HG-原子熒光光譜法測定糧食中的總硒

戰桂娟 邊疆

HG-原子熒光光譜法測定糧食中的總硒

戰桂娟 邊疆

微量元素硒在醫學領域有著十分重要的生物學意義，人體攝入硒的不足或過量會導致疾病的發生，據文獻克山病和大骨節病的發生同低硒有密切關系，所以微量硒的準確測定為醫學界所重視［1-2］。一般常用的測定硒的方法有分子熒光法、原子吸收分光光度法等［3］。氫化物原子熒光法(HGAFS)是利用特征輻射源激發待測元素原子并測量其熒光強度的新型分析技術。近幾年來，在衛生理化檢驗領域開始采用其分析技術。本文利用該方法測定糧食中的硒，其方法簡便、快速、準確取得了較滿意的結果。

1 實驗方法

1.1 原理 樣品經消化后，與硼氫化鉀和酸所產生的新生態氫生成硒的氫化物，由氫氣載氣導入石英爐原子化器，使其原子化。在硒特種空心陰極燈激發下，產生原子熒光，測定其熒光強度并與標準系列比較而測出樣品中硒含量。

2 結果與討論

通過試驗，確定儀器最佳測試條件如下:燈電流，80 mA;負高壓，300 V;原子化溫度，200℃;原子化器高度，8.0 mm;載氣流速，400 ml/min;屏蔽氣流速，1000 m1/min;讀數時間，11 s;延遲時間，0 s;測定方式，標準曲線法，讀數方式;峰面積。

2.1 還原劑濃度的確定 經實驗表明:當硼氫化鉀濃度小于0.5%時，熒光強度較低;當硼氫化鉀的濃度達到0.5%時，熒光強度迅速增加;硼氫化鉀濃度＞0.7%時，熒光強度增加趨于平緩;硼氫化鉀濃度達到1.0%時，熒光強度最大，且其變化相對最小;如再繼續增加硼氫化鉀濃度，則將產生大量剩余氣體，沖淡了硒氫化物的濃度，降低了氣態原子的密度，熒光強度緩慢降低。因此確定還原劑硼氫化鉀濃度為1.0%。

2.2 酸度的確定 氫化物的形成與兩個因素有關，一是被測元素與新生態氫的化合速度;另外是硼氫化鉀在酸性溶液中分解時產生新生態氫的速度。硼氫化鉀在酸性介質中的反應當硼氫化鉀溶液濃度一定時，硼氫化鉀的分解速度與氫離子的濃度有關，即與硼氫化鉀所處的酸性介質有關。當氫離子的濃度較小時，硼氫化鉀的分解速度隨著氫離子濃度的增加而加快，熒光強度迅速提高;當氫離子的濃度達到25%時，熒光強度達最大值，但隨著氫離子濃度的進一步加大，所產生的氫氣沖淡了硒氫化合物濃度，反而導致熒光強度下降。為保持其穩定，本實驗確定酸度為25%。

2.3 線性范圍、標準曲線及最低檢出限 在本實驗條件下，針對樣品中硒含量水平，選擇了1.00～10.0 ng/ml范圍內進行測定，其標準曲線的回歸方程為:Y=494.8ρ+1.68;相關系數為0.999 7;最低檢出限為0.06 ng/ml。

2.4 回收率試驗 在糧食中分別添加25、100、400 ng硒標準，按本法進行三濃度水平三平行回收率試驗，回收率在94.5%～101.2%之間。結果見表1。

表1 三濃度水平下回收率試驗

2.5 精密度試驗 取3種不同濃度的標準系列水平進行試驗，每一濃度取6份平行樣品進行測定，其標準差及相對標準偏差，如表2所示。

表2 精密度試驗結果(ng/ml)

2.6 干擾實驗 測定過程中，Cu，Ni等元素的存在對硒的熒光信號有干擾，當加入一定量的鐵氰化鉀時即可消除。本文選用10%的鐵氰化鉀溶液作為基體改進劑。

［1］于敬紅，李環，楊丹妮，等.微量元素硒與健康.中國地方病防治雜志，2009，24(4):265-266.

［2］李景巖.硒與大骨節病.中國地方病防治雜志，2008，23(6): 435-437.

［3］楊慧芬，李明元，沈文.食品衛生理化檢驗標準手冊.中國標準出版社，1997:171-175.

130062 吉林省長春市綠園區疾病預防控制中心(戰桂娟);吉林省疾病預防控制中心(邊疆)

1.2 試劑與儀器

1.2.1 儀器 AFS-230E型雙道原子熒光光譜儀(北京海光儀器公司);硒特種空心陰極燈(北京有色金屬研究院)。

1.2.2 試劑 1%硼氫化鉀溶液(1 g硼氫化鉀溶于100 ml 0.5%氫氧化鉀溶液中，用時現配);硝酸(GR);硒儲備溶液(1 mg/ml)國家標準物質中心;硒標準溶液(100 mg/ml)由硒儲備溶液配制而成;鹽酸(GR);過氧化氫(AR)。

1.3 標準系列溶液的配制 在10 ml比色管中分別加入0.10、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00 ml硒標準液(100 ng/ml)。用少量去離子水稀釋后，加入濃鹽酸2.00 ml，用水稀釋至刻度，搖勻，備用，其濃度分別為1.00、2.00、4.00、6.00、8.00和10.0 ng/ml。

1.4 樣品處理 稱取0.25 g左右樣品于聚四氟乙烯內管中，加入2.50 ml濃硝酸，搖勻浸泡過夜。再加入過氧化氫1 ml。蓋好內蓋，旋緊不銹鋼外套，放入恒溫干燥箱，140℃保持4 h，在箱內自然冷卻至室溫。取出后放入燒杯中，再加入5 ml 6 mol/L鹽酸，置于電熱板上加熱，繼續加熱至溶液變為無色透明并伴有白煙出現，以完全將六價硒還原四價硒。冷卻，轉移10 ml比色管中，同時做空白試驗。

1.5 測定 按本方法所確定的儀器最佳測試條件，將標準系列的濃度及樣品參數等輸入計算機程序后，進行標準溶液及未知樣品的測定。