毛頭鬼傘對鈣\\鐵\\鋅\\硒生物富集作用的研究

摘要：研究了毛頭鬼傘［Ｃｏｐｒｉｎｕｓ ｃｏｍａｔｕｓ（Ｍｕｅｌｌer eｘ Ｆｒ．）Ｓ．Ｆ． Ｇｒａｙ．］在基本培養基和加鹽培養基中，對礦質元素Ｃａ、Ｆｅ、Ｚｎ、Ｓｅ的生物富集作用。結果顯示，在基本培養基中添加Ｃａ、Ｆｅ、Ｚｎ、Ｓｅ無機鹽后，可以大幅度地提高毛頭鬼傘的生物富集效率；但加鹽后對菌絲體的生長有抑制作用。

關鍵詞：毛頭鬼傘；培養基；生物富集

中圖分類號：Ｓ６４６．１＋９；Ｑ９４５．１２文獻標識碼：Ａ文章編號：0439－８114（２０11）10－2026-03

Ｓｔｕｄｙ ｏｎ Ｂｉｏｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ Ａｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｃａｌｃｉｕｍ， Ｉｒｏｎ， Ｚｉｎｃ ａｎｄ Ｓｅｌｅｎｉｕｍ Ｉｏｎｓ ｂｙ

Ｃｏｐｒｉｎｕｓ ｃｏｍａｔｕｓ

ＣＨＥＮ Ｊｉｎ－ｚｈａｏ１，ＤＡＩ Ｘｕａｎ１，ＲＡＮ Ｍｉｎｇ－ｃａｉ２，ＴＡＮ Ｙｏｎｇ－ｚｈｏｎｇ１

（１．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， Ｙａｎｇｔｚｅ Ｎｏｒｍａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｆｕｌｉｎｇ ４０８１００， Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ， Ｃｈｉｎａ；

２． Pengshui No.1 Middle School， Ｐｅｎｇｓｈｕｉ ４０９６００， Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ， Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅ ｂｉｏｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ ａｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｃａ， Ｆｅ， Ｚｎ， Ｓｅ ｉｎ Ｃｏｐｒｉｎｕｓ ｃｏｍａｔｕｓ（Ｍｕｅｌｌer eｘ Ｆｒ．） Ｓ．Ｆ． Ｇｒａｙ. ｉｎ ｂａｓｉｃ ｍｅｄｉｕｍ ａｎｄ ｂａｓｉｃ ｍｅｄｉｕｍ ｗｉｔｈ ａｄｄｉｔｉｏｎａｌ ｓａｌｔ ｗａｓ ｓｔｕｄｉｅｄ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｂａｓｉｃ ｍｅｄｉｕｍ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄ ｗｉｔｈ Ｃａ， Ｆｅ， Ｚｎ， Ｓｅ ｓａｌｔ ｃｏｕｌｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｎｃｒｅａｓｅ ｔｈｅ ｂｉｏａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ ｏｆ Ｃ． ｃｏｍａｔｕｓ， ｂｕｔ ｔｈｅｙ ｈａｄ ｔｈｅ ｒｅｓｔｒａｉｎｅｄ ａｃｔｉｏｎ ｏｎ ｔｈｅ ｍｙｃｅｌｉｕｍ ｇｒｏｗｔｈ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｃｏｐｒｉｎｕｓ ｃｏｍａｔｕｓ （Ｍｕｅｌｌer eｘ Ｆｒ．） Ｓ．Ｆ． Ｇｒａｙ．； ｍｅｄｉｕｍ； ｂｉｏｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ

用生物技術提高食物營養素的含量，是當前強化食物營養的發展趨勢［１］。Ｃａ、Ｆｅ、Ｚｎ、Ｓｅ是人體不可缺少的礦質元素，當缺乏這些元素時，人就會發生各種疾病［２］。人體對食物中礦質元素的吸收量與其化學狀態有關，無機態礦質元素不易被人體吸收，并有一定的毒性；只有有機態的礦質元素才利于被人體吸收［３］。人體主要是通過食物獲得礦質元素，但是植物性食物中的Ｃａ、Ｆｅ、Ｚｎ、Ｓｅ含量與利用率都很低，而動物性食物的礦質元素攝取又受到消費水平低的限制。因此，開發新型富含生物有機態礦質元素食物的來源，增加人體獲得Ｃａ、Ｆｅ、Ｚｎ、Ｓｅ礦質元素的途徑將有著廣闊的前景。

毛頭鬼傘［Ｃｏｐｒｉｎｕｓ ｃｏｍａｔｕｓ（Ｍｕｅｌｌｅｒ ｅｘ Ｆｒ．） Ｓ． Ｆ． Ｇｒａｙ．］，別稱雞腿蘑，是一種優質的食用、藥用兼備的食用菌，其營養豐富，有益脾健胃、清心安神的功效，經常食用有助消化、增強食欲、治療痔瘡等作用［４］。它還是聯合國糧農組織和世界衛生組織推薦的集天然、營養、保健三種功能于一體的食用菌之一［５］。用毛頭鬼傘將無機態的Ｃａ、Ｆｅ、Ｚｎ、Ｓｅ礦質元素轉化成有機態的礦質元素，不僅可以除去由于添加這類強化劑對食物造成的不良影響，還可提高人體對Ｃａ、Ｆｅ、Ｚｎ、Ｓｅ的攝入量，并且能為更好地開發和利用毛頭鬼傘提供科學依據。

