絞股藍皂苷對高脂血癥大鼠脂代謝的影響

沈 楠，許文頻，李 敏，歐陽瓊，馬 捷，駱涵之，李衛東

絞股藍為葫蘆科植物絞股藍（Gynostemma pentaphyllum Makino）的多年生落葉草質藤木。絞股藍皂苷（Five leaf Gynostemma Herb Saponin，FGHS）是從絞股藍中提取的有效成分群，具有降血脂、抗氧化等多種作用［1］。本研究旨在從絞股藍調節血脂代謝。糾正肝臟損傷，抑制脂質過氧化三個方面系統的闡述其治療高脂血癥的機制，為其進入臨床提供可靠的理論依據。

1 材料與方法

1.1 動物 健康雄性SD大鼠，體重180g～200g，由北京大學醫學部實驗動物科學部提供。

1.2 藥物和試劑 三酰甘油（TG）、總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白（HDL－C）、低密度脂蛋白（LDL－C）測定試劑盒系浙江東甌生物工程有限公司；絞股藍皂苷由安康北醫大制藥有限公司提供。

1.3 方法

1.3.1 高脂乳劑的配制 參照文獻方法制備高脂乳劑［2，3］，含10%膽固醇、20%豬油、2%膽酸鈉、1%丙硫氧嘧啶、20%吐溫80、20%丙二醇。

1.3.2 動物模型的建立 按文獻方法［4］給予大鼠高脂乳劑10 mL／kg，同時正常對照組灌胃等量生理鹽水，連續用至第10天時，各組大鼠斷尾取血，測血清血脂。

1.3.3 分組及給藥方法 將模型動物分為模型對照組、陽性藥［非諾貝特（力平之），20mg／kg］對照組、絞股藍皂苷20mg／kg、36 mg／kg、65mg／kg、117mg／kg和210mg／kg五個劑量組。連續灌胃給藥20d。給藥過程中，除正常對照組外，其余各組上午繼續給予高脂乳劑（10mL／kg）灌胃。

1.3.4 測定指標及方法 末次給藥后禁食12h，摘眼球取血觀察。

1.3.4.1 血清生化 測定血清 TG、TC、LDL－C、HDL－C、谷草轉氨酶（AST）、谷丙轉氨酶（ALT）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平。

1.3.4.2 肝臟生化 在相同部位取肝臟制成10%勻漿，提取上清液，用酶法測定TG、TC、MDA、SOD含量。

1.3.4.3 組織學病檢 取0.5cm×0.5cm×1cm切塊，HE染色，做病理組織學觀察。

1.3.4.4 肝體重比 摘取動物全肝，稱重，肝重／體重即為肝體重比。

2 結 果

2.1 絞股藍皂苷對高血脂大鼠血清ALT、AST水平的影響與模型組相比，給藥后絞股藍皂苷210mg／kg、117mg／kg劑量組對升高的ALT水平有抑制作用。與正常對照組比較，模型組大鼠AST水平升高不明顯。詳見表1。

表1 絞股藍皂苷對高血脂大鼠ALT、AST的影響（±s）

表1 絞股藍皂苷對高血脂大鼠ALT、AST的影響（±s）

組別 劑量 ALT U／L AST U／L－ 62.50±10.07 155.13±17.46模型組 － 125.50±25.812） 148.13±17.43力平之組 20mg／kg 79.00±15.551） 136.88±64.19絞股藍皂苷組210mg／kg 89.25±28.411） 139.75±25.82 117mg／kg 102.88±7.261） 130.75±19.17 65mg／kg 106.75±26.18 128.75±16.65 36mg／kg 110.38±29.19 136.75±14.71 20mg／kg 108.00±16.46 130.63±13.24與模型組比較，1）P＜0.05；與正常對照組比較，2）P＜0.05正常對照組

2.2 絞股藍皂苷對高血脂大鼠血清血脂水平的影響 與模型組比較，絞股藍皂苷210mg／kg、117mg／kg劑量組可使TC和LDL－C明顯降低（P＜0.05）。絞股藍皂苷210mg／kg、117mg／kg劑量組還有升高HDL－C趨勢（P＞0.05）。詳見表2。

