不同殺菌劑對柑橘瘡痂病菌的室內(nèi)毒力測定

摘要：為篩選出對柑橘瘡痂病病菌［痂圓孢菌（Ｓｐｈａｃｅｌｏｍａ ｆａｗｃｅｔｔｉ Ｊｅｎｋｉｎｓ）］高效、低毒、低殘留藥劑供生產(chǎn)上使用，采用生長速率法測定了９種殺菌劑對該菌的室內(nèi)毒力。結(jié)果表明，９種藥劑對柑橘痂圓孢菌菌絲生長的抑制效果不同，２５％咪酰胺ＥＣ和１０％苯醚甲環(huán)唑ＷＧ抑菌作用最強，其ＥＣ５０值分別為０．０２６ ７ μｇ／ｍＬ和０．０３６ ２ μｇ／ｍＬ；６０％唑醚·代森聯(lián)ＷＧ次之，其ＥＣ５０值為１．６１０ １ μｇ／ｍＬ，抑菌作用也較強；７５％代森錳鋅ＷＧ和３％中生菌素ＷＰ有較好抑菌活性，其ＥＣ５０值均小于４２ μｇ／ｍＬ；２５％嘧菌酯ＳＣ效果最差，ＥＣ５０值為８０ ２７４．９７０ １μｇ／ｍＬ。

關(guān)鍵詞：柑橘瘡痂病；殺菌劑；毒力測定

中圖分類號：S436.661；S482.2 文獻標識碼：Ａ 文章編號：0439－８114（２０11）09－1806-03

Ｔｏｘｉｃｉｔｙ Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ ｏｆ Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ Ｆｕｎｇｉｃｉｄｅｓ ｏｎ Ｃｉｔｒｕｓ Ｓｃａｂ Ｄｉｓｅａｓｅ

ＺＨＯＵ Ｘｉａｏ－ｙａｎ，ＪＩＡＮＧ Ｙｕ－ｌａｎ

（Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｇｕｉｚｈｏｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｇｕｉｙａｎｇ ５５００２５，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｓｃｒｅｅｎ ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ， ｌｏｗ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ａｎｄ ｌｏｗ ｒｅｓｉｄｕａｌ ｆｕｎｇｉｃｉｄｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ａｌｔｅｒｎａｎｔ ｕｓｅ ｉｎ ｃｉｔｒｕｓ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ， ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ ｏｆ ｎｉｎｅ fungｉｃｉｄｅｓ ｗｅｒｅ ｓｔｕｄｉｅｄ ｏｎ ｃｉｔｒｕｓ ｓｃａｂ ｄｉｓｅａｓｅ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ ｇｒｏｗｔｈ ｒａｔｅ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｎｉｎｅ fungｉｃｉｄｅｓ ｈａｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ ｍｙｃｅｌｉｕｍ ｇｒｏｗth ｏｆ Sphaceloma fawcetti． Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ２５％ Ｐｒｏｃｈｌｏｒａｚ ＥＣ ａｎｄ １０％ Ｄｉｆｅｎｏｃｏｎａｚｏｌｅ ＷＧ behaved ｂｅｓｔ， ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ＥＣ５０ ｗｅｒｅ ０．０２６ ７ μｇ／ｍＬ ａｎｄ ０．０３６ ２ μｇ／ｍＬ， ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅly； followed by ６０％ Ｐｙｒａｃｌｏｓｔｒｏｂｉｎ·Ｍｅｔｉｒａｍ ＷＧ ｗｈｏｓｅ ＥＣ５０ ｗａｓ １．６１０ １ μｇ／ｍＬ. Ｔｈｅ ＥＣ５０ ｏｆ ７５％ Ｍａｎｃｏｚｅｂ ＷＧ ａｎｄ ３％ Ｚｈｏｎｇｓｈｅｎｇｍｙｃｉｎ ＷＰ was both ｌｅｓｓ ｔｈａｎ ４２ μｇ／ｍＬ； ｗｈｉｌｅ ２５％ Ｃｈｌｏｒｏｎｉｔｒｏｐｒｏｐａｎｅ ＳＣ behaved ｗｏｒｓｔ， ａｎｄ ｉｔｓ ＥＣ５０ ｗａｓ ８０ ２７４．９７０ １ μｇ／ｍＬ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｃｉｔｒｕｓ ｓｃａｂ ｄｉｓｅａｓｅ； ｆｕｎｇｉｃｉｄｅ； ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ

