益生菌對肉仔鴨腸道結構的影響

摘要：選取１日齡櫻桃谷肉鴨２５０羽，隨機分成５組，每組５個重復，每重復１０羽。對照組飼喂基礎日糧，試驗組飼喂基礎日糧中添加０．０４％益生菌替代５０％抗生素試驗日糧。結果表明，替代５０％抗生素的地衣芽孢桿菌能顯著刺激十二指腸絨毛生長，提高腸道消化能力（Ｐ＜０．０１）；空腸結構中，絨毛高度／隱窩深度指數均顯著提高（Ｐ＜０．０５）；回腸結構中，其隱窩深度變淺，絨毛高度／隱窩深度指數顯著增高（Ｐ＜０．０１）。結果顯示，肉鴨日糧添加０．０４％益生菌替代５０％抗生素可提高小腸絨毛高度，降低隱窩深度，增加Ｖ／Ｃ值，改善腸道黏膜形態結構，促進肉鴨健康生產。

關鍵詞：益生菌；肉鴨；絨毛高度；隱窩深度

中圖分類號：Ｓ８１６．７文獻標識碼：Ａ文章編號：0439－８114（２０11）22－4670-03

Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｐｒｏｂｉｏｔｉｃｓ ｏｎ Ｉｎｔｅｓｔｉｎｅ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｉｎ Ｍｅａｔ Ｄｕｃｋｓ

ＷＵ Ｊｉｎ－ｅ１，ＣＨＡＮＧ Ｃｈａｏ１，ＷＡＮＧ Ｘｕｅ－ｄｏｎｇ１，ＷＡＮＧ Ｌｉｎｇ１，ＺＨＡＮＧ Ｊｉｎｇ－ｍｉｎｇ２

（１. Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， Ｗｕｈａｎ Ｐｏｌｙｔｅｃｈｎｉｃ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｗｕｈａｎ ４３００２３，Ｃｈｉｎａ；

２. Ｗｕｈａｎ Ｋｅｍｅｌ Ｂｉｏ－ｔｅｃｈ Ｃｏ．， Ｌｔｄ．， Ｗｕｈａｎ ４３００７４， Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｐｒｏｂｉｏｔｉｃｓ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ５０％ ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ ｏｎ ｉｎｔｅｓｔｉｎｅ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｉｎ ｍｅａｔ ｄｕｃｋｓ， ｔｗｏ ｈｕｎｄｒｅｄ ａｎｄ ｆｉｆｔｙ Ｃｈｅｒｒｙ Ｖａｌｌｅｙ ｍｅａｔ ｄｕｃｋｓ ｗｅｒｅ ｒａｎｄｏｍｌｙ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ｆｉｖｅ ｇｒｏｕｐｓ， ｅａｃｈ ｗｉｔｈ ｆｉｖｅ ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｔｅｎ Ｃｈｅｒｒｙ Ｖａｌｌｅｙ ｍｅａｔ ｄｕｃｋｓ． Ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ was ｆｅｄ with ｂａｓａｌ ｄｉｅｔ， ｗｈｉｌｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｇｒｏｕｐ ｗｅｒｅ ｆｅｄ with ｂａｓａｌ ｄｉｅｔ ａｄｄｅｄ ｗｉｔｈ ０．０４％ ｐｒｏｂｉｏｔｉｃｓ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ， ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ， ｉｎ ｔｈｅ ｄｕｏｄｅｎｕｍ， ｐｒｏｂｉｏｔｉｃｓ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ５０％ ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｓｔｉｍｕｌａｔｅｄ ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ ｔｈｅ ｄｕｏｄｅｎｕｍ ｄｏｗｎ， ｉｍｐｒｏｖｉｎｇ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ（Ｐ＜０．０１）； Iｎ ｔｈｅ ｊｅｊｕｎｕｍ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ， ｐｒｏｂｉｏｔｉｃｓ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ５０％ ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｖｉｌｌｏｕｓ ｈｅｉｇｈｔ ／ ｃｒｙｐｔ ｄｅｐｔｈ （Ｖ／Ｃ）（Ｐ＜０．０５）； Iｎ ｔｈｅ ｉｌｅａｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ， ｔｈｅ ｃｒｙｐｔ ｄｅｐｔｈ ｒｅｄｕｃｅｄ ， ｖｉｌｌｏｕｓ ｈｅｉｇｈｔ ／ ｃｒｙｐｔ ｄｅｐｔｈ（Ｖ／Ｃ） ｉｎｃｒｅａｓｅｄ（Ｐ＜０．０１）． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｐｒｏｂｉｏｔｉｃｓ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ５０％ ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ ｃｏｕｌｄ ｉｍｐｒｏｖｅ ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ ａｎｄ ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ ｃａｐａｃｉｔｙ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｐｒｏｂｉｏｔｉｃｓ； ｍｅａｔ ｄｕｃｋｓ； ｖｉｌｌｏｕｓ ｈｅｉｇｈｔ； ｃｒｙｐｔ ｄｅｐｔｈ

