CyclinD1和P21在肥大乳房腺體組織中的表達及意義

[摘要]目的：探討肥大乳房中CyclinD1和P21的表達級意義。方法：采用免疫組化SP法，分別測定了34例腺性肥大乳房和30例正常體積乳房腺體中CyclinD1和P21的表達。結果：CyclinD1在34例肥大乳房中，陽性18例，陽性率52.94%；30例正常對照組中，全部表達陰性，陽性率0，兩組間比較具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。P21在34例肥大乳房中，3例陽性，陽性率8.82%；正常對照組30例，陽性9例，陽性率30.00%。兩組間比較具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。結論：乳房肥大的形成可能與CyclinD1增多和P21減少有關。

[關鍵詞]CyclinD1;P21;乳房肥大

[中圖分類號]R730.45[文獻標識碼]A[文章編號]1008-6455（2011）10-1556-02

Expression of CyclinD1 and P21 in the mammary gland of the hypertrophic breast and their significance

JIN Jun-hua，ZHANG Rui-rui，WANG Qi，XIE Qun，LIU Dan-dan，HUI Zu-yan，HU Qiang

(Department of Plastic Surgery，the Central Hospital of Xiangyang，Xiangyang 441021，Hubei，China)

AbstractObjectiveTo detect the expression of CyclinD1 and P21 in the mammary gland of the hypertrophic breast and the normal voluminal breast，so that their function and significance in the pathogenesis of breast hypertrophy can be investigated.MethodsThe breast tissue samples were obtained， including hypertrophic breast tissue(34 cases) and normal voluminal breast tissue(30 cases).They were detected by the SP method immunohistochemistry for the expression of CyclinD1 and P21.ResultsThe positive expression rate of CyclinD1 in the hypertrophic breast was 52.94％(18 of 34)，while 0 in the normal voluminal breast(0 of 30)，showing a significant difference between the two groups（P<0.05）. The positive expression rates of P21 in the hypertrophic breast and normal voluminal breast were 8.82％(3 of 34) and 30.00％(9 of 30)， showing a significant difference between the two groups（P<0.05）. ConclusionThe development of hypertrophic breast may be related to the excessive expression of CyclinD1and decreased expression of P21 in the breast tissue.

Key words: CyclinD1;P21; hypertrophic breast

乳房肥大是一種常見的良性增生性病變，其主要表現(xiàn)為乳房體積過度增大，常給患者帶來身心困擾。其確切的發(fā)病機制目前尚不明確，本課題通過免疫組化的方法，檢測了34例腺性肥大乳房和30例正常體積乳房腺體中CyclinD1和P21的表達，并對結果進行統(tǒng)計學分析，旨在探討CyclinD1和P21在乳房肥大癥發(fā)病機制中的作用。

1材料和方法

1.1材料

1.1.1標本：實驗組選自2007年7月～2011年6月就診于我科的肥大乳房患者34例，同期收治的因單純?nèi)榉肯麓剐腥榉繎业豕潭ㄐg的患者30例作為對照組。其中肥大乳房患者單側乳房體積均在600g以上，對照組乳房體積在250～350g。實驗組年齡18～45歲，平均年齡28.33歲；對照組年齡26～46歲，平均年齡31.21歲。兩組間年齡經(jīng)統(tǒng)計學分析無統(tǒng)計學意義（采用兩樣本t檢驗，P＞0.05）。

1.1.2試劑：一抗為鼠抗人P21， CyclinD1單克隆抗體，購自美國Santa Cruz公司；SABC免疫組化試劑盒，購自美國New Mark公司。

1.2方法

1.2.1 實驗方法：標本經(jīng)4%的福爾馬林固定，石蠟包埋，連續(xù)4μm切片，每例標本切片4張，一張備用，另外3張分別行HE染色、免疫組化CyclinD1和p21染色用。閱片采用雙盲法，以細胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性，隨機選擇5個高倍鏡視野，以陽性細胞率＞10%為陽性。

