健脾補腎方對卵巢早衰患者內分泌及免疫功能的影響

李秀華

(三峽大學仁和醫院，湖北 宜昌 443001)

卵巢早衰(POF)是指婦女在40歲以前的絕經，伴血清促性腺激素水平升高和雌激素(E2)水平下降，臨床上伴有潮熱多汗、情緒不穩、性欲低下等一系列絕經期表現，發生率約有1%～3%，嚴重影響著婦女的生活質量。本研究通過檢測性激素及外周血T淋巴細胞亞群分布，了解POF患者內分泌的改變及免疫細胞亞群分布狀態，探討健脾補腎方對POF婦女內分泌及免疫系統的作用。

1 材料與方法

1.1 檢測對象 選自2009年1月至2010年1月在我院婦科內分泌門診就診的 POF患者 30例，年齡 23～39〔平均(33.33±5.37)〕歲，符合POF診斷標準:40歲前卵巢功能衰竭，伴或不伴絕經期癥狀，所有病例繼發閉經半年以上;無高催乳素血癥，卵泡刺激素(FSH)＞40 IU/L或促黃體生成激素(LH)＞30 IU/L，雌激素(E2)＜25 pg/ml，即認為無卵泡發育，卵巢功能衰竭。另選擇正常生育期婦女30例對照，兩組婦女婦科檢查子宮附件完整，排除其他器質性病變，檢測前3個月無服藥史。

1.2 儀器與試劑 流式細胞儀(FCM)由美國Beckman Coulter公司提供，型號為EPICS;磁性酶儀由瑞士Serono公司提供;熒光標記單克隆抗體試劑均來自于法國Immunotech公司。

1.3 試驗方法 試驗前，所有觀察對象均禁食12 h以上，2 w內不吸煙、不飲酒，以上午8～10時抽取靜脈血6 ml，2 h內分離血清，－20℃冰存，集中檢測。①FCM檢測并分析CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+等相關免疫細胞學指標;②雌性勻相酶免法(HEI)檢測60例婦女的血清中6項性激素:FSH、LH、E2、睪酮(T)、孕酮(P)、催乳激素(PRL)的水平;③試驗組30例進行健脾補腎方治療，健脾補腎方由:黨參15 g，白術15 g，枸杞 15 g，白芍 15 g，山藥 15 g，茯苓 10 g，陳皮 10 g，巴戟天10 g，菟絲子 10 g，柴胡 10 g，當歸 10 g，熟地 10 g，紫河車 10 g，甘草10 g，此方以參苓白術散加減，主要從健脾補腎著手，用水煎服，1劑/d，共6個月。6個月后對患者再次采血進行上述指標檢測。

1.4 統計學方法 應用SPSS11.5統計軟件，數據用x±s表示，統計處理用方差分析(ANOVA)和t檢驗。

2 結果

2.1 兩組性激素水平比較 POF患者，FSH、LH增加，E2、P下降(均P＜0.01)，PRL、T仍保持有一定的有效濃度。POF患者經過6個月的中藥治療，FSH、LH明顯下降，E2、P明顯增加，PRL、T無明顯改變。見表1。POF患者經過6個月的中藥治療，FSH、LH 明顯下降，E2、P 明顯增加，PRL、T 無明顯改變。

2.2 外周血T淋巴細胞亞群的比較 POF患者存在免疫異常，不僅與淋巴細胞的相對數目有關，還與其比例失衡有關。CD4+明顯下降，CD8+明顯增加，CD4+/CD8+下降。POF患者經過6個月的中藥治療，CD4+、CD4+/CD8+明顯增加，免疫功能增強，以體液免疫增強為主。見表2。POF患者經過6個月的中藥治療，CD4+、CD4+/CD8+明顯增加，免疫功能增強，以體液免疫增強為主。

表1 治療前兩組性激素水平比較(x ± s，n=30)

表2 治療前兩組外周血T淋巴細胞亞群的比較(x±s)

3 討論

3.1 POF與免疫 POF，定義為40歲前由于卵巢內卵泡耗竭或醫源性損傷導致卵巢功能衰竭。病因可因遺傳因素、自身免疫性疾病、醫源性損傷或特發性原因引起。以低E2及高促性腺激素水平為特征，表現為繼發性閉經，常伴有圍絕經期癥狀〔1〕，診斷以至少半年或以上閉經多次發生、排除其他原因為基礎。

