阿托伐他汀對血脂正常自發性高血壓大鼠血壓、血脂和炎癥因子的影響△

陜西省人民醫院 (西安 710068)程 功 呂曉莉 任健康 閆福堂 李 博 龐雅玲 楊軍錄

他汀類藥物廣泛用于高血壓合并血脂代謝異常病人的治療,對無血脂代謝異常高血壓患者應用目前沒有充分依據[1]。盎格魯-斯堪地那維亞心臟結局試驗發現他汀類藥物對高血壓合并多危險因素的患者能有效地減少心血管事件。新近實驗研究及臨床觀察發現他汀類藥物還具備降壓作用[2]。基于以上發現,本研究觀察阿托伐他汀對無血脂代謝異常自發性高血壓大鼠(SHR)血壓、血脂、NO、NOS及一系列炎癥因子的影響,進一步探討無血脂代謝異常高血壓患者應用他汀類藥物血管保護依據。

材料與方法

1 材 料

1.1 實驗動物:8周齡雄性 SHR,購自北京維通利華實驗動物中心,WKY購自上海實驗動物中心。

1.2 主要試劑和儀器:阿托伐他汀由輝瑞制藥有限公司惠贈,hs-CRP購自武漢華美生物工程有限公司,IL-6和 TNF-α購自上海森雄科技實業有限公司,NO、NOS購自南京建成生物工程研究所,Med HX-Ⅱ型血壓測量計(西安交大醫學院)測量血壓。

2 方 法

2.1 動物分組及處理:大鼠購得后適應性喂養 1周,乙醚麻醉后眶后靜脈叢采血,標本靜置后離心,取上清液,測血脂。剔除血脂超出 95%可信區間以外的大鼠(范圍見表 1基礎值),入選 SHR 16只和 WKY 8只,SHR隨機分為兩組:阿托伐他汀組(ATO)和 SHR對照組(SHR)。 ATO組 [20 mg/(kg? d)]灌胃給藥,SHR及 WKY組用等容積生理鹽水,1次 /d,給藥 8周。

2.2 血壓測量:尾袖法測量大鼠收縮壓(SBP),連續 3次,間隔 60s,取平均值。

2.3 血樣及主動脈采集:大鼠給藥 8周后,10%水合氯醛腹腔注射麻醉,腹主動脈取血 6 ml,離心,分離血清,同時分離保存主動脈。

2.4 血脂的測定:實驗前后均測定 TC、TG、LDL-C,7170全自動生化分析儀測定。

2.5 NO、NOS及炎癥因子的測定:以雙抗夾心ELISA法檢測 hs-CRP、 IL-6、TNF-α,采用硝酸還原酶法測定血清 NO濃度,化學比色法檢測主動脈 NOS活性,按試劑盒說明書操作。

結 果

1 血壓:用藥前 SHR和 ATO組收縮壓水平均高于 WKY組(P＜0.05),而 SHR兩組 SBP無差別(P＞0.05),實驗期間,SHR組大鼠的 SBP水平逐漸升高,8周時,其 SBP顯著高于實驗前血壓(P＜0.05),與其他各組間有顯著差別(P＜0.05);而 ATO組SBP呈下降趨勢,4周后與 SHR組大鼠有統計學差別(P ＜0.05),高于 WKY組 (P ＜0.05),見表 1。

2 血脂:WKY及 SHR組血清 TC、TG、LDL-C喂養 8周后無明顯變化,兩組間三項指標亦無顯著性差異,阿托伐他汀干預后 TC、TG、LDL-C與用藥前、SHR組和 WKY組比較均顯著性差異(P＜0.01),見表2。

表1 阿托伐他汀干預前及干預過程 SBP(mmHg)比較

表2 各組大鼠的血脂水平(mmol/L,n=8)

3 NO、NOS及炎癥因子:SHR組血清 NO濃度和主動脈 NOS活性低于 WKY組(P＜0.05,P＜0.01),應用阿托伐他汀 8周后血清 NO濃度和主動脈NOS活性升高(P＜0.01,P＜0.05);SHR組血清 IL-6、 TNF-α、hs-CRP濃度高于 WKY組 (P ＜ 0.05),應用阿托伐他汀 8周后血清 IL-6、TNF-α、hs-CRP濃度明顯下降(P＜0.05),見表 3。

表3 各組大鼠 NO、NOS及炎癥因子水平(n=8)

討 論

PROVE-IT、TNT等研究結果顯示對極高危人群,將 LDL-C降至更低的水平是一種合理的臨床選擇[1]。空軍 /德州冠狀動脈粥樣硬化預防研究發現:對于血漿 LDL-C和 T G水平正常或輕度升高的無冠心病患者,洛伐他汀通過降低血漿 LDL-C可降低急性冠狀動脈事件發生的危險性。本研究發現阿托伐他汀明確降低無血脂代謝異常 SHR TG、TC、LDL-C水平,T G接近 WKY實驗前水平,TC、LDL-C甚至低于WKY實驗前水平,這可能降低血脂對高血壓動脈的損傷,但尚需更多實驗觀察。

最近研究發現他汀類調脂藥有降壓作用,并對降壓機理進行了初步探討[2],本研究發現應用阿托伐他汀后 SHR收縮壓下降,進一步為他汀類藥物降壓提供佐證。同時還發現 SHR主動脈 NOS含量下降,血漿 NO減少,NO為舒血管物質,同時有保護內皮功能作用,其減少引起血壓升高,內皮功能紊亂,阿托伐他汀逆轉了這種改變,目前研究考慮阿托伐他汀抑制甲羥戊酸合成與釋放,上調 NOS表達,促使 NO合成增加。

以往研究發現,高血壓病患者的血漿 CRP濃度比正常血壓者明顯升高[3]。新近研究證實高血壓不但與 CRP相關,也與 TNF-α及 IL-6相關[4]。這在合并血脂代謝紊亂時更為明顯,本研究發現無血脂代謝異常 SHR血清hsCRP、TNF、IL-6含量較 WKY大鼠高,阿托伐他汀可以降低無血脂代謝異常 SHR血清 hsCRP、TNF、IL-6含量,抑制體內炎癥反應。

高血壓血管重塑的機制包括生長、凋亡和纖維化,與血壓、血脂、炎癥等因素有關[5]。我們通過建立無血脂代謝異常 SHR模型,觀察到阿托伐他汀具有降低血壓,調節血脂,改善內皮功能及抗炎作用,推測這些作用參與改善高血壓血管重塑,預防及延緩無血脂代謝異常高血壓的動脈硬化。

[1]中國成人血脂異常防治指南 [J].中華心血管病雜志,2007,35(5):390.

[2]Borghi C,Prandin MG,Costa FV,et al.Use of statins and blood pressure controlin treated hypertensive patients with hypercholesterolemia[J]. J Cardiovasc Pharmacol,2000,35:549-5551.

[3]Festa A,D’Agostino R Jr,Howard G,et al.Chronic subclinical inflammation as part of the insulin resistance syndrome: the Insulin resistance atherosclerosis study(IRAS)[J].Circulation,2000,102:42-7.

[4]Bautista LE,Vera LM,Arenas IA,et al.Independent association between inflammatory markers(C-reactive protein,interleukin-6, and TN F-α)and essential hypertension[J].J Hum Hypertens,2005,19:149-54.

[5]Virdis A,Schiffrin EL.Vascular inflammation:a role in vascular disease in hypertension[J].Curr Opin Nephrol Hyperten,2003,12:181-7.