柑橘是貴州的傳統(tǒng)栽培水果，其栽培歷史悠久，分布面積廣，種類、品種繁多［１］。柑橘瘡痂病是由柑橘痂圓孢菌（Ｓｐｈａｃｅｌｏｍａ ｆａｗｃｅｔｔｉ Ｊｅｎｋｉｎｓ）引起的一種真菌病害，是柑橘上的重要病害之一，在我國柑橘產(chǎn)區(qū)均有分布和危害，也是阻礙貴州柑橘產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展的重要病害，此病主要為害柑橘的葉、梢和果實，引起落葉和嫩梢生長不良，果實被害后容易脫落，不落的果實果形變小，品質(zhì)低劣，嚴重影響產(chǎn)量及其商品性［２，3］。特別是近幾年來，隨著山區(qū)農(nóng)業(yè)的開發(fā)，柑橘種植面積逐年擴大，瘡痂病也隨之加重。

如何有效控制瘡痂病的發(fā)生與危害，已成為當前柑橘種植業(yè)亟待解決的重要課題，而藥劑防治仍然是目前最有效的防治方法之一。因此，有必要加強高效、低毒、低殘留藥劑的篩選及使用技術(shù)研究。筆者就９種藥劑對柑橘痂圓孢菌的毒力進行了室內(nèi)試驗，現(xiàn)將試驗結(jié)果報道如下。

１材料與方法

１．１材料

１．１．１病原菌供試病原菌來源，分離自２００９年９月從貴州天柱縣采集的柑橘瘡痂病葉。

１．１．２供試藥劑供試藥劑和有效濃度詳見表１。

１．１．３培養(yǎng)基ＰＤＡ培養(yǎng)基和含藥培養(yǎng)基，自配。

１．２方法

１．２．１培養(yǎng)基配制

１）ＰＤＡ培養(yǎng)基。去皮馬鈴薯２００ ｇ，瓊脂２０ ｇ、葡萄糖１５ ｇ、水１ ０００ ｍＬ。

２）含藥培養(yǎng)基。將表１中不同藥劑分別用無菌水配制成所需各濃度的１０倍，然后以１∶９的體積比與ＰＤＡ培養(yǎng)基混合均勻即得系列濃度梯度的含藥培養(yǎng)基。

１．２．２病原菌的分離純化采用常規(guī)方法分離純化，經(jīng)鑒定病原菌為柑橘痂圓孢菌（Ｓｐｈａｃｅｌｏｍａ ｆａｗｃｅｔｔｉ Ｊｅｎｋｉｎｓ），屬半知菌亞門，黑盤孢目，痂圓孢屬［4］。

１．２．３測定無菌條件下將待測菌株接種在ＰＤＡ平板上于２５ ℃下培養(yǎng)。培養(yǎng)１０ ｄ后用內(nèi)徑為０．５ ｃｍ的打孔器在菌落上打取菌餅（選取菌落邊緣生長旺盛的菌絲），轉(zhuǎn)接到含有不同藥劑的ＰＤＡ平板上（帶菌絲的一面接觸培養(yǎng)基）。以不加藥劑而加入等量無菌水為對照（ＣＫ），每種藥劑設(shè)計５個濃度處理，每個處理設(shè)３次重復，在２５ ℃恒溫下培養(yǎng)６ ｄ。用十字交叉法測量菌落直徑，取平均值，計算抑制率。

抑制率＝［（對照菌落直徑－０．５ ｃｍ）－（處理菌落直徑－０．５ ｃｍ）］／（對照菌落直徑－０．５ ｃｍ）×１００％

以處理濃度（μｇ／ｍＬ）的對數(shù)值為橫坐標和相應抑制幾率值為縱坐標求出毒力回歸方程，并求出抑制中濃度（ＥＣ５０）及相關(guān)系數(shù)（ｒ）［5］，以上計算由ＤＰＳ軟件輔助完成［6］。

２結(jié)果與分析

２．１９種殺菌劑對柑橘痂圓孢菌的抑制作用

９種殺菌劑對柑橘痂圓孢菌菌絲的抑制作用測定結(jié)果（表２）表明，在各種藥劑設(shè)定的藥劑濃度范圍內(nèi)，菌絲的生長均受到不同程度的抑制。從抑制率大小看，隨著各種藥劑濃度的增加，抑制率也隨之增大，２５％咪酰胺ＥＣ的使用濃度從０．００５ μｇ／ｍＬ增至１．２８ μｇ／ｍＬ，抑制率相應由２５．９４％增至９６．６２％；１０％苯醚甲環(huán)唑ＷＧ的使用濃度從０．５ μｇ／ｍＬ增至３ ２００ μｇ／ｍＬ，其抑制率由５６．００％增至１００．００％。其他藥劑都存在同樣的情形，藥劑濃度與抑制作用呈正相關(guān)。