近年來，家禽的腸道健康已引起越來越多學者的高度重視。家禽腸道的結構狀況與自身的快速生長及抗病防病有重要的關系［１］，維持健康狀態或修復病理狀態下腸道結構和功能的完整性，保持腸道健康已成為家禽健康生產的關鍵所在［２］。微生態制劑兼有營養和藥用雙重功效，是較有發展前途的無毒副作用、無耐藥性、無殘留污染、無耐藥性的綠色生態型飼料添加劑產品［３］，它是根據動物微生態學原理，選用動物腸道正常微生物成員或具有調節和有益作用的外來菌經特殊工藝制成的活菌制劑［４］。眾多的試驗證明，微生態制劑能調整、維持腸道內正常微生物菌群平衡，減少腸道內氨、胺等毒害物質的產生，改善環境衛生，增強動物免疫功能，促進動物消化吸收，從而達到防病治病、提高飼料轉化率和動物生產性能［５，６］。從目前實際生產考慮，飼料中微生態制劑替代１００％抗生素，對于養殖業存在一定的風險。本試驗旨在研究添加枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌替代日糧中５０％抗生素對肉鴨腸道結構的改善作用，為微生態制劑替代５０％抗生素的制劑應于肉鴨生產提供理論依據。

１材料與方法

１．１試驗材料

枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌，混合芽孢菌組以枯草芽孢桿菌為主要菌種并包含少量地衣芽孢桿菌和乳酸桿菌等，產品活菌總數大于１．０×１０１０ ＣＦＵ/ｇ，以上菌種均由武漢科諾生物科技股份有限公司提供；試驗用１日齡櫻桃谷肉鴨由湖北春江鴨場提供。

１．２試驗動物及日糧組成

選取１日齡櫻桃谷肉鴨２５０羽，隨機分成５組，每組５個重復，每重復１０羽。試驗設計方案見表１，抗生素組為基礎日糧中添加４ ｍｇ/ｋｇ黃霉素，益生菌組中添加０．０４％益生菌和２ ｍｇ/ｋｇ黃霉素，即０．０４％益生菌替代５０％抗生素。試驗為期３５ ｄ，其中１～１４ ｄ為試驗前期，１５～３５ ｄ為試驗后期。各期基礎日糧配方見表２。

１．３飼養管理

試驗鴨于室內同一環境下散養。每個重復１欄，２４ ｈ光照，每天喂料２次，自由采食和飲水，以重復為單位每天記錄飼料投放量和剩余量，每天清洗飲水器和料槽１次。免疫接種及疾病預防、消毒按常規方法進行。

１．４樣品采集及測定

試驗選３６日齡各試驗組和空白組櫻桃谷肉鴨各６只，屠宰后分離腸段，用溫熱生理鹽水小心沖洗至無腸內容物后，取十二指腸、空腸、回腸中段約２ ｃｍ腸段用生理鹽水沖洗干凈，置于１０％福爾馬林溶液中固定；將固定好的腸段制作組織切片；選取３張絨毛完整，走向平直的組織切片，對比觀察腸黏膜和腸絨毛組織形態的變化，使用Ｎｉｋｏｎ熒光生物顯微鏡并應用愛普圖像處理分析軟件４．０測定每個視野中１０條最長絨毛長度及腸壁厚度。

１．５數據處理與分析數據

利用Ｅｘｃｅｌ進行數據整理，采用ＳＡＳ １７．０軟件中的平衡試驗設計方差分析過程進行數據統計分析，均值的多重比較采用Ｄｕｎｃａｎ’ｓ法，結果采用平均值±標準差表示。

２結果與分析

２．１益生菌對十二指腸組織形態的影響

由表３結果可知，3種替代５０％抗生素的益生菌組均能起到刺激十二指腸絨毛的生長的作用。與空白對照組相比，黃霉素組和3組替代５０％抗生素的益生菌組的絨毛長度分別增加５．６１％、９．６０％、５１．９８％（Ｐ＜０．０１）、１３．２４％（Ｐ＜０．０５）。其中地衣芽孢桿菌組的腸絨毛增加比率最大，與其他幾組差異極顯著，而隱窩深度未見明顯下降。地衣芽孢桿菌組絨毛長度／隱窩深度指數（V/C）比空白對照組增加１０．６２％，差異顯著，表明地衣芽孢桿菌組能改善十二指腸的作用，增加消化作用。由圖１可知，對于十二指腸絨毛，空白對照組十二指腸腸絨毛短小稀疏，排列不整齊，長度不均勻；地衣芽孢桿菌組的十二指腸腸絨毛排列整齊有序，皺褶增多。

