ELISA檢測中全自動加樣引起拖帶假陽性現象的對策分析

潘志勇

隨著全自動加樣設備在血液篩查中的廣泛應用，其加樣過程導致的拖帶現象已引起高度關注。筆者在進行血液標本加樣檢測過程中，發現抗體強陽性標本，引起拖帶現象(以抗-HIV為例)進行統計分析，現報告如下。

1 材料與方法

1.1 血清標本 均來自我站街頭無償獻血者。

1.2 試劑 ELIST試劑為法國伯樂公司生產，在有效期內使用。

1.3 儀器 RSP 150＆BEP III全自動酶免系統深圳賽勒公司提供。

1.4 方法 根據檢測項目和試劑說明書的要求，在RSP 150及BEP III控制微機上編制加樣程序，加樣方向從標本架1起、酶標板從1到12。吸取分配不同的液體試劑或血清標本后，RSP 150按編制程序自動沖洗加樣針。

2 結果

2.1 第1例抗-HIV陽性拖帶現象檢測 出現在抗-HIV同一塊酶標板的H2、H3、H4……H7位置上，標本檢測OD值見表1。本次實驗的Cut off值為0.134，故6份標本5份陽性1份為“灰區”，根據抗-HIV檢測規程，6份標本重新雙孔復試，結果H2標本檢測OD值分別為2.759，2.543仍為強陽性，H3標本OD值分別為0.456，0.403為弱陽性，其余4份樣本雙孔復試為陰性，把H2、H3標本送市疾控中心HIV確認實驗室經蛋白印跡法(WB)確認，H2為抗-HIV陽性，H3為抗-HIV陰性。后追蹤相應血袋辯子標本并進行檢測，H2樣本WB和ELISA結果為陽性，H3樣本WB和ELISA均為陰性。

2.2 第2例抗-HIV陽性拖帶現象檢測 出現在抗-HIV同一塊酶標板的E9、E10、E11、E12位置上，標本檢測 OD值見表2。本次實驗的Cut off值為0.146，4份標本雙孔復試，結果E9標本檢測OD值分別為3.110，3.188仍為強陽性，其他3份樣本雙孔復試為陰性，把E9標本送市疾控中心HIV確認實驗室經蛋白印跡法(WB)確認，仍為抗-HIV陽性。

表1 第1例拖帶陽性檢測結果

表2 第2例拖