二氧化氯緩釋凝膠促進家兔創面愈合效果的實驗研究

金 偉，閆夢菲，胡超云，徐亞琴，謝 茵，全 紅，畢小平 (山西醫科大學藥學院基礎綜合實驗室，太原 03000;南京農業大學動物科技學院;通訊作者，E-mail:bixping@yahoo.com.cn)

完整的皮膚是人體的天然屏障，在其保護下人體能夠抵抗外來病菌的感染，不會導致機體發生病變，但是一旦皮膚受損，造成與外界相通，甚至完全裸露［1］，各種病菌由傷口侵入宿主，定植后開始生長繁殖，產生毒素，致使傷口膿腫、發炎，嚴重時可能導致潰爛甚至癌變。金黃色葡萄球菌是最為常見的導致感染的革蘭陽性球菌，其后依次為表皮葡萄球菌、糞腸球菌和尿腸球菌［2，3］。

目前人們普遍采用抗生素治療傷口感染，但是長時間大劑量使用抗生素，會造成患者體內菌群失調，形成內源性感染［4］;此外，由于濫用抗生素而出現的細菌的耐藥性問題，導致耐藥菌株越來越多，許多疾病的預防和治療面臨“無藥可用”的難題，對人類健康造成更大的威脅［5］，使臨床創面感染的治療面臨更嚴峻的挑戰。而二氧化氯具有殺菌作用迅速，起效濃度低，不易產生三氯甲烷等致癌物質，消毒作用后殘留生成物為水、氯化鈉和微量二氧化碳有機糖等無毒物質［6］，且所進行的毒理學評價結果均為無毒，無或輕微刺激性，無致突變性［7］。但是將二氧化氯用于臨床作為創面治療制劑的研究報道不多。同時本文首次發現該凝膠劑還具有快速止血的作用。

本文以自制二氧化氯緩釋凝膠，對家兔進行皮膚刺激性試驗并觀察其創面愈合效果。結果顯示二氧化氯緩釋凝膠能夠在創傷表面上形成一層保護膜，切斷其與外界細菌的接觸，具有快速止血、緩釋殺菌效能。其原因是由于二氧化氯凝膠既可以隔斷創面與外界環境的直接聯系，其基質還具有較強的生物相容性，不油膩，對傷口也起到一定的保護作用。據報道創面的濕潤環境有促進局部生長因子的蓄積作用［8］，從而促進創面上皮化，加速創面愈合［9］。二氧化氯凝膠用于治療開放性傷口的感染及快速止血，且療效滿意，為臨床患者創面感染的治療提供一種新的合理有效的用藥方案。

1 實驗材料與方法

1.1 材料與儀器 市售莫匹羅星軟膏(中美天津史克制藥有限公司09030282)，二氧化氯緩釋凝膠(實驗室自制)，二氧化氯凝膠空白基質(實驗室自制)，硫化鈉(天津市北辰方正試劑廠)，甲醛(天津市北辰方正試劑廠)，醫用酒精(德州安捷高科消毒制品有限公司)，鹽酸利多卡因注射液(081109)。

1.2 動物 試驗家兔 6只，1.8－2.2 kg，雄性，由山西醫科大學動物實驗中心提供。

1.3 單次給藥對家兔皮膚刺激性試驗［10］

1.3.1 實驗方法 隨機選取受試家兔3只，在脊柱兩側各選兩個3.0 cm×3.0 cm面積的去毛區，用8%的硫化鈉溶液脫毛，24 h后無破損即可使用。實驗前用75%(V/V)乙醇消毒背部脫毛區，每只家兔4個脫毛區分別涂抹二氧化氯緩釋凝膠、凝膠空白基質、生理鹽水、1.5%甲醛溶液，涂抹后用紗布覆蓋并用醫用橡膠固定。分別貼敷固定24 h后，移去貼敷物，用溫水清潔貼敷面并吸干。

1.3.2 觀察項目 觀察并記錄移去斑貼物后1 h、24 h和48 h后皮膚的紅斑及水腫情況。將無紅斑、勉強可見紅斑、中度紅斑、嚴重紅斑、紫紅色紅斑應有焦痂形成等分別計為0－4.00分。無水腫、勉強可見水腫、皮膚隆起輪廓清楚、水腫隆起1 mm并范圍擴大等分別計為0－4.00分。動物紅斑形成總分與水腫形成總分之和除以動物數為平均反應值。反應平均值＜0.50為無刺激，0.5－ ＜2.00為輕度刺激性，2.00－6.00 為中度刺激性，＞6.00 為強刺激性。

1.4 二氧化氯緩釋凝膠作用效果試驗 取剩余3只家兔，實驗前處理方法同1.3.1項下。實驗前用蒸餾水清洗，用1%鹽酸利多卡因注射液局部麻醉，在每個脫毛區制造開放性創傷面，以皮肉翻開、出血為度，傷口創面約為2.0 cm×0.2 cm。每只家兔的3個創傷面分別涂抹二氧化氯緩釋凝膠、凝膠空白基質、莫匹羅星軟膏(作為陽性對照)，第4個創傷面不做任何處理(作為陰性對照)。其中二氧化氯緩釋凝膠和凝膠空白基質每日一次涂于創傷面，莫匹羅星軟膏按照使用說明書涂抹。之后均用紗布覆蓋并用醫用橡膠固定。觀察并記錄7 d內各創傷面愈合情況，計算平均愈合率［11］:

