適用創(chuàng)傷骨科外周血細胞復檢規(guī)則的探討

陳延演,劉 誠,張會英

(北京積水潭醫(yī)院 檢驗科,北京 100035）

骨科患者,大部分由外傷,感染等因素引起外周血細胞數(shù)量和形態(tài)的應(yīng)激變化,如使用通用的復檢規(guī)則會造成假陽性標本的數(shù)量增加,為確保質(zhì)量,我們參考“國際血液學41條復檢規(guī)則”[1]和“XE-2100復檢協(xié)作組”的23條復檢規(guī)則[2]對創(chuàng)傷骨科的外周全血細胞復檢規(guī)則進行探討。

1 材料與方法

1.1 標本來源1050份血標本(840份用于篩選方案的效果評價,210份用于驗證試驗）來自創(chuàng)傷骨科、手外科、脊柱外科、矯形骨科、小兒骨科及其他科的骨傷患者,初診標本508份,術(shù)后復診標本542份。

1.2 儀器與試劑SYSMEX XE-2100全自動血細胞分析儀,原裝配套試劑、校準物和質(zhì)控物。按要求對儀器進行校準和每日進行嚴格的室內(nèi)質(zhì)量控制。OLYMPUS CX-21雙筒顯微鏡;瑞氏染液。

1.3 檢測方法所有標本于采血后30min至4 h用XE-2100自動進樣模式檢測,將檢測報告?zhèn)浞荽鏅n。同時每份標本制備2張血涂片,瑞氏染色,由兩名具有五年以上臨檢工作經(jīng)驗人員按中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準的白細胞分類計數(shù)參考方法進行鏡檢[3]。

1.4 初定復檢規(guī)則參考“國際血液學41條復檢規(guī)則”和“XE-2100復檢協(xié)作組”23條復檢規(guī)則,根據(jù)我院骨科患者為主的特點,與臨床醫(yī)師討論,初步制定血細胞復檢規(guī)則(見表1）。

1.5 復檢規(guī)則評估與改進方案應(yīng)用人工鏡檢的結(jié)果對初定復檢規(guī)則進行統(tǒng)計學評估,以鏡檢結(jié)果為金標準,評估初定復檢規(guī)則對標本判斷的真陽性率、假陽性率、真陰性率和假陰性率,并對以上各條規(guī)則進行統(tǒng)計學評價。其中真陽性定義為觸發(fā)規(guī)則且鏡檢結(jié)果為陽性,假陽性定義為觸發(fā)規(guī)則但鏡檢結(jié)果為陰性,真陰性定義為不觸發(fā)規(guī)則且鏡檢結(jié)果為陰性,假陰性定義為不觸發(fā)規(guī)則而鏡檢結(jié)果為陽性。并根據(jù)骨科患者的臨床特點,對復檢規(guī)則進行改進。

表1 初步制定血細胞復檢規(guī)則

改進方案一:更改初定規(guī)則3、4、5條為,WBC＜3.0或 ＞30.0×109/L,PLT＜70或＞1000×109/L,HGB＜70g/L或＞180g/L

改進方案二:更改方案一11條為Neut%≥90%

改進方案三:更改方案二12條為Lym%≥50%(年齡＞8歲）

改進方案四:更改方案三19條為AL≥150(儀器無其他陽性）

改進方案五:更改方案四17條為IG≥140(儀器無其他陽性）

改進方案六:更改方案五17、19條為 IG≥160,AL≥160(儀器無其他陽性）

1.9統(tǒng)計方法:使用Excel軟件進行統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果

2.1 各方案評估應(yīng)用840例儀器檢測數(shù)據(jù)和顯微鏡人工鏡檢結(jié)果對初定復檢規(guī)則及6個改進方案進行評估,并對其真陽性率、假陽性率、真陰性率、假陰性率以及復檢率進行統(tǒng)計,見表2。

2.2 初定復檢規(guī)則及改進方案假陽性及假陰性統(tǒng)計

2.2.1 假陽性 IG報警53例(6.31%）,假陽性34例(4.05%）。AL報警59例(7.02%）,假陽性57例(6.78%）。AL/BL報警20例(2.38%,6例同時有AL報警）,假陽性19例(2.26%）。BL報警 7例(0.83%,6例同時有IG和AL報警）,假陽性5例(0.6%）。血小板凝集報警9例(1.07%）,假陽性8例(0.95%）。

2.2.2 假陰性 中晚幼粒細胞鏡檢陽性34例(4.05%）,假陰性19例(2.26%）。鏡檢發(fā)現(xiàn)血小板凝集7例(0.83%）,假陰性6例(0.71%）。有核紅細胞鏡檢陽性4例(0.48%）,假陰性4例(0.48%）。

2.3 復檢規(guī)則的制定根據(jù)“國際血液學41條復檢規(guī)則”、“XE-2100復檢協(xié)作組”23條復檢規(guī)則和6個改進方案,對840份標本進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析,并結(jié)合初定復檢規(guī)則在日常工作使用中發(fā)現(xiàn)的某些缺陷、創(chuàng)傷骨科特點和XE-2100的性能特點進行了反復研究,最終確定方案六為創(chuàng)傷骨科適用的外周全血細胞復檢規(guī)則。

2.4 驗證試驗選用210例臨床標本對該方案進行驗證試驗。結(jié)果為假陽性16例(7.62%）,假陰性10例(4.76%）,真陰性184例(87.62%）。滿足假陰性＜5%的要求。