２．２９種殺菌劑對柑橘痂圓孢菌的毒力比較

從表３可知，９種供試藥劑的濃度與抑菌率的相關(guān)系數(shù)幾乎均達顯著水平，說明兩者間呈直線相關(guān)。ＥＣ５０值可用來比較殺菌劑對供試菌株的毒力強弱［7］。９種藥劑對柑橘痂圓孢菌菌絲生長的抑制效果不同，從藥劑間的ＥＣ５０值看，２５％咪酰胺ＥＣ的抑菌作用最強，其ＥＣ５０值為０．０２６ ７ μｇ／ｍＬ；１０％苯醚甲環(huán)唑ＷＧ次之，其ＥＣ５０值為０．０３６ ２ μｇ／ｍＬ；６０％唑醚·代森聯(lián)ＷＧ的ＥＣ５０值為１．６１０ １ μｇ／ｍＬ，其抑菌作用也較強；７５％代森錳鋅ＷＧ和３％中生菌素ＷＰ有較好抑菌活性，其ＥＣ５０值分別為３０．９０６ ８ μｇ／ｍＬ和４１．７５４ ４ μｇ／ｍＬ；７５％百菌清ＷＰ的ＥＣ５０值為２７９．５７６ １ μｇ／ｍＬ，抑菌活性一般；相比之下，５０％瘡炭煤煙凈ＷＰ、７０％代森聯(lián)ＷＰ和２５％嘧菌酯ＳＣ的抑菌活性較差，其ＥＣ５０值均大于２ ０００ μｇ／ｍＬ，尤以２５％嘧菌酯ＳＣ的抑菌作用最差，ＥＣ５０值為

８０ ２７４．９７０ １ μｇ／ｍＬ。

３小結(jié)與討論

室內(nèi)試驗結(jié)果表明，９種殺菌劑對柑橘瘡痂病菌（痂圓孢菌）菌絲的生長均有不同程度的抑制作用，從ＥＣ５０值看，不同殺菌劑的毒力大小依次為２５％咪酰胺ＥＣ＞１０％苯醚甲環(huán)唑ＷＧ＞６０％唑醚·代森聯(lián)ＷＧ＞７５％代森錳鋅ＷＧ＞３％中生菌素ＷＰ＞７５％百菌清ＷＰ＞５０％瘡炭煤煙凈ＷＰ＞７０％代森聯(lián)ＷＰ＞２５％嘧菌酯ＳＣ。其中，２５％咪酰胺ＥＣ和１０％苯醚甲環(huán)唑ＷＧ抑菌作用最強，６０％唑醚·代森聯(lián)ＷＧ次之，其抑菌作用也較強；７５％代森錳鋅ＷＧ和３％中生菌素ＷＰ有較好抑菌活性，其ＥＣ５０值均小于４２ μｇ／ｍＬ，而５０％瘡炭煤煙凈ＷＰ、７０％代森聯(lián)ＷＰ和２５％嘧菌酯ＳＣ室內(nèi)抑菌效果較差。目前，前５種藥劑對柑橘瘡痂病菌菌絲毒力較高，推廣使用價值大，可進一步對５種藥劑的大田防效進行試驗，最終明確當前柑橘瘡痂病的有效防治藥劑及使用濃度。

參考文獻：

［１］ 楊登華，侯天榮，覃世霞．貴州南部地區(qū)柑橘果樹自然資源及生產(chǎn)現(xiàn)狀調(diào)查［Ｊ］． 貴州農(nóng)業(yè)科學，２００８，３６（６）：１４９－１５１．

［２］ 孫華陽．柑橘生產(chǎn)技術(shù)大全［Ｍ］． 北京：農(nóng)業(yè)出版社，１９９０．

［3］ 陳翾，張宏梓，詹桂堯，等． 尤溪金柑主要病蟲害綜合防治技術(shù)［J］． 南方農(nóng)業(yè)，2010（1）：19-21．

［4］ 陸家云．植物病害診斷［Ｍ］．北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，１９９７．

［5］ 孫廣宇，宗兆鋒．植物病理學實驗技術(shù)［Ｍ］． 北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，２００２．２０６．

［6］ 唐啟義，馮明光．實用統(tǒng)計分析及其計算機處理平臺［Ｍ］． 北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，１９９７．１３５－１３９．

［7］ 凌金鋒，彭埃天，宋曉兵，等． １７種殺菌劑對貢柑炭疽菌的生物活性測定研究［Ｊ］． 廣東農(nóng)業(yè)科學，２０１０（１）：７２－７６．