關于雞支原體病的研究

[摘要] 山東省高密市姜莊鎮(zhèn)鎮(zhèn)伊家長村伊文星所養(yǎng)肉雞出現(xiàn)了嚴重的慢性呼吸道疾病，其中2、3、6棚尤其嚴重。從患病雞只的外觀和剖檢癥狀推斷為支原體疾病，通過從病雞中分離病原微生物，進而進行分離培養(yǎng)和顯微鏡檢查，雞胚的接種、全血凝集實驗，最后確認為禽的支原體疾病。通過藥敏實驗，選擇了合適的藥物進行治療，有效的控制了疫情的發(fā)展和傳播，同時也加深了自己對雞的慢性呼吸道疾病的感性認識和理性認識。

[關鍵詞] 支原體疾病；藥敏實驗；抑菌直徑

一、病原

支原體是一種介于細菌和病毒之間的原核生物，在具有自體繁殖和合成自身大分子的微生物中，體積最小，結構也最簡單。支原體主要靠寄生生存，寄生于各種動物的體內(nèi)。雞的支原體主要有敗血支原體（Mycoplasmaga1lisepticum，MG）和滑液囊支原體（Mycoplasma synoviae，MS），另外還有其他致病力較低的支原體如火雞支原體、雛雞支原體和禽支原體等。雞支原體病的病原體是禽敗血霉形體，屬于霉形體目霉形體科霉形體屬的一個致病種。一般呈細小球桿狀或卵圓形，大小約為0.25～0.5um，姬姆薩染色著色良好，革蘭氏染色呈弱陰性。

二、流行病史

雞對本病易感，病雞和隱性感染雞是本病的傳染源，本病既可以垂直傳播又可以水平傳播。病原體可以通過雞咳嗽，噴嚏的飛沫和塵埃經(jīng)呼吸道傳染，被支原體污染的水，飼料，用具也能使本病有一個雞群傳至另一個雞群。垂直傳播可構成代代相傳，使本病在雞群中連續(xù)不斷的發(fā)生。本病在雞群中傳播較為緩慢，但在新發(fā)病的雞群中傳播較快。

三、臨床癥狀

病雞初期呈現(xiàn)精神不振，食欲減退或不食，腹瀉，鼻液增多，流漿液性鼻液，部分病雞鼻孔周圍和頸部羽毛沾污明顯，鼻孔堵塞，妨礙呼吸，頻頻搖頭或發(fā)出奇聲。如鼻甲骨或氣管粘膜發(fā)炎時，分泌液增多，呼吸困難，打噴嚏。嚴重時，病雞呼吸困難伸頸張口喘，呼吸是發(fā)出羅音，咳嗽。有時病初流淚，繼而眼瞼腫脹，眼瞼上下粘合，甚至失明。全身癥狀表現(xiàn)為體溫升高，生長發(fā)育遲緩，逐漸消瘦。

四、病理變化

單純感染敗血支原體的病例，可見輕度的鼻和眶下竇炎。自然感染的病例多為混合感染，可見到呼吸翻膜水腫，充血，肥厚，竇腔內(nèi)充滿粘液和干酪樣滲出物。早期氣囊輕度渾濁，外觀呈灰白色，水腫，表層有增生的結節(jié)狀病灶。病情嚴重時，氣囊增厚，囊腔內(nèi)含有大量干酪樣滲出物。眶下竇粘膜發(fā)炎，竇腔內(nèi)積有混濁粘液或干酪樣滲出物，眶下竇勤膜充血腫脹。病理組織學可見被侵害的組織的勃膜顯著增厚，有單核細胞浸潤。該病菌容易產(chǎn)生抗藥性，而且各地的血清型和流行情況不一樣，結合實踐，我們做了藥敏實驗。

五、實驗室診斷

1.病料：伊文星的患病雞

在無菌情況下，取有典型癥狀的雞只的支氣管中下部的滲出液，加液體培養(yǎng)基磨碎制成懸液，接種于液體培養(yǎng)基，放于27攝氏度的恒溫箱中培養(yǎng)5d。

