氯蟲苯甲酰胺和甲維鹽對甘藍小菜蛾三種不同生測方法的研究

摘要：比較噴霧法、夾毒葉片法和點滴法用于測定氯蟲苯甲酰胺和甲維鹽對甘藍小菜蛾的室內生物活性的差異。結果表明，噴霧法操作簡便易行，但誤差較大；夾毒葉片法用藥量少、結果可信度高，但準備過程較長；點滴法對操作者要求較高，結果較為準確。氯蟲苯甲酰胺對小菜蛾的速效性不如甲維鹽，而持效性好于甲維鹽。

關鍵詞：氯蟲苯甲酰胺；甲維鹽；小菜蛾；生物測定

中圖分類號：Ｓ４３６．３；Ｓ４８２．３文獻標識碼：Ａ文章編號：0439－８114（２０11）22－4601-02

Three Bioassay Methods of Chlorantraniliprole and Emamectin Benzoate against Plutella xylostella on Cabbage

ＺＨＡＮＧ Ｓｈｕ，ＣＨＡＮＧ Ｘｉａｎｇ－ｑｉａｎ，Ｌｉａｎｇ，ＹＵＡＮ Ｂｉｎ，ＹＡＮＧ Ｘｉａｏ－ｌｉｎ

（Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｐｌａｎｔ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｓｏｉｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ， Hubei Academy of Agricultural Sciences，Ｗｕｈａｎ ４３００６４，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｂｉｏａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ ｃｈｌｏｒａｎｔｒａｎｉｌｉｐｒｏｌｅ ａｎｄ ｅｍａｍｅｃｔｉｎ ｂｅｎｚｏａｔｅ ｏｎ ３ ｒｄ ｌａｒｖａｅ ｏｆ Ｐｌｕｔｅｌｌａ ｘｙｌｏｓｔｅｌｌａ ｏｎ ｃａｂｂａｇｅ ｗｅｒｅ ｔｅｓｔｅｄ ｗｉｔｈ ｓｐｒａｙ， ｌｅａｆ ｓａｎｄｗｉｃｈ ａｎｄ ｔｏｐｉｃａｌ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｓｐｒａｙ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ｓｉｍｐｌｅ， ｂｕｔ ｔｈｅ ｅｒｒｏｒ ｗａｓ ｌａｒｇｅ． Ｔｈｅ ｌｅａｆ ｓａｎｄｗｉｃｈ ｍｅｔｈｏｄ ｎｅｅｄｅｄ ｌｅｓｓ ｐｅｓｔｉｃｉｄｅ， was ｗｉｔｈ ｈｉｇｈ ｒｅｌｉａｂｉｌｉｔｙ， ｂｕｔ also needed ａ ｌｏｎｇ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｓｓ． Ｔｈｅ ｔｏｐｉｃａｌ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ ｒｅｑｕｉｒｅｄ ａ ｈｉｇｈｅｒ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｆｏｒ ｔｈｅ ｏｐｅｒａｔｏｒ， ａｎｄ was ｗｉｔｈ ｍｏｒｅ ａｃｃｕｒａｔｅ ｒｅｓｕｌｔｓ． Ｔｈｅ ｑｕｉｃｋ ｂｉｏａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｃｈｌｏｒａｎｔｒａｎｉｌｉｐｒｏｌｅ ｗａｓ ｌｏｗｅｒ ｔｈａｎ ｅｍａｍｅｃｔｉｎ ｂｅｎｚｏａｔｅ， ｂｕｔ ｔｈｅ ｐｅｒｓｉｓｔ ｂｉｏａｃｔｉｖｉｔｙ ｗａｓ ｂｅｔｔｅｒ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｃｈｌｏｒａｎｔｒａｎｉｌｉｐｒｏｌｅ； ｅｍａｍｅｃｔｉｎ ｂｅｎｚｏａｔｅ； Ｐｌｕｔｅｌｌａ ｘｙｌｏｓｔｅｌｌａ； ｂｉｏａｓｓａｙ