機體維持正常的免疫功能狀態，有賴于各種免疫細胞，特別是各類T細胞亞群之間的相互協作或相互制約，以產生適度的免疫應答，使之既能清除異物抗原，又不致損傷機體自身組織。研究表明〔2〕免疫系統直接或間接地參與卵泡的發育與閉鎖過程，影響卵巢的功能。T淋巴細胞占外周血淋巴細胞總數的60%左右，當感染、藥物、理化等因素的作用打破抑制性T淋巴細胞(CD8+)與輔助性T淋巴細胞(CD4+)的生理平衡，則將導致自身免疫病。Chernyshov等〔3〕測定早期(閉經時間＜2年，沒有典型閉經癥狀)POF患者外周血淋巴細胞，發現CD3+、CD9+、CD3+/CD8+淋巴細胞水平都下降，說明POF患者T細胞群可能會發生改變。POF患者外周血CD8+T細胞明顯升高，CD4+/CD8+T細胞的比值下降，與血清E2水平相關，用健脾補腎方治療后，外周血CD8+T細胞下降，CD4+/CD8+T細胞比值部分恢復。POF患者與正常婦女CD4+細胞亞群百分比比較，明顯低下，同時CD8+細胞亞群明顯增高。說明POF閉經的原因，并不單純由年齡增長引起，可能有細胞免疫的變化，發生自身免疫性卵巢炎。而CD8+淋巴細胞亞群的升高，可能是卵巢功能衰退閉經時自身免疫性卵巢炎在外周血的反映。

3.2 組方分析 POF在中醫學上屬于月經過少，閉經，不孕等范疇。由于精神緊張，加上先天不足或后天調理失常，致肝腎不足、沖任為病，提前出現任脈虛，太沖脈衰少，天癸竭的病理現象，故形壞而無子〔4〕。POF的病機，主要為脾腎虧虛，故健脾、補腎并用是本癥治療大法，故自擬健脾補腎方。本方由參苓白術散加減而成，首先通過調理脾胃的功能，使脾胃之氣健旺，水谷精微得以運化，資生氣血，使正氣得運，陰血得復。輔以巴戟天、菟絲子、紫河車等溫養肝腎，調補沖任，收到補陰益精之功;另外女人平素多由情志所傷，七情郁結，肝失條達，生化之源不足，肝體失養，皆可使肝氣橫逆，因此加入柴胡疏肝解郁，白芍養血柔肝。中醫認為腎為先天之本，脾為后天之本。全方既溫養先天腎氣以生精，又培補后天脾胃以生血，并佐以調和血脈之品，使精充血足，沖任得養，疾病得愈。

3.3 療效與實驗研究分析 在臨床應用中，健脾補腎方在臨床上有明顯的療效，患者潮熱、煩躁等圍絕經癥狀得到緩解或消失，月經恢復來潮。結合實驗研究，分析其作用機制為:①免疫調節作用:本研究表明健脾補腎方可增強POF患者的免疫功能，促進機體清除“異物”，修復損傷的子宮內膜，通過益氣，更好的改善氣虛狀態，健運中焦，生化氣血，使五臟六腑得養，則機體各種病理狀態得以調節、恢復，自身調節能力提高。②改善血液循環，調節凝血與纖溶系統的平衡:POF患者整體存在血瘀〔5〕，健脾補腎方可通過養血活血的而修復卵巢血管內皮損傷，加強血液流變性，促進凝血消散，增加卵巢血供，使卵巢的功能恢復。③對女性內分泌功能的整體調節作用:在治療過程中，女性激素都發生了改變，不僅E2增加，而且FSH、LH也發生了變化，下丘腦-垂體-卵巢軸的整體調節功能發生了改變，使患者已早衰的卵巢恢復或部分恢復其排卵及內分泌功能。

1 樂 杰.婦產科學〔M〕.第7版.北京:人民衛生出版社，2008:310.

2 高 慧，楊 涓，夏 天，等.補腎調沖方對卵巢早衰大鼠卵巢相關細胞因子TNF-α、IFN-γ蛋白和基因表達的影響〔J〕.國醫論壇，2008;23(3):32-40.

3 Chernyshov VP，Radysh TV，Gura IV，et al.Immune disorders in women with premature ovarian failure in initial period〔J〕.Am J Reprod Immunol，2001;46(3):220-5.

4 杜嫦燕，柴洪佳，鄒志潔.補腎養肝湯治療卵巢早衰40例臨床觀察〔J〕.新中醫，2009;41(10):49-50.

5 董 莉，姜 琳，林曉倩，等.補腎活血方對早衰患者血清FSH、LH、E2及PRL的影響〔J〕.上海中醫藥雜志，2007;41(11):48-9.