愈合率=(術后第1天面積－照片當天面積)/術后第1天面積×100%。

2 結果

2.1 單次給藥對家兔皮膚的刺激性 涂抹二氧化氯緩釋凝膠、生理鹽水和凝膠空白基質的3只家兔受試部位均無紅斑、無水腫;涂抹1.5%甲醛溶液的3只家兔受試部位均在1 h觀察時出現中度紅斑(評分為2.00)和勉強可見水腫反應(評分為1.00);24 h觀察時均出現勉強可見紅斑(評分為1.00)和無水腫反應;48 h觀察時則均無紅斑、無水腫。因此計算得涂抹二氧化氯緩釋凝膠、生理鹽水和凝膠空白基質三種處理方式對家兔皮膚平均刺激反應評分均為0，說明二氧化氯緩釋凝膠、生理鹽水和凝膠空白基質對家兔皮膚均無刺激;涂抹1.5%甲醛溶液組對家兔皮膚平均刺激反應評分為6.00，說明1.5%甲醛溶液對家兔完整皮膚有強刺激性。

2.2 二氧化氯緩釋凝膠作用效果 涂抹二氧化氯緩釋凝膠和莫匹羅星軟膏的創傷面在用藥7 d后傷口均愈合，傷口平均愈合率為100%，且相同時間內涂抹二氧化氯緩釋凝膠的創傷面平均愈合率比涂抹莫匹羅星軟膏的創傷面平均愈合率高。而二氧化氯凝膠空白基質和陰性對照的創傷面7 d后傷口均未能完全愈合。涂抹二氧化氯緩釋凝膠的創傷面用藥5 min后傷口立即止血，止血效果遠遠優于莫匹羅星軟膏以及二氧化氯凝膠空白基質和陰性對照，實驗結果見表1和圖1。

3 討論

二氧化氯緩釋凝膠以卡波姆940與CMC-Na作為主要輔料基質，可能包裹二氧化氯分子，形成骨架型的緩釋制劑，在適宜的pH條件下緩慢釋放二氧化氯并發揮作用，達到殺菌消毒、保護受傷創面的目的。實驗過程中還發現，涂藥5 min后，二氧化氯緩釋凝膠能夠快速止血且止血效果遠遠優于其他三組。關于二氧化氯的快速止血作用目前尚未見報道，其止血機制有待于進一步深入的研究。

本文雖然僅對3只兔子做了開放性創面的藥效研究，但自制二氧化氯緩釋凝膠，用藥頻率低，一天只需一次，使用方便，具有保護創傷面、防止傷口感染、快速止血、愈合時間短等作用，療效滿意。需要注意的是涂擦次數不能過頻，否則傷口周圍很可能出現硬皮，這可能是由于二氧化氯本身的氧化性所致。本實驗結果及數據為臨床上開放性創面感染的治療及愈合提供了一種有效的途徑，具有一定的臨床實際應用價值。

表1 不同方法處理后創面平均愈合率 (n=3)Tab 1 The average rate of the wound healing after different treatments at different time points (n=3)

圖1 不同方法處理后創面愈合情況Fig 1 The results of wound healing after using different treatments at different time points

［1］ 楊雅瓊，王學民，朱洪濤，等.創傷后傷口感染病原菌監測及耐藥性分析［J］.國際檢驗醫學雜志，2007，28(12):1078－1010.

［2］ 徐紅云，薛云松，劉春林.創傷患者傷口感染的危險因素分析［J］.中國微生態學雜志，2003，15(5):300－302.

［3］ 吳安華，任南，文細毛，等.全國醫院感染監控網1998－1999年監測資料分析［J］.中華醫院感染學雜志，2000，10(6):401－403.

［4］ Edmond MB，Willace SE，McClish DK，et al.Nosocomial blood stream infections in United States hospital:a three-year analysis［J］.Clin Infect Dis，1999，29:239－244.

［5］ 王芳琴.抗生素的安全使用［J］.中國醫藥導報，2008，5(13):113－116.

［6］ 陳羽，齊秀蘭，劉明，等.二氧化氯消毒劑的殺菌效果［J］.沈陽藥科大學學報，2009，26(7):579－581.

［7］ 黃曉波，岳木生，彭明軍，等.二氧化氯消毒劑的亞急性毒性實驗［J］.中國消毒學雜志，2007，24(3):236－238.

［8］ Vogt PM，Lehnhardt M，Wagner D，et al.Determination of endogenous growth factors in human wound fluid.temporal presence and profiles of secretion［J］.Plast Reconstr Surg，1998，102:117－123.

［9］ 張連波，菅野葉美，館正弘.聚維酮碘軟膏對大鼠綠膿桿菌感染創面生物被膜形成影響的實驗研究［J］.中國實驗診斷學，2008，12(2):178－180.

［10］ 徐淑云，卞如濂，陳修.藥理實驗方法學［M］.2版.北京:人民衛生出版社，1991:207－209.

［11］ 劉華，高家治，柏連松.熏洗一號方對小鼠肛旁手術傷口愈合作用的研究［J］.中國中醫藥學刊，27(5):985－987.