臨床診斷為手足口病病例的病原分析326例

摘 要 目的：分析臨床診斷為手足口病的住院患兒的病原分型，為手足口病提供實驗室結果佐證，以及為手足口病的臨床治療和預防提供科學依據。方法：通過RT-PCR的方法對醫院診斷為手足口病的住院患兒采咽拭子標本進行鑒定分型。結果：326例患兒標本中250例為腸道病毒陽性，其中腸道病毒71型（EV71）201例、柯薩奇A16（CA16）16例、33例未分型；陽性標本中男168例，女82例；年齡段分布為0～1歲62例，1～2歲88例，2～3歲72例，>3歲28例；年齡1個月～6歲，以3歲以下男孩居多；另76例為陰性標本，與臨床診斷不符。結論：臨床診斷為手足口病的住院患兒的主要病原為EV71，EV71的檢測可以為臨床診斷和治療手足口病提供參考和依據。實驗室診斷陽性病例以男孩居多。

關鍵詞 EV71 CA16 手足口病 腸道病毒

手足口病多發生于5歲以下兒童，可引起手、足、口腔等部位的皰疹，少數患兒可引起心肌炎、肺水腫、無菌性腦膜炎等并發癥。引發手足口病的腸道病毒有20多種，其中以EV71型和CA16型最為常見。對臨床診斷為手足口病住院的326例患兒進行了RT-PCR檢測，探討其病原分型，為臨床診斷治療和預防手足口病提供參考。

資料與方法

一般資料：收治手足口病并伴有發熱患兒326例。

儀器及試劑：7300real-time PCR儀，手足口熒光檢測試劑盒。

方法：采集住院患兒的咽拭子放入病毒保存液中，提取RNA，按試劑說明書配制25ul的反應體系，進行RT-PCR擴增，擴增程序：40℃ 25分鐘，1個循環；94℃ 3分鐘，1個循環；93℃ 15秒→55℃ 45秒，40個循環。循環結束后判定結果，檢測樣本無典型S擴增曲線或Ct值＞35，則判樣本為陰性；檢測樣本呈典型S擴增曲線或Ct值≤35，則判樣本為陽性。

質量控制：每次實驗需全程注意防止污染，在進行擴增時需設陰性、陽性、空白對照。

結 果

326例臨床診斷病例中有250例實驗室確診病例，實驗室確診病例達76.7%。陽性標本中病原基因分型以EV71為主（80.0%），男孩居多（67.2%），見表1、2。

表1 250例陽性標本性別統計

表2 250例陽性標本基因分型統計

250例陽性標本中以3歲以下居多，見表3。

表3 250例陽性標本不同年齡段統計

討 論

EV71是引起HFMD重癥病例的主要原因，EV71具有嗜神經性，臨床易并發無菌性腦膜炎，在研究的326例臨床診斷病例中有201例是EV71陽性，這些病例臨床治療中應引起醫生的高度重視。

檢測中有1例只有1月齡的EV71陽性標本，其接觸人員和食品來源的范圍都比較窄，臺灣曾報道嬰幼兒密切接觸的家長有陽性攜帶，由于沒有給患兒家長及其接觸的食品采樣，不能判斷出傳染源。

早期發現的手足口的病原體主要為CA16型，1969年EV71在美國被首次確認。此后EV71和CA16感染交替出現，成為手足口病的主要病原體，我們的研究發現HFMD的主要病原為EV71，在250例陽性病例中有33例EV未分型型，占陽性比例的13.2%，由于沒有分離培養、測序，不能進行基因分型，這例病例應引起重視。

易感人群人對腸道病毒普遍易感，受感后可獲得免疫力，手足口病患者主要為學齡前兒童，尤以≤3歲年齡組發病率最高，檢測結果顯示HFMD好發于3歲以下男孩。與之報道結果相符，同時病毒各血清型之間無交叉免疫。因此預防的重中之重人群應是3歲以下男孩。