人工牛黃甲硝唑膠囊中甲硝唑溶出度的測定

韋廣輝

人工牛黃甲硝唑膠囊為復方制劑，主要成分為甲硝唑與人工牛黃。甲硝唑對大多數厭氧菌具有抗菌作用，主要用于治療急性智齒冠周炎、局部牙槽膿腫、牙周炎、根尖周炎等。國家藥品標準[1]中未收載其溶出度檢查項。為了有效控制藥品質量，為評價和控制藥品質量提供依據，筆者參考文獻[2]采用紫外分光光度法，測定3個生產廠家樣品的體外溶出度，現報道如下。

1 儀器與試藥

UV－2550型紫外分光光度計(日本島津公司);D－800LS型智能藥物溶出儀(天津大學精密儀器廠);AE－240型電子天平(梅特勒－托利多儀器〈上海〉有限公司)。人工牛黃甲硝唑膠囊(市售品，A廠產品批號為1010008，B廠產品批號為101201，C廠產品批號為20091203);甲硝唑對照品(批號為0191－9804，中國藥品生物制品檢定所);鹽酸為分析純，水為純化水。

2 方法與結果

2.1 溶液制備

取人工牛黃甲硝唑膠囊各1粒，用(37±0.5)℃的鹽酸溶液(9→1 000)溶解后，稀釋至900 mL，搖勻，經0.45μm濾膜濾過，再精密取濾液3 mL，置50 mL容量瓶中，稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。稱取甲硝唑對照品10 mg，精密稱定，置50 mL容量瓶中，用(37±0.5)℃的鹽酸溶液(9→1 000)溶解后，稀釋至刻度，搖勻，即得對照品貯備液;再精密取3 mL，置50 mL容量瓶中，稀釋至刻度，搖勻，即得對照品溶液。取空白膠囊1粒，加入按處方比例稱取的1粒膠囊量的人工牛黃和輔料，按供試品溶液的制備方法配制成陰性對照品溶液。

2.2 測定波長確定

以鹽酸溶液(9→1 000)為空白對照，在200～400 nm波長范圍內對照品、供試品和陰性對照品溶液進行掃描。結果見圖1。可見，供試品和對照品溶液紫外吸收圖譜峰谷特征基本一致，最大吸收波長為277 nm，而陰性對照品溶液在此波長處無紫外吸收，故選擇277 nm為測定波長。

2.3 方法學考察

圖1 紫外分光光譜圖

標準曲線制備:精密吸取對照品貯備液 1，2，3，4，5 mL，分別置50 mL容量瓶中，加鹽酸溶液(9→1 000)稀釋至刻度，搖勻，照紫外分光光度法在277 nm波長處測定吸光度，以質量濃度為橫坐標、吸光度為縱坐標繪制標準曲線，得回歸方程 Y=0.037 8X－0.002 8，r=0.9998(n=5)。結果表明甲硝唑質量濃度在 4.22 ～20.10μg/mL范圍內與吸光度線性關系良好。

精密度試驗:取同一批對照品，依法制備對照品溶液并測定吸光度。結果的 RSD為0.3%(n=6)，表明儀器精密度良好。

穩定性試驗:取由35 min溶出液制備的供試品溶液，分別于0，1，2，4，8 h 時測定吸光度。結果的 RSD 為 0.56%(n=5)，表明供試品溶液在8 h內穩定。

加樣回收試驗:精密移取已知質量濃度的溶出液2，3，4 mL各2份，置100 mL量瓶中，分別加入對照品貯備液2，3，4 mL，加溶出介質至刻度，搖勻，測定吸光度，計算回收率。結果見表1。

2.4 溶出度測定

采用槳法，按2010年版《中國藥典(二部)》附錄溶出度測定法[2]項下操作。量取經脫氣處理的鹽酸溶液(9→1 000)900 mL，注入溶出杯中，恒溫至(37±0.5)℃，轉速為50 r/min，取人工牛黃甲硝唑膠囊1粒，裝入沉降籃，投入溶出杯中，啟動旋轉并開始計時，分別在第 5，10，15，25，35，50 min 時間點取溶液 10 mL，每次取樣后，立即補充同體積同溫度的溶出介質，所取溶出液經0.45μm濾膜濾過，精密量取濾液3 mL，置50 mL量瓶中，稀釋至刻度，測定吸光度，并計算各時間點的累積溶出百分率。結果見表2。

表1 甲硝唑加樣回收試驗結果(n=6)

表2 各時間點樣品累積溶出百分率(%，n=6)

2.5 溶出曲線繪制

將表2中的數據以時間為橫坐標、累積溶出百分率為縱坐標，繪制成溶出曲線。結果見圖2。

3 討論

選擇溶出方式時，曾對比轉籃法和槳法，轉籃法有時會出現轉籃被膠囊碎片堵塞的現象，影響藥物溶出，因此選擇槳法。但因溶出過程中膠囊會浮在水面，影響溶出，故需使用沉降籃。轉速通常選用50～75 r/min，一般不超過100 r/min，但考慮到對胃動力減弱的患者也能有較好的治療效果，故選用50 r/min。人工牛黃甲硝唑膠囊是一種胃溶型制劑，故選擇鹽酸溶液(9→1 000)作為溶出介質，這也與含量測定項的溶劑保持一致。對于溶出溫度，選擇接近人體正常溫度的(37±0.5)℃作為測定溫度較適宜。

圖2 樣品溶出曲線

試驗結果表明，采用紫外分光光度法測定人工牛黃甲硝唑膠囊中甲硝唑的溶出度，方法簡便、快速、準確，可用于產品的質量評價與控制。

[1]WS－1001(HD－0204)－2002，國家食品藥品監督管理局國家藥品標準·化學藥品地方標準上升國家標準(第三冊)[S].

[2]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(二部)[M].北京:中國醫藥科技出版社，2010:153－154，附錄85－附錄87.