尿蛋白、微量白蛋白及尿蛋白電泳聯合檢測診斷糖尿病早期腎損害

廖 群,陳芳華

(重慶市急救醫療中心,重慶 400014）

腎臟是糖尿病侵襲的靶器官之一。蛋白尿是慢性腎損傷的臨床表現和預后指標之一。尿微量白蛋白是早期腎臟損傷的標志;而尿蛋白電泳可以區分尿蛋白的來源。本文將對其聯合檢測在糖尿病腎損傷中的意義進行探討。

1 材料和方法

1.1 對象患者組:75例病人均來之我院門診及住院病人,年齡35--82歲,男性32名,女性43名。對照組:我院健康體檢者40例。

1.2 儀器法國SEBIA HYDRAS全自動電泳儀,法國Lisa500特種蛋白分析儀,日立7060全自動生化分析儀。H-300尿液分析儀。

1.3 試劑HYDRAS全自動電泳儀配套試劑;尿微量蛋白檢測試劑為北京萊邦生物技術有限公司提供,尿微量白蛋白世紀由英國朗道實驗室有限公司提供;肌酐試劑由Sysmex公司提供。尿蛋白定性試紙由長春迪瑞實業有限公司提供。

1.4 方法對所有標本同時在法國Lisa500特種蛋白分析儀用Microprotein比色法檢測尿液微量蛋白、免疫比濁法檢測微量白蛋白,日立7060全自動生化分析儀酶法檢測尿肌酐。法國SEBIA HYDRAS全自動電泳儀用HYDRAS全自動電泳儀配套試劑進行尿蛋白電泳。試紙法尿蛋白定性。

1.5 統計學分析所有數據用±s表示,采用t檢驗進行統計學分析。

2 結果

2.1 糖尿病組與陰性對照組比較

陰性對照組共計40人,其中男性25名,女性15名,平均年齡37歲,糖尿病組共計75人,其中男性32名,女性43名,平均年齡65歲。兩組比較結果見表1

表1 糖尿病組結果與陰性對照組比較

從表1中可以看出與對照組相比:糖尿病(1-5年）組尿蛋白增高不明顯,微量白蛋白及Malb/Ccr有顯著性差異;糖尿病(5年以上）組各組分均有極顯著性差異。糖尿病(1-5年）組與糖尿病(5年以上）組相比,各組分間有顯著性差異

2.2 糖尿病組與對照組尿蛋白電泳結果比較

陰性對照組共計40人,其中男性25名,女性15名,平均年齡37歲,糖尿病組共計75人,其中男性32名,女性43名,平均年齡65歲。在SDS電泳中,尿蛋白被按分子量分離。以白蛋白分子量70 kDa為基準將尿蛋白分為＜70 kDa(小分子蛋白尿）;=70 kDa(白蛋白尿）;＞70 kDa(大分子蛋白尿）;比較結果見表2。

表2 尿蛋白電泳結果比較

從表2中可以看出:糖尿病(1-5年）組與糖尿病(5年以上）組相比各組分間有顯著性差異。陰性對照僅有3例出現白蛋白區。

3 討論

DM發病率在我國從70年代中期的1%上升至近來的近3%,糖尿病腎病(diabetic nephropathy,DN）是合并癥,也是糖尿病微血管病變最危險的并發癥之一,其主要病理特征是腎小球硬化。在Ⅰ型糖尿病及Ⅱ型糖尿病發病率中分別為30%-40%與15%-20%左右[1]DN是一個進展性的疾病,患DN幾年后可致慢性腎功能不全、蛋白尿。蛋白尿的程度與腎病進展期相平行。臨床一旦出現持續性蛋白尿,其腎功能將不可遏止的進行性下降。微蛋白尿是DM患者早期腎損害的表現之一。

