CT與P16對比研究對早期肺癌的診斷價值

李 嵐,遲艷飛

(吉林省人民醫院腫瘤科,吉林長春 130021）

目前對肺癌早期診斷尚無較好的指標。由于CT具有良好的密度分辨力,能給出清晰的橫斷面圖像,是從宏觀形態學上認識肺癌的有效手段,但同一組織類型的肺癌其生長分化、侵襲轉移等生物學特點亦存在差異,使影像學復雜化。p16基因蛋白表達的分子生物學指標檢測可反映腫瘤的惡性程度及生物學行為[1]。我們采用免疫組化與CT相對照的研究方法,分析微觀領域的分子生物學研究與宏觀的肺癌CT形態學表現之間的聯系,旨在提高肺癌的早期診斷水平。

1 材料與方法

1.1 一般資料取2008年2月至2010年2月在我院有完整病案資料、CT掃描片、術前未予放療或化療,且有滿意的石蠟包埋手術標本的周圍型肺癌60例,其20例含正常肺組織、癌旁肺組織(取材位于癌周組織的10 mm以內）、肺癌組織(取材位于癌中心5 mm內）各1塊作為研究對象;另外 40例僅取材于癌塊組織;其中男30例,女 30例,年齡38-78歲,平均58.2歲。

1.2 檢查方法

1.2.1 螺旋CT掃描 全部病例采用GE公司螺旋CT機自肺尖至膈頂常規平掃,層厚10 mm,層距10 mm,瘤體中心層面加用5mm或1 mm薄層HRCT掃描,然后高壓注射器經肘靜脈注射非離子型造影劑碘海醇100 ml,動態增強掃描,層厚2-3 mm。平掃觀察指標包括腫瘤的大小、瘤體的輪廓(分葉征,棘狀突起）、瘤體邊緣特征(光滑,毛刺征）、內部特點(空洞,含氣支氣管征,鈣化）、周邊特點(血管集束征,胸膜凹陷征）及肺門或縱隔淋巴結有無腫大。增強掃描觀察腫瘤強化的程度和模式,并選擇其最大層面實質中央區取圓形感興趣區(ROI）,直徑占病灶直徑60%,盡可能避開鈣化、壞死區,分別測量增強前后的CT值,取各病灶每次掃描增強前后差值的平均值。

1.3 P16檢測所有標本均經10%福爾馬林液固定,石蠟包埋,切片厚0.4μ m,常規HE染色,光鏡下行細胞形態學觀察,以確定病理診斷及分組。免疫組化染色采用S-P法,按說明書操作。陽性對照片為已知肺癌陽性片,PBS代替一抗為陰性對照片。免疫組化結果p16表達陽性為細胞核或細胞漿內出現棕黃色顆。p16免疫組化結果判定:按其染色有無及強弱程度劃分為:無陽性細胞為陰性(-）,陽性細胞＜25%為弱陽性(+）,陽性細胞26%-50%為陽性(++）,陽性細胞51%-75%為較強陽性(+++）,陽性細胞＞75%為強陽性(++++）。計數資料采用χ2檢驗。檢驗水準α=0.05。

2 結果

本研究選擇3 cm作為腫瘤大小的分界,是依據1985年與1997年國際抗癌聯盟(UICC）所定的TNM分期法。當CT測量腫瘤最大直徑＞3 cm,形態特征中短毛刺、深分葉、棘狀突起的出現,當出現淋巴結轉移時,p16蛋白表達缺失率均明顯增高(P＜0.05）,腫瘤形態內部征象及周邊表現與p16蛋白表達沒有明顯關系(P＞0.05）(見表1）。

3 討論

肺癌是常見并具很強侵襲性的惡性腫瘤,因此肺癌的早期診斷是提高患者生存率的關鍵[2]。p16基因已證實為抑癌基因,位于人染色體9P21區,可直接參與細胞周期,阻止細胞從G1期進入S期,抑制細胞增殖,使細胞按正常程序周期分裂、生長和死亡,防止細胞周期失控變成無限制擴增、分裂、生長,最終向腫瘤發展和轉化,從而達到抑癌作用[3]。細胞周期調節失控是癌變的重要原因,當細胞周期失控后,就會造成細胞惡性增生,這些細胞增殖分裂加速,促進腫瘤的演進及最終使癌細胞獲得轉移的潛能。因此,P16的缺失或失活都有可能促進細胞癌變,導致腫瘤的發生、發展和惡化[4]。近年來,隨著分子生物學技術的進步,基因與影像對比研究已成為腫瘤早期診斷領域研究的焦點。探討肺癌的腫瘤細胞分子生物學因素與影像的關系是我們對腫瘤的認識從宏觀到微觀,又從微觀到宏觀的反復,也是全面正確認識肺癌侵襲性及預后的橋梁[5]。本研究結果顯示當CT測量腫瘤最大直徑＞3 cm時,惡性度較高且預后較差,在腫瘤的形態特征中短毛刺、深分葉、棘狀突起的出現p16蛋白表達缺失率均明顯增高(P＜0.01）,提示腫瘤具有較強的增殖與侵襲力,是預后不良的重要因素。本研究發現腫瘤形態內部征象及周邊表現與p16蛋白表達沒有明顯關系(P＞0.05）,提示它們不是肺癌組織特征性表現,但對鑒別診斷有一定價值。當出現淋巴結轉移時,p16蛋白表達缺失率均明顯增高。p16蛋白表達與CT有機結合使我們了解肺癌的惡性程度和預后的生物學因素與腫瘤生長方式和形態學表現的相關性,由此我們認為對將CT表現與p16蛋白表達指標相結合,無典型CT表現如短毛刺、深分葉、棘狀突起的早期肺癌,如能將CT表現與p16蛋白表達指標相結合,有助于肺癌的早期診斷。另外,基因治療作為肺癌治療的一個重要研究方向有著極大的潛力,影像學在基因運送途徑、療效觀察等方面有作為,相信隨著分子生物學的不斷發展,p16基因會成為肺癌早期發現并進行基因治療的靶基因。

表1 P16在肺癌中的表達與CT表現的關系

[1]劉 雪、陳 冰、黃明明.p16基因在肺癌中的表達及意義[J].中國實用醫藥,2009,4(14）:122

[2]張軍航、馬 琳、劉芙蓉等.肺癌組織中p16基因mRNA表達及其臨床意義[J].中華實驗外科雜志,2004,21(4）:464.

[3]方 艷、吳宏培、王小平.原發性肺癌組織中p16基因的表達及其臨床意義[J].實用醫技雜志,2008,15(30）:4286.

[4]周華富、張興華、薛邦德等.非小細胞肺癌組織中p16基因表達的意義[J].廣西醫學,2009,31(06）:776.

[5]劉 亮,曹愛紅,王緒等.早期肺癌的診斷-CT與p53、p16對比研究[J].中國煤炭工業醫學雜志,2008,11(10）:1527.