1.2.2 統(tǒng)計學處理：采用SPSS13.0軟件進行統(tǒng)計學分析，組間比較采用χ2檢驗，檢驗水準取α=0.05。

2結果

2.1 CyclinD1蛋白主要表達于細胞核中，表現(xiàn)為黃色或棕黃色顆粒。34例肥大乳房中，陽性18例，陽性率52.94%；30例正常對照組中，全部表達陰性，陽性率0。兩組間比較χ2=23.78，P＜0.05，差異有統(tǒng)計學意義（見表1及圖1、2）。P21蛋白亦表達于細胞核中，表現(xiàn)為淡黃色至棕黃色顆粒，34例肥大乳房中，3例陽性，陽性率8.82%；正常對照組30例，陽性9例，陽性率30.00%。兩組間統(tǒng)計學比較χ2=4.69，P＜0.05，差異有統(tǒng)計學意義（見表2及圖3、4）。

3討論

乳房的過度發(fā)育使乳房的體積過度增大，形成乳房肥大癥，俗稱巨乳癥。過去的研究顯示乳房肥大可能是一個多因素導致的疾病，可能與多種刺激細胞增殖的因素相關。有研究顯示同雌激素及其受體存在密切關系[1]，但也有研究顯示同表皮生長因子[2]存在關系。

CyclinD1是真核細胞中控制細胞周期由G1期進入S期的一個重要的細胞周期調(diào)節(jié)蛋白，分子量為36KD，其作用機理為：雌激素、生長因子等刺激細胞使CyclinD1表達增加，然后與CDK4/6結合，形成CD/CDK復合體，促進下游蛋白磷酸化，磷酸化的蛋白調(diào)控轉錄因子2表達，進而促進多種基因表達，如編碼CDK1和CyclinA、E的基因，最終通過一系列的反應促使細胞越過限制點加速增殖。Cyclin D1過度表達會加快細胞周期的進行，加速細胞的分裂，從而導致組織或器官的增生和肥大，甚至會使細胞向惡性轉化。因此，CyclinD1基因被認為可與多種癌基因協(xié)同促進細胞轉化，是一種弱致癌基因，在多種腫瘤中有CyclinD1基因擴增或表達增強。本研中究發(fā)現(xiàn)，與正常體積乳房相比，肥大乳房中CyclinD1的表達同正常體積乳房組相比差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），提示肥大乳房的發(fā)生可能同CyclinD1基因的過表達相關，CyclinD1基因的促細胞增殖作用可能是乳房肥大的發(fā)病因素之一。

P21是細胞周期蛋白和細胞周期蛋白依賴性激酶的廣泛抑制劑，是野生型P53基因下游靶基因的轉錄產(chǎn)物[3-4]，可與多種Cyclins/CDK復合物結合，抑制底物磷酸化，使細胞周期停滯于G1期，進而抑制細胞增殖。另外，P21還能抑制細胞增殖核抗原（PCNA）依賴性DNA復制，通過直接抑制DNA合成來抑制細胞增殖[5]。本研究中，與正常體積乳房組相比，肥大乳房組中P21表達降低，兩組間比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。提示可能P21的減少對Cyclins/CDK的抑制作用降低也參與了乳房增生肥大。

過去對于CyclinD1和P21的研究多集中在腫瘤方面，兩者之間的動態(tài)平衡才可以保持細胞的正常增殖，若兩者之間的平衡被打亂，則會導致細胞周期紊亂，致使細胞異常增生。本課題采用免疫組化的方法檢測了34例肥大乳房和30例正常體積乳房，發(fā)現(xiàn)較正常體積乳房，肥大乳房中存在CyclinD1的增多和P21的減少，提示這兩個因子之間的表達失衡可能與乳房肥大的發(fā)生密切相關。

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[收稿日期]2011-06-26 [修回日期]2011-08-12

編輯/張惠娟