表2 絞股藍皂苷對高血脂大鼠血清血脂水平的影響（±s）mmol／L

表2 絞股藍皂苷對高血脂大鼠血清血脂水平的影響（±s）mmol／L

TC TG HDL－C LDL－C正常對照組組別 劑量8.89±1.48 1.74±0.75 0.63±0.09 0.27±0.10模型組 － 14.70±1.382） 6.78±2.032） 0.46±0.15 1.15±0.132）力平之組 20mg／kg 8.90±1.081） 1.63±0.331） 0.59±0.20 0.76±0.141）絞股藍皂苷組 210mg／kg 7.62±1.361） 1.61±0.321） 0.65±0.17 0.64±0.111）117mg／kg 11.43±2.211） 1.90±0.681） 0.63±0.19 0.78±0.051）65mg／kg 12.49±4.75 1.70±0.201） 0.56±0.20 1.37±0.45 36mg／kg 13.16±3.73 1.86±1.00 0.50±0.16 1.30±0.75 20mg／kg 15.36±5.04 2.25±0.96 0.44±0.16 1.35±0.41與模型組比較，1）P＜0.05；與正常對照組比較，2）P＜0.05－

2.3 絞股藍總皂苷對高血脂模型大鼠血清MDA、SOD的影響

與模型組比較，絞股藍皂苷210mg／kg劑量組可使MDA血清含量降低（P＜0.05），絞股藍皂苷各劑量組則均可明顯升高SOD水平（P＜0.05）。詳見表3。

表3 絞股藍總皂苷對高血脂模型大鼠MDA、SOD的影響（±s）

表3 絞股藍總皂苷對高血脂模型大鼠MDA、SOD的影響（±s）

mL正常對照組組別 劑量 MDA nmol／mL SOD U／9.11±1.14 362.90±22.72模型組 － 10.57±2.132） 265.10±59.832）力平之組 20mg／kg 8.80±0.521） 318.20±35.741）絞股藍皂苷組210mg／kg 8.82±0.501） 316.09±46.441）117mg／kg 10.49±1.14 323.55±82.351）65mg／kg 11.97±1.57 317.91±35.191）36mg／kg 10.74±1.11 314.83±27.371）20mg／kg 11.56±2.08 345.35±37.651）與模型組比較，1）P＜0.05；與正常對照組比較，2）P＜0.05－

2.4 絞股藍皂苷對高血脂大鼠肝體重比的影響 與模型組相比，絞股藍皂苷各劑量組均可降低用藥組大鼠肝體重比（P＜0.05）。詳見表4。

表4 絞股藍皂苷對高血脂大鼠肝體重比的影響（±s）

表4 絞股藍皂苷對高血脂大鼠肝體重比的影響（±s）

組別 劑量 肝體重比（mg／g）正常對照組 － 32.46±1.66模型組 － 45.04±3.622）力平之組 20mg／kg 39.91±4.181）絞股藍皂苷組 210mg／kg 36.42±2.551）117mg／kg 37.86±3.321）65mg／kg 39.46±3.061）36mg／kg 37.98±3.581）20mg／kg 38.62±3.661）與模型組比較，1）P＜0.05；與正常對照組比較，2）P＜0.05

2.5 絞股藍皂苷對高血脂大鼠肝臟組織學的影響 與模型組相比，除低劑量組外，中高劑量組的絞股藍皂苷均可減輕大鼠肝脂肪病變程度，呈劑量相關。

3 討 論

近年來高脂血癥有年輕化的趨勢。高脂血癥容易導致脂肪肝［5－7］、動脈粥樣硬化［8－12］等其他嚴重疾病。目前臨床應用 的 降脂西藥主要有他汀類、煙酸類、貝特類、膽酸螯合劑類、多稀類等。但是上述藥物具有明顯的不良反應，如橫紋肌溶解、體內代謝障礙、胃腸道反應等，嚴重的甚至導致肝腎功能的損傷［13］。因而在臨床應用中它們是一把雙刃劍。而絞股藍皂苷作為一種中藥成分，經許多動物和臨床實驗證實，除了具備與主流治療高脂血癥藥物相似的降脂效果以外，無明顯毒性反應［14］。

