杯碟法檢測乳中的β-內酰胺酶

薛曉晶，李 玲，金 涌，李 禮，王 芳，任香夫，田世民*

(中國檢驗檢疫科學研究院，北京 100123)

杯碟法檢測乳中的β-內酰胺酶

薛曉晶，李 玲，金 涌，李 禮，王 芳，任香夫，田世民*

(中國檢驗檢疫科學研究院，北京 100123)

采用微生物杯碟法對乳中β-內酰胺酶進行檢測。基于青霉素抑制藤黃微球菌(Micrococcus luteus)生長并產生抑菌圈，利用舒巴坦特異性抑制β-內酰胺酶活性的特點，通過比較含青霉素樣品中加入和未加入舒巴坦所產生的抑菌圈直徑差異，間接判斷樣品中是否含有β-內酰胺酶。結果表明：青霉素G的最佳使用質量濃度為0.5μg/mL，β-內酰胺酶的檢測限因生產廠家隨標注單位不同而不一致，舒巴坦的最佳使用質量濃度為50μg/mL；在此基礎上確立杯碟法檢測β-內酰胺酶的優化方案：設立陰陽性樣品對照組；并對同一樣品進行4個不同添加處理：青霉素G處理，青霉素G、舒巴坦處理，青霉素G、β-內酰胺酶處理，青霉素G、β-內酰胺酶、舒巴坦處理，通過比較4個不同處理產生的抑菌圈直徑差異，并同時參照陰陽性樣品對照組結果，判定樣品中是否存在β-內酰胺酶。

β-內酰胺酶；杯碟法；青霉素G；舒巴坦；乳

β-內酰胺酶[1-3]是指能催化水解6-氨基青霉烷酸(6-APA)、7-氨基頭孢烷酸(7-ACA)及其N-酰基衍生物分子中β-內酰胺環酰胺鍵的滅活酶，即可選擇性分解β-內酰胺類抗生素。近些年，部分不法生產者將其作為“生鮮牛乳抗生素分解劑”使用，用于分解牛乳中殘留的β-內酰胺類抗生素，使牛乳達到乳品檢驗合格標準[4]。目前國內外對β-內酰胺酶的食用安全……