檢。采用ELISA法檢測血清IFN-γ及IL-10，具體步驟按照試劑盒說明書操作。試劑盒購自晶美生物工程有限公司。所用酶標(biāo)儀為美國Bio-Rad公司M450型ELISA Reader酶標(biāo)儀。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件，數(shù)據(jù)以±s表示，組間比較采用t檢驗(yàn)。P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組外周血 CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞及CD4+/CD8+T淋巴細(xì)胞變化 見表1。

表1 兩組外周血CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞和CD4+/CD8+比較(±s)

表1 兩組外周血CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞和CD4+/CD8+比較(±s)

注:與對照組比較，aP ＜0.01

組別 n CD4+(%) CD8+(%) CD4+/CD8+10 52.89±7.65 34.16±5.83 1.59±0.52 SLE 組 10 43.14±6.08a 49.39±8.15a 0.86±0.13對照組a

2.2 兩組血清IFN-γ、IL-10和IFN-γ/IL-10變化見表2。

表2 兩組外周血IFN-γ、IL-10和IFN-γ/IL-10變化(± s)

表2 兩組外周血IFN-γ、IL-10和IFN-γ/IL-10變化(± s)

注:與對照組比較，aP ＜0.01

/IL-10對照組組別 n IFN-γ(pg/ml)IL-10(pg/ml) IFN-γ 10 13.87±4.08 18.27± 5.98 0.75±0.20 SLE 組 10 19.74±5.16a57.32±11.96a 0.36±0.09a

3 討論

SLE是一種免疫調(diào)節(jié)紊亂的自身免疫性疾病，其特征是產(chǎn)生大量的自身抗體和多系統(tǒng)受累，患者體內(nèi)T、B細(xì)胞異常活化，并與細(xì)胞因子的改變有關(guān)［3］。機(jī)體正常免疫應(yīng)答過程有賴于各種免疫細(xì)胞，特別是各細(xì)胞亞群之間的相互協(xié)作和相互制約，其中T淋巴細(xì)胞是執(zhí)行細(xì)胞免疫功能的主要細(xì)胞亞群，T淋巴細(xì)胞分成兩個(gè)不同的亞群:CD4+T淋巴細(xì)胞(輔助性T淋巴細(xì)胞)和CD8+T淋巴細(xì)胞(抑制性T細(xì)胞和細(xì)胞毒性T細(xì)胞)，CD4+/CD8+比值能夠反映機(jī)體的免疫狀態(tài)，特別是細(xì)胞免疫狀態(tài)。目前，該比值已成為檢測人體細(xì)胞免疫功能、反映機(jī)體免疫狀態(tài)的指標(biāo)［4，5］。本研究結(jié)果表明，SLE患者CD4+/CD8+比值明顯低于正常組，其比值降低是由于CD4+比例降低及CD8+比例增高所致。因此，筆者認(rèn)為外周血CD4+、CD8+比例及CD4+/CD8+比值在SLE的診治中有一定作用。

SLE發(fā)病與細(xì)胞因子分泌水平失衡密切相關(guān)，其中Th1、Th2類細(xì)胞因子起重要作用。Th1類細(xì)胞因子主要包括IFN-γ、IL-12和TNF等細(xì)胞因子，Th2類細(xì)胞因子主要包括IL-4、IL-5、IL-10等細(xì)胞因子。然而，目前人們對SLE患者外周血Th1類及Th2類細(xì)胞因子研究結(jié)果并不一致［6］。本研究結(jié)果顯示，SLE患者外周血Th1類細(xì)胞因子IFN-γ和Th2類細(xì)胞因子IL-10水平均高于正常對照組，SLE組IFN-γ/IL-10比值明顯低于正常對照組。說明Th1/Th2型細(xì)胞因子發(fā)生Th2方向漂移，Th類細(xì)胞因子對SLE發(fā)病起重要作用，測定外周血Th1和Th2類細(xì)胞因子水平對了解SLE患者的病情嚴(yán)重程度有一定意義。

綜上所述，SLE患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群數(shù)量分布及Th1、Th2類細(xì)胞因子存在異常。檢測SLE患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群及IFN-γ、IL-10水平，對全面了解機(jī)體的免疫狀態(tài)有重要意義，針對其進(jìn)行有效干預(yù)，可能有助于SLE病情的緩解。

［1］錢學(xué)賢，戴玉華，孔華宇.現(xiàn)代心血管病學(xué)［M］.北京:人民軍醫(yī)出版社，1995:618-620.

［2］Hochberg MC.Updating the american college of rheumatology revised criteria for the classification of systemic lupus erythematosus［J］.Arthritis Rheum，1997，40(9):1725.

［3］張琳，張偉.系統(tǒng)性紅斑狼瘡相關(guān)的生物標(biāo)志物［J］.中國免疫學(xué)雜志，2007，23(9):860-863.

［4］張福江.系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者外周血中淋巴細(xì)胞亞群變化［J］.臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2010，9(14):1097.

［5］許坤，張利，張靜然.大面積燒傷患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群的研究［J］.實(shí)用醫(yī)技雜志，2008，15(21):2745-2746.

［6］潘文萍，杜鵑，劉文波.糖皮質(zhì)激素對系統(tǒng)性紅斑狼瘡Th1和Th2類細(xì)胞因子的影響［J］.臨床皮膚科雜志，2009，38(10):628-630.