小菜蛾（Ｐｌｕｔｅｌｌａ ｘｙｌｏｓｔｅｌｌａ）是十字花科蔬菜上的重要害蟲。自１９５３年Ａｎｋｅｒｓｍｉｔ［１］報道了小菜蛾對ＤＤＴ產生抗藥性后，在中國、菲律賓、馬來西亞、美國及日本等地相繼報道小菜蛾對多種藥劑產生抗藥性，其中包括有機磷類和擬除蟲菊酯類等傳統殺蟲劑［２，３］。氯蟲苯甲酰胺（Ｃｈｌｏｒａｎｔｒａｎｉｌｉｐｒｏｌｅ）是杜邦公司研制的新一代鄰甲酰氨基苯甲酰胺類殺蟲劑，它對鱗翅目菜蛾科害蟲有較好的防效，由于其全新的作用機理，使其成為害蟲抗性治理、輪換使用的較佳藥劑，目前在防治水稻害蟲上表現出了很好的效果。甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽即甲維鹽（Ｐｒｏｃｌａｉｍ），是以發酵產品阿維菌素Ｂ１合成的一種新型高效半合成抗生素殺蟲劑，它具有高效、低毒、無殘留、無公害等生物農藥的特點，是小菜蛾防治的常用藥劑?；诳紤]不同的生測方法技術路線不同，難易程度各異，可能對農藥合理科學的評價有一定程度的差異，氯蟲苯甲酰胺和甲維鹽能否從改善性能、克服抗藥性產生和降低成本的角度進行復配使用，借助于農作物重大病蟲草害防控湖北省重點實驗室平臺，開展了氯蟲苯甲酰胺和甲維鹽對甘藍小菜蛾３種不同生測方法的研究，為下一步進行共毒系數的測定工作奠定基礎。

１材料與方法

１．１試驗材料

１．１．１試驗藥劑 ２０％氯蟲苯甲酰胺ＳＣ，美國杜邦公司生產；２％甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽ＴＣ，廣西田園生化股份有限公司生產。

１．１．２試驗作物甘藍，品種為強力５０。

１．１．３供試昆蟲試驗用小菜蛾由湖北省農業科學院植保土肥研究所水稻病蟲研究室采用湖北省農業科學院南湖試驗基地田間的卵塊經室內用甘藍飼養、繁殖、純化所得。測試蟲態為３齡幼蟲，體重基本一致。恒溫培養室飼養，溫度（２５±１）℃，相對濕度７０％，光周期8 h／１６ h，光照度２ ０００ ｌｘ［４］。

１．１．4Ｐｏｔｔｅｒ噴霧塔由英國Ｂｕｒｋａｒｄ Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ 公司生產。筒身長６８．５ ｃｍ，筒上口直徑１５．５ ｃｍ，下口直徑１１．５ ｃｍ。最大承受壓力為２．０６８×１０５ Ｐａ，藥液管最大容量７ ｍＬ。

１．２生測方法

１．２．１夾毒葉片法［５，６］用直徑０．５ ｃｍ的打孔器打取葉碟，放入培養皿，注意保濕，用毛細管點滴器從低濃度開始，每葉碟點２ μＬ藥液，待溶劑揮發后和另一片涂有淀粉糊的葉碟對合制成夾毒葉碟，制作完畢放于組織培養板的孔內。每處理重復４次，每重復１０個夾毒葉碟，并設不含農藥但含有機溶劑及淀粉糊的處理作為對照。挑選大小一致的試蟲，組織培養板每個孔接１頭，置于符合所需飼養條件（下光照）的培養箱中培養。在試蟲取食完含藥葉碟后，在培養孔內加入清潔飼料飼養至調查結束，淘汰未食完一張完整葉碟的試蟲。處理后２４、４８ ｈ調查試蟲死亡情況（以毛筆輕觸不動計為死亡），記錄總蟲數和死蟲數，統計死亡率和校正死亡率，計算ＬＣ５０、相關系數ｒ、直線回歸方程。

１．２．２噴霧法試驗前將Ｐｏｔｔｅｒ噴霧塔壓力穩定在１．４７×１０５ Ｐａ，噴霧頭先用丙酮清洗２次，再用去離子水清洗２次。先將預先準備好的體重基本一致的小菜蛾３齡幼蟲１０頭分別置入９ ｃｍ培養皿中，放入微量噴霧塔底盤進行定量噴霧，噴液量１ ｍＬ，藥液沉降１ ｍｉｎ后取出試蟲，置于恒溫培養室內進行飼養，每一濃度重復４次，并設不含殺蟲劑（含有溶劑和乳化劑）的處理作為空白對照。每噴一個濃度前先以該濃度藥液試噴１次，借以洗滌噴頭，每一藥劑從低濃度至高濃度進行噴霧，將經藥劑處理后的試蟲接入有甘藍嫩葉的培養皿中，置于符合所需飼養條件（下光照）的培養箱中培養，處理后２４、４８ ｈ調查試蟲死亡情況（以毛筆輕觸不動記為死亡），記錄總蟲數和死蟲數，統計死亡率和校正死亡率，計算ＬＣ５０、相關系數ｒ、直線回歸方程。

１．２．３點滴法將甲維鹽原藥、氯蟲苯甲酰胺分別用丙酮為溶劑進行稀釋，再用去離子水稀釋成５個濃度梯度。用毛細管點滴器（０．０５ μＬ）從低濃度開始將藥液點滴于體重基本一致的小菜蛾３齡幼蟲的中胸背板上，以丙酮稀釋液為空白對照，每個濃度梯度設４重復，每一重復處理試蟲１０頭，將經藥劑處理后的試蟲接入有甘藍嫩葉的培養皿中，置于符合所需飼養條件（下光照）的培養箱中培養，處理后２４、４８ ｈ調查試蟲死亡情況（以毛筆輕觸不動記為死亡），記錄總蟲數和死蟲數，統計死亡率和校正死亡率，計算ＬＣ５０、相關系數ｒ、直線回歸方程。