本研究發現，高劑量絞股藍皂苷能明顯下調血清TC和LDL－C含量；高、中劑量則可使血清中TG水平顯著降低。高脂血癥能夠引起肝臟氧化損傷，影響正常肝臟形態和功能。在本實驗中，同時還觀察絞股藍皂苷在逆轉實驗性高脂血癥大鼠肝臟損傷中的作用。發現絞股藍皂苷各劑量組均可降低大鼠肝體重比，明顯改善動物模型大鼠肝臟脂肪變，糾正高脂血癥對肝臟的損害。但是，低劑量組藥效不如中、高劑量組，提示絞股藍皂苷的藥效存在一定的劑量相關性。目前臨床肝功能檢查的主要指標是ALT和AST。當肝細胞受損時，上述酶釋放入血，含量將顯著增高。本實驗測定ALT和AST的含量，評價絞股藍皂苷對抑制實驗性高脂血癥大鼠肝臟損傷的作用。發現絞股藍皂苷高劑量組顯著降低了血清中ALT的含量，并存在明顯的量效關系。而因為本高脂模型對AST影響不大，用藥后絞股藍皂苷對AST幾乎無明顯影響。

高脂血癥引起脂肪肝與脂質過氧化損傷有著密切的關系。SOD是機體細胞中重要的抗氧化酶，是維持生物體自由基產生和過氧化物清除能力平衡的重要物質。而MDA是氧自由基攻擊生物膜中的多聚不飽和脂肪酸而形成的脂質過氧化物。當血脂升高時，脂質代謝紊亂，機體產生過多的氧自由基，SOD活性降低，MDA含量增加。本實驗發現，在血清中，絞股藍皂苷在各劑量組則均可明顯升高SOD水平，低劑量組可顯著下調MDA含量，絞股藍皂苷具有對抗脂質過氧化的藥理作用。

［1］李金青，楊洪軍.絞股藍的藥理作用研究進展［J］.中國現代藥物應用，2009，3（7）：189－190.

［2］周曉霞，尤翠蘭，蘇佩清，等.黃芩莖葉總黃酮對高脂血癥大鼠脂代謝的影響［J］.中藥新藥與臨床藥理，2009，20（2）：99－101.

［3］倪鴻昌，李俊，金涌.大鼠實驗性高脂血癥和高脂血癥性脂肪肝模型研究［J］.中國藥理學通報，2004，20（6）：703－706.

［4］Liu M，Dong CR，Su JY.A kind of simple and practical model of big rat with high fat in blood［J］.Chin Pharmacol Bull，1989，5（2）：119.

［5］陳灝珠.實用內科學［M］.第11版.北京：人民衛生出版社，2004：991－1866.

［6］廖華，杜曉鋒.高脂血癥與脂肪肝的相關性研究［J］.中國誤診學雜志，2002，2（9）：1363－1364.

［7］Steinberg D.Thematic review series：The pathogenesis of atherosclerosis.An interpretive history of the cholesterol controversy，Part I［J］.J Lipid Res，2004，45（9）：1583－1593.

［8］Steinberg D.Thematic review series：The pathogenesis of athero－sclerosis.An interpretive history of the cholesterol controversy，partⅡ：The early evidence linking hypercholesterolemia to coronary disease in humans［J］.J Lipid Res，2005，46（2）：179－190.

［9］Steinberg D.Thematic review series：The pathogenesis of atherosclerosis：An interpretive history of the cholesterol controversy，partⅢ：Mechanistically defining the role of hyperlipidemia［J］.J Lipid Res，2005，46（10）：2037－2051.

［10］Steinberg D.Thematic review series：The pathogenesis of atherosclerosis.An interpretive history of the cholesterol controversy，partⅤ：The discovery of the statins and the end of the controversy［J］.J Lipid Res，2006，47（7）：1339－1351.

［11］Steinberg D.The pathogenesis of atherosclerosis.An interpretive history of the cholesterol controversy，partⅣ：The 1984coronary primary prevention trial ends it－almost［J］.J Lipid Res，2006，47（1）：1－14.

［12］Tannock LR.Advances in the management of hyperlipidemia－induced atherosclerosis［J］.Expert Rev Cardiovasc Ther，2008，6（3）：369－383.

［13］黃雪萍.絞股藍總苷與辛伐他汀治療原發性高脂血癥的療效比較［J］.臨床醫藥，2006，15（6）：46.

［14］吳強，彭西，崔恒敏.動物脂肪肝發病機理的研究進展［J］.家禽科學，2006（4）：46－48.