宮頸細胞異型患者HPV感染及基因分型研究

天津醫科大學總醫院（300052）孟雅麗

天津港口醫院（300456）李樹全

宮頸癌是最常見的嚴重危害婦女健康的惡性腫瘤之一，其發病率居女性惡性腫瘤的第二位，全球宮頸癌發病人數逐年增加，尤其在發展中國家更為突出，其中80%的病例發生在發展中國家[1]。我國作為一個發展中國家是宮頸癌的高發地區，每年大約有13.15萬的新發病例，占世界總發病人數的1/3，每年約5萬人死于宮頸癌。近年來，宮頸癌的發病率又有上升趨勢，且年輕患者所占比例逐漸增加[2]。進行正確的早期篩查、早期診斷、早期治療，將其阻斷在癌前病變階段，是預防和控制宮頸癌的關鍵。本研究對宮頸細胞異型患者進行HPV-DNA檢測和陰道鏡下活檢，以探討HPV感染及HPV主要基因型別與宮頸病變的關系。

1 資料和方法

1.1 資料 2009年11月～2010年12月在天津港口醫院門診和病房中行宮頸液基細胞學檢查（Thinprep cytologic test，TCT）者，采用TBS（the bethesda system）分類法，發現意義不明確的非典型鱗狀細胞（Atypical squamous cell of undetermined significance，ASCUS），低度鱗狀上皮內病變（lowgrade squamous intraepithelial lesion，LSIL）及高度鱗狀上皮內病變（high-grade squamous intraepithelial lesion，HSIL）等細胞異型的患者186例，年齡最小的患者為2l歲，最大的患者為61歲，平均年齡為44.0歲。門診檢查者包括因病就診病人及健康查體者，病房中為術前常規的病人，研究中將有前在的宮頸上皮內瘤樣病變（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）史、宮頸、陰道和外陰癌患者及臨床上有免疫抑制、妊娠者除外。

1.2 方法 186例患者均予行HPV-DNA檢測及行電子陰道鏡檢查和宮頸活檢。①HPV-DNA檢測：用宮頸脫落細胞采集器于宮頸口采集表皮脫落細胞，應用香港亞能基因檢測技術研究中心的HPV基因分型芯片檢測系統檢測HPV感染及基因分型情況；②陰道鏡檢：嚴格按照操作說明進行電子陰道鏡檢查，對可疑部位活檢或同時行宮頸管搔刮術；③陰道鏡活檢標本病理學檢查均由天津港口醫院病理科醫師完成。

附表1 病理學與HPV-DNA檢測結果

附表2 各組HPV基因型別的分布[n（%）]

續表2 各組HPV基因型別的分布[n（%）]

1.3 統計學處理 所有資料分析由SPSS 13.0軟件處理，以評估HPV感染及其基因型別與宮頸病變的關系。

2 結果

2.1 病理學與HPV-DNA檢測結果 本組檢測186例中，經陰道鏡活檢病理結果為正常或宮頸炎的患者為130例，宮頸濕疣或CIN1的患者為25例，CIN2-3的患者為25例，宮頸癌的患者6例，其中浸潤性鱗癌的患者5例，1例為腺鱗癌。HPV-DNA陽性者41例，占總數的22.0%，不同病理組別HPV陽性率分別為：正常或宮頸炎組5/130（3.8%）、CIN1組10/25（40.0%）、CIN2-3組20/25（80.0%）、宮頸癌組的陽性率6/6（100%）。見附表1。

