反復呼吸道感染患兒血清維生素A水平變化及意義

(三峽大學仁和醫院兒科研究所，湖北宜昌 443000)

維生素A(VitA)對機體生長發育、組織細胞增殖與分化均具有廣泛調控作用，其缺乏將導致免疫器官萎縮，體液免疫及細胞免疫功能下降，增加患病和死亡的危險［1，2］。1995年“全國提高兒童生命質量會議”推薦將VitA水平≤1.05 μmol/L診斷為亞臨床狀態VitA缺乏(SVAD)。有研究顯示，反復感染兒童中 37.9%存在 SVAD，健康兒童僅占10.6%［3］。2007年1月 ～2010年6月，我們檢測了65例反復呼吸道感染患兒VitA水平，并對患兒補充VitA治療，觀察VitA與免疫指標變化并進行了相關性分析，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 65例反復呼吸道感染患兒(感染組)，男36例，女29例;年齡6個月～1歲27例，1～2歲24例，2～3歲14例。均符合2006年《兒科手冊》(5版)中的診斷標準［4］，其中反復發作支氣管肺炎30例，間質性肺炎12例，喘憋性支氣管炎7例，喉、氣管、支氣管炎11例，化膿性扁桃體炎5例。SVAD患兒42例，男22例，女20例;年齡6個月～1歲24例，1～2歲18例，反復支氣管肺炎26例，喘憋性支氣管炎6例，間質性肺炎10例。另收集同期體檢的無急、慢性疾病的健康兒童20例為對照組，年齡6個月～1歲8例，1～2歲7例，2～3歲5例。兩組均排除患有貧血、結核及原發或繼發性免疫缺陷病等，且4周內未用過VitA制劑、丙種球蛋白、激素等，其一般資料具有可比性。

1.2 治療方法及相關指標檢測 感染組予常規抗感染治療，對其中21例SVAD患兒加用VitA 2.5萬U/d，2 d后減量為4 000 U/d口服，連用2周;4周后抽取兩組清晨空腹靜脈血4 ml，檢測以下指標:①血清VitA水平。取不抗凝血1 ml，以2 000 r/min離心10 min，取上清液，采用微量熒光法用熒光分光光度計在激發光波長330 nm，發射光波長480 nm下測其光強度建立標準曲線，計算VitA水平。②免疫指標。a.免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)及補體 C3水平。取1 ml血樣于37℃水浮法孵育30 min，室溫3 000 r/min離心10 min，采用Hitachi 7600型全自動生化分析儀檢測免疫球蛋白以及補體C3水平，質量控制參考物質(Lot:200205)由衛生部上海生物制品研究所提供。b.淋巴細胞免疫表型。取2 ml血樣注入含有EDTA-K2抗凝劑帶蓋試管中，充分混勻，將待檢血樣用淋巴細胞分離液制備成淋巴細胞懸液，采用美國DKD公司生產的CD3、CD4、CD8單抗試劑標記淋巴細胞，由專人應用美國Beckman Coulter公司生產的流式細胞儀進行定量分析;檢測淋巴細胞免疫表型。③治療效果。比較臨床癥狀體征(退熱、咳嗽及肺部X線吸收)減輕時間。④相關性分析。對各項免疫指標與VitA水平行Pearson相關性分析。

1.3 統計學方法 采用SPSS10.0統計軟件，計量資料用±s表示，兩樣本均數比較采用t檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

感染組和對照組血清VitA水平及免疫指標檢測結果見表1;感染組42例SVAD患兒治療后血清VitA水平及免疫指標水平見表2，加用VitA與不加用者退熱、咳嗽及肺部X線吸收時間分別為4、5.5、6.5 d 和 6.25、10.80、10.5 d，χ2=6.40，P ＜0.05;相關分析結果示血清 VitA與 IgA 、呈顯著正相關(相關系數分別為0.482、0.306、0.395、0.445，P ＜0.05或 0.01)，與 CD+3CD+8呈顯著負相關(相關系數為 －0.304，P ＜0.05)，與IgG、IgM和C3無明顯相關性。

表1 感染組與對照組血清VitA水平及各項免疫指標比較( ±s)

表1 感染組與對照組血清VitA水平及各項免疫指標比較( ±s)

