苦參黃芪湯抗大鼠肝纖維化作用機制的研究

李 榮 李 蓉 西安市第五醫(yī)院內(nèi)三科 (西安 710082)

苦參黃芪湯具有活血化瘀,兼以扶正、益氣、清熱解毒、利濕退黃等作用,在臨床應(yīng)用多年,能有效治療肝炎及肝硬化早期患者,但機理不明。本實驗為探討此中藥方劑抗大鼠肝纖維化作用的機制,做了以下研究。

1 材料和方法 1.1 藥物和主要試劑 苦參黃芪湯由黃芪 30g,雞血藤 15g,黃芩、苦參各 10g組成,由西安中藥廠制成粉劑。其中每克粉劑含生藥 2g。兔抗鼠 TGF-β1多克隆抗體、PDGF-BB及 CTGF多克隆抗體購自武漢博士德生物公司。免疫組化 ElivisionTM Plus廣譜試制盒購自福建邁新公司。

1.2 實驗分組與處理 清潔劑雄性 Wistar大鼠 60只,購自第四軍醫(yī)大學(xué)動物實驗中心,平均為 180 g。隨機分為 4組:正常對照組(15只),除正常飲食、飲水外,每日給予 0.9%氯化鈉灌胃,皮下注射花生油,量同模型組;模型組(15只),按《中藥藥物實驗方法學(xué)》用復(fù)合因素造模[1],實驗第 1天皮下注射40%CCl4花生油溶液 0.5mL/100g體重,以后每隔 3d,皮下注射 40%CCl4花生油溶液 0.3mL/100g體重,以 79.5%單純面粉、20%豬油及 0.5%膽固醇配成混合飼料,自來水為唯一飲料飼養(yǎng)動物。10周后處死大鼠,分別取心臟血及收集肝臟標(biāo)本;中藥組(30只),造模方法同上,造模的同時給予中藥灌胃。中藥組分為大、小劑量組,每組 15只,大劑量組:每日給中藥粉劑量 2 g/100 g體重;小劑量組:每日給予中藥 0.5 g/100 g。以上2組,每日用藥 1次,共 10周。 10周后處理同上。

1.3 檢測方法 取大鼠心臟血由同位素科專人用放射免疫法測定大鼠血清中肝纖維化指標(biāo) PCⅢ、CIV、HA、LN的含量。各組大鼠肝組織標(biāo)本行 M ASSON三色染色,光鏡下觀察。由同一病理醫(yī)生予以纖維化分級并行定量分析。……