張繼紅 康紹英
(湖南省食品質量監督檢測所,湖南 長沙 410002)
高效液相色譜法測定發芽米胚芽中的γ-氨基丁酸
張繼紅 康紹英
(湖南省食品質量監督檢測所,湖南 長沙 410002)
建立一種高靈敏度的鄰苯二甲醛(OPA)柱前衍生熒光檢測高效液相色譜法測定發芽米胚芽中γ-氨基丁酸(GABA)含量的方法。色譜柱為Shimadzu VP-ODS C18柱(250mm ×4.6mm,5μm),流動相:0.05mol/L 乙酸鈉∶甲醇=60∶40,熒光發射波長λex 338nm,激發波長λem 430nm。 方法的線性范圍為0.10~1.0μg/mL,檢出限為0.005μg/mL。日間和日內測定的精密度分別為1.36%和2.54%,加標回收率在98.5%~99.8%。該法簡便、快速、靈敏度高,可用于發芽米胚芽中GABA的質量控制。
鄰苯二甲醛;柱前衍生;高效液相色譜法;γ-氨基丁酸
γ-氨基丁酸(GABA)是一種非蛋白質類氨基酸,在醫學上是一種抑制性神經遞質,能夠促進大腦新陳代謝,對機體正常生理功能起著重要的調節作用。由于它對電化學和紫外、可見光的不靈敏性,導致用一些常規的直接測定法靈敏度較低,中國對其檢測方法的報道很少,偶見有用柱前衍生反相高效液相色譜法[1-3]和全自動氨基酸分析儀檢測[4]方法的報道。常用的衍生方法有DNS法(衍生劑為丹酰氯),FMOC法(衍生劑為氯甲酸芴甲酯),PITC法(衍生劑為異硫氰酸苯酯),CEOC法(衍生劑為咔唑-9-乙基氯甲酸酯)和OPA法(衍生劑為鄰苯二甲醛)等。前4種方法存在反應活性差、速度慢、靈敏度低、反應試劑干擾等缺點,而柱前衍生試劑OPA具有衍生步驟簡單、反應速度快、剩余試劑不干擾測定等優點,其應用最為廣泛。本試驗采用OPA為衍生試劑,測定發芽米胚芽中的γ-氨基丁酸的含量,優化分離條件。……