2.鏡檢

將接種環(huán)在酒精燈上火焰消毒，然后粘取雞的呼吸道下部的滲出液體，均勻的涂抹在玻璃片上，待其自然干燥或在酒精燈上晃動使液體干燥，然后放于過濾盆的兩條玻璃棒上，用滴管吸取姬姆薩染色液滴于玻璃片上5min后，傾斜玻璃片倒掉姬姆薩染色液，再在玻璃片上滴上相同劑量的酒精，3min后，用生理鹽水沖洗掉殘留的染色液，沖洗干凈后，自然風干或用濾紙吸千水分，放于顯微鏡下觀察。

3.雞胚的接種

取病雞的呼吸道無細菌污染的滲出液經(jīng)卵黃囊接種于7日齡雞胚。接種在24h以內(nèi)死亡的雞胚為細菌感染死亡；如果是霉形體，在5～7d可以引起雞胚的死亡，可見到雞胚的呼吸道有干酪樣的滲出物，關節(jié)膿腫，肝和脾腫大，心包炎，或全身水腫和肝臟壞死等癥狀。多次繼代后，死亡更加有規(guī)律且病變更明顯。

4.藥敏學實驗

將紅霉素，強力霉素，鏈霉素，慶大霉素，氯霉素，丁胺卡那霉素，新霉素，環(huán)丙沙星，蔥諾沙星的注射液10倍稀釋，取直徑大約5mm的無菌濾紙片分別浸泡于上述溶液中，制成藥敏濾紙片，再將這些藥敏濾紙片分別置于有雞血清的瓊脂培養(yǎng)基中，放于37攝氏度的恒溫箱中培養(yǎng)24h。多次重復試驗，觀察抑菌直徑，選用合適藥物。判定標準：抑菌圈直徑6mm以下為不敏感，9mm為低敏感，10～15mm為中敏感，16mm以上為高敏感。

六、試驗結果

1.細菌的分離與培養(yǎng)

可見到菌落，典型的菌落呈圓形，微小，透明如露滴狀。在40倍光學顯微鏡下觀察時，表面光澤閃光，如玻璃珠樣，菌落中心常深埋于培養(yǎng)基中，呈致密的圓形的突起，周圍環(huán)繞以透明的Him邊，陳舊后中心突起部分變?yōu)榈S色乃至棕黃色。

2.顯徽鏡觀察

大部分呈球狀，但還有的呈絲狀，螺旋狀等不規(guī)則形態(tài)。小球狀是基本形態(tài)，直徑大約為125N250nm，姬姆薩染色良好呈淡紫色。血液滴入抗原中，如果藍紫色凝塊的為陽性；僅在液滴邊緣部分出現(xiàn)藍紫色帶，或超過２min僅在邊緣部分出現(xiàn)顆粒狀物，一可判為可疑；經(jīng)過2min液滴無變化的為癮性。

通過了解觀察雞支原體的高發(fā)時期一般為4～7周齡，此時雞生長發(fā)育很快，對營養(yǎng)的需求造成雞只的抵抗力有所下降，加之飼養(yǎng)環(huán)境不好，此時雞容易得病。在飼養(yǎng)過程中，天氣的變化，晝夜的溫度差異很大，另外雨天也是細菌和病毒長發(fā)的時期，這些都是造成雞支原體爆發(fā)的很重要的因素。實踐證明，支原體和大腸桿菌常常同時爆發(fā)，此時更容易造成雞只的死亡。結合對支原體的診斷和藥敏試驗，還有臨床的實踐，我們采用了強力霉素和環(huán)丙沙星飲水治療，同時加入了一些抗病毒的中藥。一個療程以后，雞只的死亡率明顯的下降，采食量增加，支原體和大腸桿菌得到了有效的控制。通過對支原體的臨床癥狀的觀察，還有細菌的分離培養(yǎng)鑒定，自己對雞的支原體病有了一個全面的認識，為以后的學習和工作奠定了基礎，同時對于藥物的選擇和應用也有了進一步的認識，對疫病的流行和傳播的控制有了更大的把握。