經統計分析，X2=99.83，P<0.01，HPV陽性檢出率在不同組織學類型組別間差異顯著。

2.2 HPV基因型別的分布 在41例HPV陽性的病例中共檢出16種HPV亞型，單型別感染的患者34例（82.9%），復合感染的患者為7例（17.1%），其中二重感染的患者5例，三重感染的患者2例，高危型感染的患者40例，占總數的97.6%，其中包含高低危亞型混合感染的患者4例，單型別低危感染的患者1例，占總數的2.4%。在CIN2-3中及宮頸癌病例中，高危型HPV感染率為100%。6例宮頸癌中，有4例宮頸鱗癌感染HPV16，1例宮頸鱗癌感染HPV33，1例宮頸腺鱗癌感染HPV18。在檢出的16種型別中，HPV16（17例）最常見，HPV58（8例）次之，HPV18（5例）居第三位，見附表2。HPV16檢出率明顯高于其他亞型，在各組間差異顯著，P<0.01。

3 討論

宮頸癌的發生是由宮頸癌前病變，即宮頸上皮內瘤樣病變在多個基因、多個因素綜合作用參與下發展而來一個連續的、漸變的過程。從CIN發展到宮頸浸潤癌需要十幾年的時間，由CINⅠ發展到原位癌平均為9年，再發展到浸潤性癌則需要3個月～2年[3]。而宮頸浸潤癌的五年生存率約是67%，宮頸早期癌的五年生存率約是90%，宮頸原位癌的五年生存率幾乎達100%。所以，進行正確的早期篩查、早期診斷、早期治療，將其阻斷在癌前病變階段，是宮頸癌預防和治療工作中的關鍵。

3.1 目前，對宮頸癌及其癌前病變的篩查和診斷，主要采用宮頸脫落細胞涂片和活體組織病理學檢查等形態學方法。其中，活體組織病理學檢查是金標準，可以明確診斷宮頸癌及其癌前病變級別，但其為有創性檢查，會給患者帶來一定的身心影響和經濟負擔。

自以TBS系統為診斷標準的宮頸液基細胞學檢查（TCT）廣泛應用于宮頸癌篩查以來，宮頸癌的發生率和病死率已大幅下降，但因其敏感性、特異性以及可重復性存在缺陷，在臨床應用中仍然存在著一定的漏診率和誤診率，其中以宮頸細胞學異常中最常見的ASCUS和LSIL為首。而HPV感染是宮頸病變產生的必要條件。

國際癌癥研究中心（LARC）在2004年對HPV的總結中提出：沒有持續的HPV感染，女性發生宮頸鱗癌的可能性為0；高危型HPV檢測作為宮頸癌篩查和追蹤管理是有效，可行的[4]。當HPV檢測加入到宮頸細胞學篩查中時，兩者結合的敏感性超過了95%，尤其作對ASCUS來說，HPV檢測比重復細胞學篩查的靈敏度高[5]。

本研究亦證實在高級別的宮頸病變中，HPV的檢出率明顯高于低級別宮頸病變。

3.2 HPV病毒目前確定的型別有110多種，大約有35種與生殖道感染有關，約20種與腫瘤有關。依據不同型別與癌發生的危險性高低，HPV分為低危型如HPV6、11、40、42、43、44、54等，主要引起生殖道、肛周皮膚和陰道下部的外生性濕疣類病變、扁平疣類病變和宮頸低度病變；高危型如HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68等，常與宮頸癌及高級別宮頸上皮內瘤樣病變（CINⅡ/Ⅲ）的發生相關，尤以HPV16、18型最常見。在高級別CIN和宮頸癌組織中，高危型HPV病毒DNA檢出率幾乎為100%，其中HPV16、18的陽性率分別是60%、14%[6]，與本研究結果相似。

在本研究中發現，病毒感染以單一和雙重感染多見，三重及以上感染只見于少數病例。在感染型別上，HPV16型無論在單一感染還是在多重感染中都是最常見的。僅次于HPV16型的是HPV58和18型感染。

綜上所述，在宮頸病變篩查中，HPV-DNA尤其是高危基因型別檢測能夠輔助TCT有效地篩查出宮頸病變，明顯減少宮頸高度病變的漏診，并在預測病變進展及判斷預后等方面有巨大的臨床應用價值。