２結果與分析

從表１和表２結果可以看出，藥后２４ ｈ，夾毒葉片法、噴霧法、點滴法３種生測方法測定的小菜蛾甲維鹽的ＬＣ５０分別為２．１１８ ２、４．０８５ ６、３．２３６ 0 μｇ／ｍＬ，氯蟲苯甲酰胺的ＬＣ５０分別為５．０２３ ４、７．４９０ ８、７．３８７ ２ μｇ／ｍＬ。藥后４８ ｈ，夾毒葉片法、噴霧法、點滴法３種生測方法測定的小菜蛾甲維鹽的ＬＣ５０分別為０．７３３ ６、１．９７９ ３、１．４２９ １ μｇ／ｍＬ，氯蟲苯甲酰胺的ＬＣ５０分別為０．５３８ ４、１．２０３ ８、０．８５０ ２ μｇ／ｍＬ。藥后４８ ｈ，３種生測方法ＬＣ５０從小到大的順序均為夾毒葉片法＜點滴法＜噴霧法，說明２種農藥采用夾毒葉片法對小菜蛾最敏感，點滴法次于夾毒葉片法而優于噴霧法，因此對于有效成分量少而具備胃毒作用的農藥而言，宜優先選用夾毒葉片法進行生物測定，但夾毒葉片法程序復雜、準備工作時間長。點滴法和噴霧法主要是針對有觸殺作用的農藥進行生測，２種方法比較而言，點滴法更準確，但操作必須熟練和細心，噴霧法雖然不如點滴法準確，但操作簡便。

３種生測方法結果均顯示出２４ ｈ甲維鹽ＬＣ５０低于氯蟲苯甲酰胺，４８ ｈ甲維鹽ＬＣ５０反而高于氯蟲苯甲酰胺。說明甲維鹽的速效性優于氯蟲苯甲酰胺，而持效性則以氯蟲苯甲酰胺較好。

３小結與討論

１）夾毒葉片法進行生物測定是基于藥劑對小菜蛾的胃毒作用，藥劑通過口器和消化道直接作用于消化系統，穿透腸壁，破壞器官和組織，擾亂其生理機能，導致靶標害蟲死亡，試驗用藥量少，結果較為精確，但準備工作程序復雜。噴霧法和點滴法是基于藥劑對小菜蛾的觸殺作用，藥劑通過蟲體表皮進入蟲體內使其中毒死亡，噴霧法操作簡便但噴灑范圍很大，其中大部分藥劑沒有噴灑到蟲體上，造成藥劑的浪費以及試驗精確度的下降，點滴法對試驗者操作技能要求較高，需要將藥劑精確點滴到小菜蛾３齡幼蟲的中胸背板上，不會造成藥劑的浪費，試驗的精確度高。

２）試驗結果表明，氯蟲苯甲酰胺對小菜蛾的速效性不如甲維鹽，而持效性好于甲維鹽。

３）氯蟲苯甲酰胺和甲維鹽均屬環境友好型低毒農藥，對小菜蛾均有較好的防治效果，二者復配不僅可以實現速效性和持效性的結合，還能克服小菜蛾抗藥性的產生，降低用藥成本。為了明確二者復配的最佳配比，下一步擬開展其共毒系數的測定工作。

參考文獻：

［１］ ＡＮＫＥＲＳＭＩＴ Ｇ Ｗ. ＤＤＴ-ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｉｎ Ｐｌｕｔｅｌｌａ ｍａｃｕｌｉｐｎｎｉｓ（Ｃｕｔｔｉｓ）（Ｌｅｐ．） ｉｎ Ｊａｖａ［Ｊ］． Ｂｕｌｌ Ｅｎｔｏｍｏｌ Ｒｅｓ，１９５３，４４：４２１－４２５．

［２］ 陳之浩，程羅根．小菜蛾抗藥性研究的現狀及展望［Ｊ］．昆蟲知識，２０００，３７（２）：１０３－１０７．

［３］ 閆艷春，喬傳令，錢傳范．小菜蛾抗藥性研究進展［Ｊ］．昆蟲知識，１９９７，３４（５）：３１０－３１４．

［４］ 徐金汗，黃志鵬，關雄，等．生物測定蟲種——小菜蛾的人工飼養及冷藏［Ｊ］．福建農業大學學報，１９９７，２６（２）：１８７－１９０．

［５］ 慕立義． 植物化學保護研究方法［Ｍ］． 北京： 中國農業出版社． １９９４．

［６］ 陳年春．農藥生物測定技術［Ｍ］．北京：北京農業大學出版社，１９９１．