尿微量ALB測定是目前診斷DN的最簡單可行的方法,它有助于預測DN,也可了解微血管、大血管等并發癥。在正常時絕大多數蛋白不能通過腎小球濾過膜。病理條件下,由于濾過膜的損傷尿微量ALB排出增加導致尿中微量ALB增高,尿微量ALB的出現是腎臟早期損傷的標志。本文的尿微量白蛋白檢測結果顯示,糖尿病初期在尿蛋白定性為陰性時部分病例即出現尿微量白蛋白增高且尿微量白蛋白增高的幅度與病人的病程成正比,表明尿微量白蛋白是腎損傷的早期敏感指標。由表1中可以看出尿微量白蛋白/肌酐(UMalb/Ccr）這一指標與尿微量白蛋白的變化幅度一致。由于尿微量白蛋白檢測須留24小時尿比較繁瑣,而隨機尿又由于影響因素較多而不準確,但經肌酐校準后結果較穩定。國內外文獻中Umalb的報告方式以肌酐校準應用最多[2],有文獻顯示Umalb/Ccr與24小時尿微量白蛋白定量高度相關[5,6]而采用隨機尿,大大方便了病人,因此建議用尿微量白蛋白與肌酐比值來代替尿微量白蛋白檢測。

蛋白尿是腎臟病變地一個重要指針,蛋白尿來源的區分對腎病的診斷、治療和預后觀察均有重要參考意義。無論是蛋白定性還是定量檢測,均無法判斷尿蛋白的來源。SDS尿蛋白電泳是將SDS與尿中的蛋白結合形成SDS-蛋白復合物,并按不同的遷移率在高篩網孔凝膠內分離,使蛋白按分子量大小排列。分子量=70 kDa為中分子蛋白(白蛋白）,分子量＜70 kDa為小分子蛋白,主要包含β2微球蛋白,視黃醇結合蛋白,輕鏈等,分子量＞70 kDa為大分子蛋白,主要有轉鐵蛋白,免疫球蛋白等。根據尿中出現的不同分子量的蛋白可以判斷出腎臟不同的受損位置。因濾過膜的損傷導致通透性的改變,大、中分子均能通過濾過膜而在尿中出現大、中分子蛋白為腎小球蛋白尿。因腎小管重吸收障礙而導致尿中出現小分子蛋白為腎小管蛋白尿。尿中同時出現大、中、小分子為混合性蛋白尿,表示腎小球、腎小管均受損。尿中僅有少量中分子蛋白為生理性白蛋白尿。本文40例陰性對照中出現3例單純生理性白蛋白,32例短病程病例中有4例無蛋白條帶,20條中分子條帶,8條大分子條帶。43例長病程病例中有14條中分子條帶,12條大分子條帶,9條小分子條帶,8條混合分子條帶。同時發現尿蛋白出現的多少與腎臟的受損部位無關。尿蛋白(+）時,尿蛋白電泳不僅表現為單一性的某一部位受損,有的還表現出混合性蛋白尿。而尿蛋白(3+---4+）時可表現出單一性的某一部位的受損或溢出性蛋白尿,也可出現混合性蛋白尿表明腎臟多部位受損與報道一致[3]。從表二中可以看出隨著病程的發展腎臟的受損部位的不同,從發病初期的生理性蛋白尿到腎小球蛋白尿,隨著病程的延長乃至出現混合性蛋白尿符合糖尿病腎病最初累及腎小球的規律。雖然腎穿刺是證實腎臟受損部位的金標準,但對病人的傷害較大,不宜被人接受,文獻報道尿蛋白電泳結果與腎穿刺結果相符[4]。通過尿蛋白電泳組分,可以清楚的了解腎臟受損的部位和受損程度。

綜上所訴,尿微量白蛋白是檢測腎小球受損的早期指標,而尿蛋白電泳可以判別尿蛋白的來源及腎臟損傷的程度,因此聯合檢測尿微量白蛋白及尿蛋白電泳對糖尿病腎損傷的早期定位,鑒別診斷,指導治療和判斷預后有較好的臨床意義。

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[3]高 原,葛青瑋,蔣 巍.非濃縮尿瓊脂糖蛋白電泳及臨床應用[J]上海醫學檢驗雜志,2002,17:160.

[4]沈 霞,張敏華,汪 萍,等.非濃縮尿蛋白電泳的臨床應用[J]中華檢驗醫學雜志,2001,24(5）:266.

[5]葉躍紅,高 科,李興祿.尿沉渣分析和尿微量白蛋白在早期糖尿病中的臨床應用[J].重慶醫藥,2003,32,(12）:1642.

[6]劉小玲,張 筠.點時間尿微量白蛋白/尿肌酐比值與24小時尿微量白蛋白定量的臨床評價[J].重慶醫藥,2005,34(10）1518.