檢測指標 感染組(n=65) 對照組(n=20) t值 P值VitA(μmol/L)0.95 ±0.38 1.17 ±0.33 2.56 ＜0.05 IgG(g/L) 7.72 ±1.12 8.91 ±2.14 2.51 ＜0.05 IgA(g/L) 0.77 ±0.26 0.99 ±0.46 2.18 ＜0.05 IgM(g/L) 2.38 ±0.98 2.35 ±0.85 0.09 ＞0.05 C3(g/L) 1.02 ±0.21 1.34 ±0.33 3.59 ＜0.01 CD+3(%) 65.30 ±2.34 68.15 ±3.29 3.82 ＜0.01 CD+3CD+4(%) 36.32 ±2.19 37.66 ±2.59 2.05 ＜0.05 CD+3CD+8(%) 28.07 ±2.28 26.62 ±3.03 1.29 ＞0.05 CD+4/CD+8(%)1.36 ±0.25 1.44 ±0.21 2.12 ＜0.05

表2 42例SVAD患兒治療后血清VitA及免疫指標水平比較( ±s)

表2 42例SVAD患兒治療后血清VitA及免疫指標水平比較( ±s)

檢測指標 加用VitA(n=21)未加用VitA(n=21)t值 P值VitA(μmol/L)1.28 ±0.23 1.09 ±0.29 2.48 ＜0.05 IgG(g/L) 8.69 ±1.47 7.58 ±1.26 2.70 ＜0.05 IgA(g/L) 1.08 ±0.53 0.89 ±0.32 2.06 ＜0.05 IgM(g/L) 2.78 ±1.06 2.46 ±0.90 2.46 ＜0.05 C3(g/L) 1.55 ±0.82 1.18 ±0.35 2.78 ＜0.01 CD+3(%) 67.05 ±3.90 64.90 ±3.71 2.48 ＜0.05 CD+3CD+4(%) 38.40 ±1.97 36.84 ±1.96 2.18 ＜0.05 CD+3CD+8(%) 26.82 ±1.96 27.04 ±2.68 1.21 ＞0.05 CD+4/CD+8(%)1.50 ±0.76 1.39 ±0.32 2.30 ＜0.05

3 討論

VitA是一種脂溶性維生素，其活性型包括視黃醇、視黃醛和維甲酸。VitA對T細胞、B細胞的影響均以維甲酸受體(RAR)為媒介而發揮作用［5］。VitA受體包括RAR和維甲酸X受體(RXR)，分別有α、β、γ三種亞型，是配體依賴型轉錄調控因子。Wei等［6］報道，VitA的6個受體亞型廣泛分布于幼兒淋巴結的生發中心和邊緣層，受體基因的mRNA表達水平隨兒童的發育而增加。研究表明，VitA不僅參與體液免疫和細胞免疫過程，而且還具有抗炎作用［7］。VitA促進抗感染免疫功能的作用尤其對免疫系統發育不成熟的兒童時期表現更為明顯。實驗證實，在嬰兒接種麻疹疫苗時補充VitA可促進抗麻疹病毒特異性抗體的產生［8］。

VitA缺乏是WHO公認的四大營養缺乏病之一。據WHO估計，全球5歲以下兒童血清視黃醛＜0.7 μmol/L 約為33.3%，處于 VitA 缺乏風險中。我國2000年全國VitA抽樣調查中發現6個月以內兒童SVAD患病率平均為33.4%，農村地區高達39.4%［7］。原因為6個月內兒童主要為母乳喂養，可能與VitA水平低下導致免疫功能下降有關。SVAD在典型癥狀出現之前就已對人體免疫功能造成損害，機體防御病原微生物的屏障功能降低，使感染性疾病易感性上升，患病率和病死率顯著升高［9］。兒童血清VitA水平隨急性呼吸道感染發病率增加而下降，肺炎急性感染時VitA水平顯著降低，SVAD兒童血清IgG、IgM均已明顯下降。本研究結果顯示，感染組處于SVAD 42例，VitA水平及各項免疫指標除CD+3CD+8、IgM外均明顯低于對照組。補充VitA者除外，其余各項免疫指標均較未補充者明顯上升，且臨床癥狀減輕時間明顯縮短。相關分析發現，體液免疫除IgA與VitA水平相關性較大外，余均無明顯相關，細胞免疫除表現負相關外，余均與VitA水平明顯正相關。可見VitA營養無論對血清或黏膜表面抗體產生，還是對細胞免疫活性均有至關重要的維持和促進作用［2］。Tao等［10］在體外培養中發現，全反氏維甲酸可促進幼兒B細胞的活化、分化和成熟，這極可能是VitA增強幼兒體液免疫功能的一個重要機制，RAR-a在這種調控中發揮著關鍵作用。

綜上所述，VitA缺乏可能是導致兒童反復呼吸道感染的重要原因之一，補充VitA有助于提高免疫功能，加速患兒康復。

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