１材料與方法

１．１材料

１．１．１供試菌種２００８年４月，在重慶市涪陵區金山采集新鮮野生的毛頭鬼傘子實體，帶回實驗室分離菌絲體。

１．１．２Ｃａ、Ｆｅ、Ｚｎ、Ｓｅ 標準液的制備分別取１．４４２ ０ ｇ無水氯化鈣、２．１４７ ０ ｇ無水硫酸亞鐵和１．０６３ ０ ｇ無水氯化鋅，置于５００ ｍＬ容量瓶中，用０．５０％稀硝酸溶液定容，得到Ｃａ、Ｆｅ和Ｚｎ的標準儲備液１ ０００ μｇ／ｍＬ。取純硒（９９．９０％）０．１００ ０ ｇ 于１００ ｍＬ燒杯中，加入少量硝酸溶解，加過氯酸２．０ ｍＬ，置沸水浴中加熱４ ｈ。冷卻后加８．４ ｍＬ鹽酸，置沸水浴中加熱５ ｍｉｎ，轉移至１ ０００ ｍＬ容量瓶中，用稀釋劑定容，得到Ｓｅ標準儲備液１ ０００ μｇ／ｍＬ。

１．２方法

１．２．１液體菌種培養去皮馬鈴薯２００ ｇ，切成小塊，煮沸２５ ｍｉｎ、過濾、取汁，加葡萄糖２０ ｇ、ＭｇＳＯ４ １．０ ｇ、蛋白胨５ｇ、ＶＢ１ ０．０１０ ０ ｇ，定容至１ ０００ ｍＬ，將８０ ｍＬ培養基裝于２５０ ｍＬ三角瓶中，滅菌、接種毛頭鬼傘菌種。２５ ℃、１５０ ｒ／ｍｉｎ、培養７ ｄ，備用。

１．２．２培養基制備與培養①黃豆粉（基本）培養基，黃豆粉２５ ｇ加水煮沸２０ ｍｉｎ，過濾，加葡萄糖２２．５ ｇ，定容至１ ０００ ｍＬ。②黃豆粉加鹽培養基，在黃豆粉培養基中分別添加硫酸鈣、硫酸亞鐵、硫酸鋅，至濃度為０．０２０ ０％；添加亞硒酸鈉，至濃度為０．００１ ０％。③玉米粉（基本）培養基，玉米粉２５ ｇ加水煮沸２０ ｍｉｎ，過濾，加葡萄糖２２．５ ｇ，定容至

１ ０００ ｍＬ。④玉米粉加鹽培養基，在玉米粉培養基中分別添加硫酸鈣、硫酸亞鐵、硫酸鋅，至濃度為

０．０２０ ０％；添加亞硒酸鈉，至濃度為０．００１ ０％。將以上4種培養基各８０ ｍＬ分裝于２５０ ｍＬ三角瓶中、滅菌，接５ ｍＬ毛頭鬼傘液體菌種，每個處理重復３次。２５ ℃、１５０ ｒ／ｍｉｎ、培養７ ｄ。

１．２．３毛頭鬼傘菌絲體中礦質元素含量的測定Ｃａ、Ｆｅ、Ｚｎ用原子吸光光譜法測定，Ｓｅ用紫外－可見光分光光度法測定。Ｃａ、Ｆｅ、Ｚｎ標準曲線的繪制參照彭金年等［６］的方法進行，Ｓｅ標準曲線的繪制參照包敏等［７］的方法進行，用１ ｃｍ比色皿以空白試劑做參比，于波長５９６ ｎｍ處測定吸光度值，繪制標準曲線，以吸光度值Ａ對濃度Ｃ進行線性回歸。毛頭鬼傘菌絲體中Ｃａ、Ｆｅ、Ｚｎ含量的測定用Ｚ－５０００型火焰原子吸收分光光度計測定各菌絲體處理液的吸光度值，由線性方程求出Ｃａ、Ｆｅ、Ｚｎ的濃度［６］。菌絲體中Ｓｅ含量的測定參照包敏等［７］的方法進行，用１ ｃｍ比色皿以空白試劑做參比，于波長５９６ ｎｍ處測定吸光度值，由線性方程求出Ｓｅ的濃度。

２結果與分析

２．１標準曲線

由標準溶液的吸光度值，計算出礦質元素Ｃａ、Ｆｅ、Ｚｎ、Ｓｅ的線性回歸方程及相關系數，并繪制出標準曲線。在標準溶液濃度范圍內，各元素濃度Ｃ與Ａ值均呈良好的線性關系，線性回歸方程及相關系數見表１。

