摘要 實驗室的檢查對自身免疫診斷是極其重要的,其中抗核抗體常常被用來肯定診斷疾病的條件之一,并且證明抗核抗體與某些疾病的致病機制有關。抗核抗體(ANA)是泛指一類具有抗各種核成分的抗體,它是一種自身抗體。
關鍵詞 抗核抗體 分類意義 檢測方法
ANA主要是LgM、LgA、LgD和LgE,它們因致病的不同而分布不同,ANA可以和不同來源的細胞核起反應,而無器官和種屬特異性,它們除存在血清中,也可以存在其他的體液如滑膜液、胸水和尿液中,且可通過胎盤。
ANA的分類及臨床意義
由于核抗原的不同,有多種不同的ANA。
抗核蛋白抗體:抗核蛋白抗體也稱DNA抗體,核抗原是有DNA和組蛋白組成,該核抗原又有不溶性和可溶性兩個部分,可分別產生相應的抗體,不溶性DNA抗體通常不完全被DNA或組蛋白所吸收,它是形成LE細胞的因子,可溶性可以存在于各種關節炎患者的滑液中,其相應抗體出現與RA患者的滑膜液中。
抗DNA抗體:抗DNA抗體包括兩大類,即抗天然DNA(nDNA)抗體,或稱抗雙鏈DNA(dsDNA)抗體及抗變性(dDNA)抗體,或稱抗單鏈(ssDNA)抗體。前者對SLE患者有較高的特異性,70%~90%活動期待SLE患者該抗體陽性,且效價較高并與疾病病情有關,后者可見于多種疾病中,無特異性。
抗ENA抗體:抗ENA抗體也稱抗可提取的核抗原抗體,可以分為提取的核抗原(ENA),此抗原經鹽水和磷酸緩沖液處理,易從胞核中提取出來,且不含DNA。近年研究表明,ENA可分為十幾種,這里僅介紹6種主要的ENA及相應的抗體:①抗核糖核蛋白抗體(RNP),RNP抗原對核糖核酸酶敏感,抗RNP抗體多見于混合性結締組織病,且高效價的抗RNA抗體對混合性結締組織有診斷意義,而低效價的抗RNP抗體可在SLE患者中發現。②抗Sm抗體:該抗體可與可溶性糖蛋白起反應,抗原系非核酸糖蛋白。它對Dnase及Rnase不敏感,但經過碘酸鹽及胰蛋白酶處理后可被水解。抗Sm抗體是SLE的特異性標志之一,陽性率30%~45%,在其他疾病中罕有陽性,它可能是SLE對一種回憶性抗體,故在非活動期亦可檢出。如將抗dsDNA和Sm抗體同時檢測,可提高SLE的診斷率。③抗SS-A抗體:被發現于干燥綜合征(SS)的“A”抗原后而命名,主要見于SS,但也可見于其他自身免疫疾病如SLE中。④抗SS-B抗體:SS-B抗原從小牛胸腺及小牛和鼠肝提取,可被胰蛋白酶、輕度加熱或改變溶液PH而破壞。13% SLE及30%SS患者有抗SS-B抗體。⑤抗SCL-70抗體:SCL-70抗原是拓撲異構酶I,它可使超螺旋DNA成為雙鏈DNA,該抗體可影響DNA的復制。多見于PSS,是PSS標志性抗體。⑥抗PM-I抗體:抗原亦小牛胸腺核提取物,是多發性肌炎的特異性抗體。⑦抗組蛋白抗體(AHA)組蛋白是一種堿性蛋白質,含有稍高量的賴氨酸及精氨酸,目前已發現組蛋白抗原可分5個亞單位,即組蛋白亞單位H、H2A、H2B、H3、H4,抗組蛋白抗體及其抗亞單位抗體見于SLE及藥物誘發的LE。SLE患者血清中抗組蛋白亞單位抗體檢出率順序為:抗2B、抗H1、抗H3、抗2A、及抗H4,以抗H2B和H1為主,并于SLE活動性有關。
抗核抗體的測定方法
由于ANA的復雜性和多樣性,故測定方法繁多,目前ANA常用的方法有免疫熒光法、放射免疫法、酶聯免疫吸附法、對流免疫電泳、免疫印跡法等。
免疫熒光法:1957年Frion首先應用免疫熒光法檢測ANA,ANA的主要熒光核型分為四種核型對臨床診斷有一定的參考價值。SLE患者常出現周邊型、均質型或混合型。斑點型多見于混合型結締組織病,而硬皮病多見于核仁型,周邊型對SLE有較高的特異性。
同位素法可分為Farr法及放射免疫分析法,臨床上常用Farr法。其特點是重復性好,可定量,以絕對單位表示測定結果;測定過程中抗原、抗體之間在液相中進行反應,反應完全、充分;其缺點是只能測高親和力抗體。
酶聯免疫吸附法:ELISA可用于大批量標本測定,目前被廣泛應用。其特點是:無放射性同位素污染;不受非DNA結合蛋白影響;可測定不同型別的抗體;高、低親和力抗體被同時測定。
總之,檢測ANA無論用什么方法,主要因考慮兩個方面,一是抗體的效價,二是抗體的型別,并且臨床因將測定結果與疾病情況綜合考慮,全面分析,對病情作出客觀的判斷。
參考文獻
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