3 討論

XE-2100能快速準確地對各種血細胞進行分類計數(shù),甚至能對原始、幼稚細胞等非正常外周血細胞進行報警提示。但是與人工鏡檢相比,仍存在較高的假陽性報警。Bourner等[4]曾對4種型號的血細胞分析儀進行比較,結(jié)果發(fā)現(xiàn)XE-2100假陽性率最高。

隨機抽取的840例標本均來自本院創(chuàng)傷骨科、手外科、脊柱外科、矯形骨科、小兒骨科及其他骨科創(chuàng)傷病房(除骨腫瘤科）,患者多以外傷、骨折、失血、感染或擇期手術(shù)后再創(chuàng)傷為主。其外周血象多見白細胞和中性粒細胞的絕對增多[5]。但這現(xiàn)象多為一過性,是機體的一個正常反應(yīng)。因此復檢方案提高了白細胞計數(shù)和中性粒細胞分類上限。

此次異型淋巴細胞在鏡檢中多見,但多數(shù)未達到鏡檢陽性標準是規(guī)則中假陽性的主要組成部分。可能是因為淋巴細胞離體后因為容器、抗凝劑等外界刺激以及隨著放置時間延長而發(fā)生活化[6],導致儀器報警。

單獨BL報警一例,單獨AL/BL報警14例,鏡檢均為陰性。我們在工作中也發(fā)現(xiàn)單獨BL或AL/BL報警時未見人工鏡檢陽性。與李亞紅等[7]報道相似。但因為出現(xiàn)原始細胞對于血液病診斷意義重大,故未刪改,以保證不漏檢原始細胞。

回顧近兩年的血常規(guī)復查記錄,發(fā)現(xiàn)在標本采集符合要求的前提下,血常規(guī)數(shù)據(jù)的復查結(jié)果均與初次檢測結(jié)果相符。建議對WBC、HGB、PLT復查范圍進行了相應(yīng)的調(diào)整,在不降低結(jié)果可信度的情況下,減少復查標本數(shù)量。

國際血液學復檢專家組認為5%是為保證患者檢測結(jié)果安全性的最大可接受的假陰性率[8]。因此,在制定新復檢規(guī)則的過程中,為了降低假陽性率和假陰性率我們修改了7個報警指標的臨界值。對最后確定方案進行驗證試驗的結(jié)果顯示,假陰性10例占4.76%,其中6例為血小板凝集,4例為鏡檢發(fā)現(xiàn)中性中幼粒細胞占1%,這與“XE-2100復檢協(xié)作組”[2]所得結(jié)果相似。本次試驗發(fā)現(xiàn)血小板凝集的假陽性率很高,李寶青等[9]也有相似發(fā)現(xiàn)。其可能的原因是當出現(xiàn)較多破碎的紅細胞、白細胞或巨大血小板時,儀器容易出現(xiàn)血小板凝集報警。血小板凝集報警的假陰性率也很高,可能是因為血小板只有微小凝集且數(shù)量不多,大血小板計數(shù)和血小板體積分布寬度未達到一定的閾值,未達到儀器設(shè)置的報警限而不觸發(fā)儀器報警。

綜上所述,我們根據(jù)所用XE-2100血細胞分析儀的性能,結(jié)合創(chuàng)傷骨科的特點,不斷完善復檢規(guī)則。在保證假陰性率＜5%的情況下,降低了復檢率,并且未發(fā)現(xiàn)白血病細胞漏檢。因此本復檢規(guī)則適用于創(chuàng)傷骨科的外周全血細胞分析。

[1]Barnes PW,McFadden SL,Machin S,et al.The international consensus group for hematology review:suggested criteria for action following automated CBC and WBC differential analysis[J].Laboratory Hematology,2005,ll(2）:83.

[2]XE-2100血細胞分析復檢標準制定協(xié)作組.Sysmex XE-2100自動血細胞分析和白細胞分類的復檢規(guī)則探討[J].中華醫(yī)學檢驗雜志,2008,31(7）:752.

[3]中華人民共和國衛(wèi)生部.中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準一細胞分類計數(shù)參考方法[M].北京:人民衛(wèi)生出版杜,2005.

[4]Bourner G,Dhaliwal J,Sumner J.Perfor mance evaluation of the latest fully automated hematology analyzer in a large commercial laboratory setting:a 4-way,side-by-side study[J].Lab Hematol,2005,11:285.

[5]王鴻利,主編 血液學和血液學檢驗[M].第2版.北京:人民衛(wèi)生出版社,1999,139-142.

[6]樊笑霞,吳 飛,王 凌,等.EDTA-K2對異型淋巴細胞檢測的干擾[J].第二軍醫(yī)大學學報.2009,30(5）:595.

[7]李亞紅,林志遠,羅建偉.XE-2100血細胞分析儀白細胞報警功能的評價[J].實用醫(yī)技雜志,2006,13(6）:936.

[8]盧興勇,叢玉隆.應(yīng)重視和提升傳統(tǒng)血液形態(tài)學檢驗診斷水平[J].中華檢驗醫(yī)學雜志,2006,29(6）:481.

[9]李寶青,葉映月,林 莉,等.Sysmex XE-2100計數(shù)血小板時出現(xiàn)QFlags報警提示的可靠性評價[J].臨床檢驗雜志,2009,27(2）:158.