２．２培養基對毛頭鬼傘菌絲體富集礦質元素的影響

培養基對毛頭鬼傘菌絲體富集礦質元素的影響結果見表２。從表２可見，在黃豆粉培養基中，毛頭鬼傘菌絲體內的Ｆｅ含量比玉米粉培養基內Ｆｅ含量高３４．１６％，而黃豆粉培養基中Ｚｎ、Ｓｅ、Ｃａ的含量均低于玉米粉培養基中的含量，分別低了８．５６％、５．６８％和５．０１％。在黃豆粉加鹽培養基中，毛頭鬼傘菌絲體內的Ｃａ、Ｆｅ、Ｚｎ、Ｓｅ含量均顯著大于黃豆粉培養基中的含量，Ｃａ、Ｆｅ、Ｚｎ、Ｓｅ的含量分別增加了３．７６、３．９０、３．３２和４．０９倍。同樣，玉米粉加鹽培養基中菌絲體內的Ｃａ、Ｆｅ、Ｚｎ、Ｓｅ含量均大于玉米粉培養基中的含量，Ｃａ、Ｆｅ、Ｚｎ、Ｓｅ的含量分別增加了１．５４、１．２５、０．１４和１．４６倍。因此，在培養基中添加礦質元素無機鹽，有利于毛頭鬼傘菌絲體對Ｃａ、Ｆｅ、Ｚｎ、Ｓｅ的富集。

２．３培養基對毛頭鬼傘菌絲體生長的影響

測定結果顯示，在黃豆粉培養基、黃豆粉加鹽培養基、玉米粉培養基、玉米粉加鹽培養基等４種培養基中培養生長的毛頭鬼傘菌絲體濕重分別為０．５３６ １、０．２５８ ６、０．５４４ ２和０．３０２ ７ ｇ。從這個結果可見，黃豆粉培養基菌絲體濕重是黃豆粉加鹽培養基菌絲體濕重的２．０７倍，玉米粉培養基菌絲體濕重是玉米粉加鹽培養基菌絲體濕重的１．８０倍。說明隨著硫酸鈣、硫酸亞鐵、硫酸鋅和亞硒酸鈉加入培養基后，毛頭鬼傘菌絲體的產量在顯著下降。因此，在培養基中加入硫酸鈣、硫酸亞鐵、硫酸鋅和亞硒酸鈉后，不利于毛頭鬼傘菌絲體的生長。

３小結與討論

在不同培養基中，毛頭鬼傘菌絲體對Ｃａ、Ｆｅ、Ｚｎ、Ｓｅ的富集能力不同，即使在同一種培養基中，菌絲體對Ｃａ、Ｆｅ、Ｚｎ、Ｓｅ的富集能力也不相同。在培養基中加入硫酸鈣、硫酸亞鐵、硫酸鋅和亞硒酸鈉無機鹽后，可提高毛頭鬼傘菌絲體對Ｃａ、Ｆｅ、Ｚｎ、Ｓｅ的富集能力，但無機鹽的加入同時也抑制了毛頭鬼傘菌絲體的正常生長，這與徐爾尼等［２］對香菇和金針菇的生物富集作用研究結論相似。由于植物對環境中無機態礦質元素的生物富集能力與其生育期和環境中無機鹽濃度有關［８］，因此，毛頭鬼傘對Ｃａ、Ｆｅ、Ｚｎ、Ｓｅ的富集作用要應用于生產中去，還需進一步完善相關的技術方法。

參考文獻：

［１］ 鄭藝梅，葉華，華平． 黃豆發芽過程中鉻的生物富集效應的研究［Ｊ］． 食品工業科技， ２００５（６）：１０１－１０３．

［２］ 徐爾尼，劉文群，李曼，等． 食用菌對Ｆｅ、Ｚｎ、Ｓｅ生物富集作用的探討［Ｊ］． 食品科學， １９９９，１１（２０）：４４－４５．

［３］ 徐爾尼，劉文群，李曼，等． 真菌對微量元素鐵、鋅、硒生物富集作用的研究［Ｊ］． 環境與開發，２０００，１５（３）：３－４．

［４］ 余杰，崔鵬舉，陳美珍，等． 雞腿菇多糖的研究進展［Ｊ］． 安徽農學通報，２００７，１３（２０）：８４－８６．

［５］ 王惠國，關洪全，李忻紅． 毛頭鬼傘的生物活性作用［Ｊ］． 中國真菌學雜志，２００７，２（６）：３８２－３８４．

［６］ 彭金年，李銀保，程庚金生，等． 微波消解－火焰原子吸收光譜法測定皂莢中６種微量元素的含量［Ｊ］． 光譜實驗室，２００９，２６（４）：８５１－８５５．

［７］ 包敏，王通勝． 分光光度法測定微量硒的研究［Ｊ］． 化工礦物與加工，２００１，３０（１０）：１５－１７．

［８］ 吳永堯，彭振坤，陳建英，等． 水稻對環境硒的富集和耐受能力的研究［Ｊ］． 微量元素與健康研究，１９９９，４（１６）：４２－４４．

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