【摘要】鴨蛋清含有豐富的氨基酸,是提取天然氨基酸的一個(gè)新穎途經(jīng)。在氨基酸生產(chǎn)的主要方法中,其中酶- 酸聯(lián)合水解法是目前生產(chǎn)氨基酸方法中較好的一種,所以利用酶- 酸聯(lián)合水解鴨蛋清提取氨基酸,具有可行性。同時(shí)利用雙酶- 酸酸水解鴨蛋清提取氨基酸的研究還未見(jiàn)報(bào)道,具有創(chuàng)新性,也顯示其廣泛的應(yīng)用前景。
1.前言
我國(guó)鴨蛋產(chǎn)量居世界首位,目前的鴨蛋加工仍舊以傳統(tǒng)加工為主,如加工皮蛋、雙黃咸蛋等, 但鴨蛋的利用未實(shí)現(xiàn)最大化。如何開(kāi)拓鴨蛋的利用渠道,正是我們思考的 問(wèn)題。 蛋清占全蛋重量的32%, 蛋清屬于單純蛋白質(zhì), 能溶于水和鹽溶液,加熱易凝固。蛋清的主要成分是水和蛋 白質(zhì)。其中: 水分: 86.2%, 蛋白質(zhì):12.3%,其余為脂肪、糖、礦物質(zhì)。而蛋白質(zhì)含有賴氨酸、組氨酸、精氨 酸等18 種氨基酸, 除脯氨酸為α- 亞氨基酸、甘氨酸不 含手性碳原子外, 其余氨基酸均為L(zhǎng)-α- 氨基酸 [2] 。每 100g 蛋清中含有芳香族氨基酸1281mg, 其中L- 苯丙氨酸 為711mg, L- 酪氨酸570mg [1] 兩種蛋白質(zhì)較多。鴨蛋清 蛋白質(zhì)中不僅所含必需氨基酸的種類齊全, 而且含量豐富, 是天然食物中最理想的優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì) [3] , 同時(shí)它也是提取天 然氨基酸的主要來(lái)源。 多肽和蛋白質(zhì)都是由氨基酸通過(guò)酰胺鍵連接而成的大分子化合物, 而目前氨基酸的生產(chǎn)方法主要有合成法、發(fā)酵法以及水解法。
2.氨基酸的主要生產(chǎn)方法
2.1 合成法
合成法主要有化學(xué)合成, 基因工程生產(chǎn), 酶催化合成 三種方法。合成法雖然可以按照人的意愿合成氨基酸, 但成本太高、副反應(yīng)多以及殘留化合物等問(wèn)題制約著其發(fā) 展 [4] 。
2.2 發(fā)酵法
微生物發(fā)酵法, 包括微生物直接發(fā)酵生產(chǎn)氨基酸物質(zhì), 以及發(fā)酵產(chǎn)生某種特異性的酶產(chǎn)品而間接完成氨基酸物質(zhì)的生產(chǎn)。早在1957 年, 日本就率先用微生物發(fā)酵法生產(chǎn)味 精, 我國(guó)是1964 年用該法投產(chǎn)的 [5)] 。但是由于發(fā)酵菌種類 單一, 得到的是單一品種的L-氨基酸, 且?jiàn)A雜其他氨基酸的 種類和含量較少。發(fā)酵液經(jīng)過(guò)預(yù)處理、離心或過(guò)濾除去菌體后, 可對(duì)其進(jìn)行初步的提取,而若想得到高純度的氨基酸,還需進(jìn)一步的精制提純?nèi)绯瑸V、結(jié)晶, 工序較多且繁瑣。
2.3 蛋白質(zhì)水解法
目前現(xiàn)代意義上的蛋白質(zhì)水解是指以蛋白質(zhì)為底物,利用酸、堿、酶的作用使蛋白質(zhì)完全或部分水解的過(guò)程。
(1) 堿水解和酸水解
蛋白質(zhì)水解最早采用的是堿法或酸法, 至少已有約100 多年的歷史, 這兩種方法簡(jiǎn)單, 容易操作, 通常發(fā)生的是 完全水解。張國(guó)治 [6)] 利用堿法水解大豆蛋白, 進(jìn)行了制 備新型調(diào)味料的研究。但在水解過(guò)程中多數(shù)氨基酸遭到不 同程度的破壞, 產(chǎn)生氨氣, 而且可以引起蛋白質(zhì)的氨基酸 發(fā)生消旋, 得到DL- 氨基酸的混合物。 蛋白質(zhì)酸水解, 常用鹽酸或硫酸在105-110℃反應(yīng)20 小時(shí)作用進(jìn)行水解。田桂萍 [7)] 等人, 做過(guò)采用鹽酸酸水 解蠶蛹來(lái)生產(chǎn)復(fù)合氨基酸營(yíng)養(yǎng)物的研究。酸水解的優(yōu)點(diǎn)是 不引起消旋化, 仍得到L- 氨基酸; 缺點(diǎn)是色氨酸被沸酸完 全破壞 [8)] , 含有羥基的氨基酸如絲氨酸或蘇氨酸有一小部 分被分解, 同時(shí)天冬酰胺和谷氨的側(cè)鏈酰胺也會(huì)被水解成 了羧基, 并且反應(yīng)條件劇烈, 對(duì)設(shè)備要求高, 對(duì)環(huán)境污染 嚴(yán)重 [9)] 。