２．２益生菌對肉鴨空腸結構的影響

由表４結果可知，在空腸部分，三組益生菌組在增加絨毛長度和降低隱窩深度方面并未表現明顯的變化，地衣芽孢桿菌組的絨毛長度／隱窩深度指數（V/C）最高，空腸的隱窩深度有變淺的趨勢。由圖２可知，對于空腸絨毛，抗生素組和空白對照組空腸腸絨毛則短小稀疏，排列不整齊，長度不均勻；地衣芽孢桿菌組的空腸腸絨毛粗壯且排列整齊有序，皺褶增多。

２．３益生菌對肉鴨回腸結構的影響

由表５可知，在回腸部分，3組益生菌作用于回腸，地衣芽孢桿菌組回腸絨毛長度較空白對照組增加３．３９％（Ｐ＜０．０５）。3組益生菌其隱窩深度均變淺，與對照組分別下降９．８９％（Ｐ＜０．０５）、５．８９％（Ｐ＜０．０５）、１０．８５％（Ｐ＜０．０５），絨毛長度／隱窩深度指數（V/C）增高，分別增加９．７８％、９．７８％、５．３８％。表明3種菌均具有改善回腸的消化吸收能力，表明回腸上皮細胞成熟率上升，吸收功能增強。由圖３可知，對于回腸絨毛，抗生素組和空白對照組回腸腸絨毛排列稀疏，長短不一；地衣芽孢桿菌組回腸絨毛粗壯且排列整齊、緊密，皺褶增多。

３小結與討論

小腸絨毛是營養物質吸收的主要組織，絨毛的長度與其腸上皮細胞數量呈顯著相關，絨毛短時，成熟的絨毛細胞減少，對養分的吸收能力降低。隱窩深度反映細胞生成率，隱窩變淺表明腸上皮細胞成熟率上升，吸收功能增強。絨毛長度／隱窩深度（Ｖ／Ｃ）則綜合反映小腸功能狀態，比值上升，則黏膜改善，消化吸收功能增強。本研究中，不同的益生菌與５０％抗生素組在改善腸壁結構方面表現出差異，地衣芽孢桿菌與５０％抗生素組在促進絨毛生長方面的聯合作用表現最佳，而在降低隱窩深度方面，混合益生菌組表現最佳；益生菌作用的腸段部位也表現出顯著的差異，3組試驗益生菌組能有效刺激十二指腸絨毛的增長，而促進上皮細胞成熟率方面即引起隱窩的深度變淺，則主要集中在回腸。對于空腸的作用效果，三組益生菌表現均不顯著。總體來講，添加益生菌試驗組腸道內的絨毛高度較高于對照組，尤其是地衣芽孢桿菌組絨毛長度／隱窩深度指數最高，說明添加益生菌能改善小腸功能，比值較對照組升高，則說明黏膜改善，消化吸收功能增強，具體的作用機制有待進一步研究。

參考文獻：

［１］ 王勉超，佘銳萍，肖發沂，等．絲蘭屬植物提取物對肉雞腸黏膜形態結構的影響［Ｊ］．飼料工業，２００７，２８（１１）：４３－４４．

［２］ 魏剛才，鄭素玲．家禽腸道黏膜的作用及保護［Ｊ］．中國家禽，２００７，２９（１１）：４７－４９．

［３］ 王進榮，儲衛華．微生態制劑在家禽疫病防治中的應用［Ｊ］．甘肅畜牧獸醫，２０００（６）：３６－３７．

［４］ 陳瓊，楊汝德．飼用微生物制劑的研究進展［Ｊ］．廣州食品工業科技，２００３，７７（Ｂ１１）：９８－１００．

［５］ 張敏，苗曉微，李福俊，等．益生素對肉雞腸道菌群及免疫器官指數的影響［Ｊ］．糧食與飼料工業，２００７（１１）：３５－３６．

［６］ ＤＵＮＳＦＯＲＤ Ｂ Ｒ， ＫＮＡＢＥ Ｄ Ａ， ＨＡＥＮＳＬＹ Ｗ Ｅ． Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｄｉｅｔａｒｙ ｓｏｙｂｅａｎ ｍｅａｌ ｏｎ ｔｈｅ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｉｃ ａｎａｔｏｍｙ ｏｆ ｔｈｅ ｓｍａｌｌ ｉｎｔｅｓｔｉｎｅ ｉｎ ｔｈｅ ｅａｒｌｙ－ｗｅａｎｅｄ ｐｉｇ ［Ｊ］． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｎｉｍａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９８９，６７：１８５５－１８６３．