加味當歸四逆湯防治骨性關(guān)節(jié)炎機制的研究

摘 要 目的：觀察加味當歸四逆湯對骨性關(guān)節(jié)炎兔血清酸性磷酸酶、堿性磷酸酶、SOD和NO含量的影響，討論其作用的可能機制。方法：健康新西蘭兔40只，隨機分成4組，每組10只，隨機選取其中3 組進行骨性關(guān)節(jié)炎造模，剩余1 組作為正常組不進行造模。造模成功后給藥4周，實驗結(jié)束后測血清酸性磷酸酶、堿性磷酸酶、SOD和NO含量。結(jié)果：與模型組比，加味當歸四逆湯組兔血清酸性磷酸酶、堿性磷酸酶活性明顯改善，SOD活性顯著提高，NO含量顯著下降。結(jié)論：加味當歸四逆湯能顯著改善兔血清酸性磷酸酶、堿性磷酸酶活性，提高SOD活性，降低NO含量，這可能是其防治骨性關(guān)節(jié)炎的作用機制之一。

關(guān)鍵詞 骨性關(guān)節(jié)炎 加味當歸四逆湯 機制

本實驗旨在探討該中藥在治療膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎的作用機制。

資料與方法

藥物：加味當歸四逆湯；壯骨關(guān)節(jié)丸；木瓜蛋白酶（Sigma）由上海生工生物工程有限公司提供；SOD、NO檢測試劑盒；其余試劑均為AR級以上的產(chǎn)品。動物：新西蘭大白兔40只，普通級10～12月齡，體質(zhì)量2.0～2.5kg，雌雄各半，由廣東省醫(yī)學實驗動物中心提供，實驗動物質(zhì)量合格證號：SCXK（粵）2008-0002。動物飼料由廣東省醫(yī)學實驗動物中心提供。

儀器：UV-754分光光度計，電子全自動稱重儀，日立7060全自動生化分析儀。

實驗方法：建立木瓜蛋白酶致骨性關(guān)節(jié)炎的動物模型：健康新西蘭兔40只，隨機分成4組，每組10只，隨機選取其中3 組進行骨性關(guān)節(jié)炎造模，剩余1組作為正常組不進行造模。將需要造模的動物左膝關(guān)節(jié)周圍剃毛，用30mg/kg的戊巴比妥鈉進行耳緣靜脈注射麻醉。麻醉生效后酒精消毒左膝關(guān)節(jié)，經(jīng)膝關(guān)節(jié)正中進針，通過髕上韌帶注射4%木瓜蛋白酶蒸餾水0.3ml入關(guān)節(jié)腔，隔2天1次，分別于第1天、第4天、第7天進行4%木瓜蛋白酶蒸餾水關(guān)節(jié)內(nèi)注射，術(shù)后每天肌肉注射青霉素40萬U，傷口換藥，連續(xù)7天，預(yù)防感染，1周后造模完成。將造模成功的動物隨機分為加味當歸四逆湯組、壯骨關(guān)節(jié)丸組、模型組，加上對照組共4組，每組10只。

給藥：造模成功后治療組給予相應(yīng)的藥物（加味當歸四逆湯4g生藥量/kg體重，壯骨關(guān)節(jié)丸0.8g/kg體重），對照組和模型組給予等體積生理鹽水，灌胃給藥，連續(xù)4周。

實驗動物血液指標測定：4周后，在兔耳中動脈取血3ml，靜置2小時，3500轉(zhuǎn)/分離心15分鐘，取動物血清測定酸性磷酸酶、堿性磷酸酶及SOD、NO含量。

結(jié) 果

加味當歸四逆湯對OA動物血清酸、堿性磷酸酶和SOD、NO含量的影響，見表1。

討 論

本實驗中，模型組家兔血清中SOD活性較對照組明顯下降，NO含量顯著升高，說明造模是成功的。膝骨性關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)軟骨細胞分泌NO增加，而增加的NO可抑制IL-1的產(chǎn)生，引起軟骨的破壞。同時NO還可以增加COX-2的活性導(dǎo)致PGE2合成增加，參與介導(dǎo)滑膜炎癥形成^［1］。本實驗結(jié)果顯示加味當歸四逆湯組血清中SOD活性均較模型組顯著升高，NO含量下降，酸性磷酸酶堿性磷酸酶活性改善，說明加味當歸四逆湯可能是通過提高血清中SOD活性，降低NO含量及改善酸性磷酸酶和堿性磷酸酶活性來防治0A發(fā)生發(fā)展的。

參考文獻

1 李憶農(nóng).細胞因子與骨關(guān)節(jié)炎［J］.中華風濕病雜志，2000，2（1）:57.

表1 加味當歸四逆湯對OA動物血清酸、堿性磷酸酶和SOD、NO含量的影響

注：與對照組比，^{△>/sup>P＜0.05，△△P＜0.01；與模型組比，＃>/sup>P＜0.05，＃＃P＜0.01。}