(2) 酶水解
人類利用蛋白酶水解蛋白質(zhì)生產(chǎn)食品和調(diào)味料已有悠 久歷史, 像日本的納豆、中國(guó)的豆腐乳以及印度尼西亞的 丹貝等制品都是人們利用微生物蛋白水解豆類蛋白質(zhì)生產(chǎn) 的食品。酶水解蛋白質(zhì)在溫和的條件下進(jìn)行, 從而避免了 在激烈條件下產(chǎn)生的副反應(yīng)。這樣既不破壞氨基酸, 也不 發(fā)生消旋作用, 其蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物的氨基酸和起初蛋白質(zhì) 相近, 因此日益受到了重視。國(guó)內(nèi)關(guān)于食用蛋白水解的研 究報(bào)道自20 世紀(jì)90 年代開(kāi)始出現(xiàn), 主要的原料蛋白為乳 清、大豆、酪蛋白、蠶蛹蛋白、魚(yú)蛋白及動(dòng)物血清蛋白等 [10)] 。如周愛(ài)梅 [11)] 、房新平 [12)] 等人嘗試用單酶水解動(dòng)物 蛋白, 宋蓮軍等人 [13)] 進(jìn)行了蠶蛹蛋白雙酶水解工藝條件 研究, 朱蓓薇等人 [14)] 進(jìn)行了雙酶水解羊胎盤(pán)的實(shí)驗(yàn)研究, Miche)Linder [15)] 等人將小牛骨骼進(jìn)行酶性水解成功回收了小牛骨蛋白, Benjakul [16)] 分別用中性和堿性蛋白酶水解牙鱈的廢棄物。國(guó)外以酪蛋白、乳清、血清、大豆、玉米、 大米、小麥、水產(chǎn)品等為原料的蛋白質(zhì)水解物類產(chǎn)品都已 正在研制或已經(jīng)成功上市。
(3) 酶- 酸聯(lián)合水解
酶- 酸水解具有酸法或酶法水解之長(zhǎng), 補(bǔ)其短的優(yōu)越性, 因?yàn)榈鞍踪|(zhì)先經(jīng)酶解后, 所生成的肽片已大大減少, 削弱了其側(cè)鏈基團(tuán)對(duì)肽的屏蔽保護(hù)作用, 減少了他們之間的阻擋效應(yīng), 因而可用較稀的酸或較少時(shí)間進(jìn)行水解, 且水解徹底。由于所用的酸濃度較低或酸水解時(shí)間較少, 這 樣酸水解對(duì)氨基酸破壞就大為降低, 能夠保留水解產(chǎn)物的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。黎星樹(shù)和鄺光榮 [17)] 做了植物蛋白酶—無(wú)機(jī)酸聯(lián)合水解畜血實(shí)驗(yàn), 還有于淑娟等 [18)][19))] 人也嘗試了酶酸 水解實(shí)驗(yàn), 結(jié)果都表明聯(lián)合水解比單酶水解或酸水解優(yōu)越, 水解率高, 反應(yīng)溫和, 水解徹底。
3.結(jié)語(yǔ)
綜上所述, 目前國(guó)內(nèi)外生產(chǎn)氨基酸方法主要有合成法、 發(fā)酵法、堿水解、酸水解和酶水解, 而水解法利用合成法 和發(fā)酵法之長(zhǎng), 應(yīng)用較廣泛。其中水解法生產(chǎn)氨基酸的原 料通常采用植物蛋白、水產(chǎn)物、動(dòng)物角蛋白和血清等, 而 關(guān)于鴨蛋清蛋白水解的研究很少。但采用雙酶—酸水解提 取氨基酸卻未見(jiàn)報(bào)道。蛋清蛋白解離成氨基酸主要有兩個(gè) 階段, 一是溶解階段, 二是水解階段。所謂的溶解就是切 斷維系蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)的鍵, 使之變成多肽片段, 而水解 是使多肽降為游離的氨基酸。 所以, 采用鴨蛋清雙酶-酸水解提取氨基酸是具有創(chuàng) 新性和可行性, 同時(shí)鴨蛋清含有豐富的天然氨基酸, 其中 含有我國(guó)缺口較大的L- 苯丙氨酸的含量較多, 利用鴨蛋清 提取L- 苯丙氨酸, 一是可擴(kuò)大鴨蛋的加工利用空間; 二是 可解決我國(guó)L- 苯丙氨酸不足, 為醫(yī)藥、食品加工等行業(yè)補(bǔ) 充豐富的天然氨基酸; 三是鴨蛋清的氨基酸營(yíng)養(yǎng)豐富, 市 場(chǎng)前景廣闊。
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