仔豬白痢的病原分離及藥敏試驗(yàn)

仔豬白痢是由致病性大腸桿菌引起的腸道傳染病，多發(fā)生于１０日齡左右的仔豬，病仔豬主要排乳白色或灰白色、腥臭、糨糊狀稀糞為特征，發(fā)病率中等，病死率低，但傳染性強(qiáng)，一窩仔豬若有一頭發(fā)病即很快波及其他仔豬，嚴(yán)重影響仔豬的生長發(fā)育。筆者從宜昌龍泉一養(yǎng)豬戶發(fā)生白痢的仔豬采集病料，進(jìn)行了病原分離及藥物敏感試驗(yàn)，以便對未發(fā)病仔豬及發(fā)病仔豬給予及時有效的預(yù)防和治療。

１ 材料與方法

１．１ 材料

１．１．１ 病料 采集宜昌龍泉一養(yǎng)豬戶的１５日齡仔豬白痢糞便（肛門拭子）。

１．１．２ 培養(yǎng)基 麥康凱瓊脂培養(yǎng)基（購于杭州微生物試劑有限公司）、伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基（杭州微生物試劑有限公司）、普通瓊脂培養(yǎng)基（自配）、肉湯培養(yǎng)基（自配）。

１．１．３ 生化試劑 Ｒａｐ·Ｅ－１５腸桿菌科細(xì)菌生化鑒別試劑（執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)號：ＹＺＢ／浙１９１８－２００８；生產(chǎn)企業(yè)許可證：浙藥管械生產(chǎn)許２００７００１８號），由ＢＩＯ－ＫＯＮＴ溫州市康泰生物科技有限公司生產(chǎn)。

１．１．４ 藥敏紙片 鏈霉素（１０μｇ／片，批號１１０３１４）、卡那霉素（３０μｇ／片，批號１１０３１０）、慶大霉素（１０μｇ／片，批號１１０３２４）、壯觀霉素（１００μｇ／片，批號１１０１１８）、新霉素（３０μｇ／片，批號１１０１１７）、強(qiáng)力霉素（３０μｇ／片，批號１１０３１７）、四環(huán)素（３０μｇ／片，批號１１０２１１）、氨芐青霉素（１０μｇ／片，批號１１０３１７）、阿莫西林（１０μｇ／片，批號１１０１３０）、苯唑青霉素（１μｇ／片，批號１１０２１８）、潔霉素（２μｇ／片，批號１１０３２２）、氟哌酸（１０μｇ／片，批號１１０３１４）、環(huán)丙沙星（５μｇ／片，批號１１０２２３）、恩諾沙星（５μｇ／片，批號１１０２１１）、氟苯尼考（７５μｇ／片，批號１１０３１０）等１５種藥敏紙片，購自杭州微生物試劑有限公司，執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)ＷＳ／Ｔ１２５－１９９９。

１．２ 方法

１．２．１ 細(xì)菌分離培養(yǎng) 將采集的病料接種麥康凱瓊脂培養(yǎng)基和伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基，置３７℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)１８～２４ｈ，挑取紅色菌落和帶金屬光澤的菌落分別接種ＴＳＩ培養(yǎng)基，對出現(xiàn)產(chǎn)酸、產(chǎn)氣、硫化氫反應(yīng)陰性者進(jìn)行革蘭氏染色鏡檢，符合大腸桿菌特征則進(jìn)行生化試驗(yàn)，同時進(jìn)行純培養(yǎng)。

１．２．２ 生化鑒定 按照ＢＩＯ－ＫＯＮＴ溫州市康泰生物科技有限公司生產(chǎn)的Ｒａｐ·Ｅ－１５腸桿菌科生化鑒定試驗(yàn)板說明書進(jìn)行試驗(yàn)操作。

１．２．３ 藥敏試驗(yàn) 取純培養(yǎng)菌接種液體培養(yǎng)基擴(kuò)增后，再接種普通瓊脂培養(yǎng)基，１５種藥物用常規(guī)的藥敏紙片法進(jìn)行藥物敏感性試驗(yàn)。

２ 結(jié)果與分析

２．１ 生化試驗(yàn)結(jié)果

由表１可見，該分離菌株對山梨醇（ＳＯＲ）、鼠李糖（ＲＨＡ）、木糖（ＸＹＬ）、蔗糖（ＳＵＣ）、甘露醇（ＭＡＮ）、阿拉伯糖（ＡＲＡ）、鳥氨酸（ＯＤＣ）、賴氨酸（ＬＤＣ）、甲基紅（ＭＲ）試驗(yàn)、靛基質(zhì)（ＩＮＤ）試驗(yàn)及動力（ＭＯＴ）試驗(yàn)均為陽性反應(yīng)，側(cè)盞醇（ＡＤＯ）、丙二酸鹽（ＭＡＬ）靛基質(zhì)（ＩＮＤ）及纖維二糖（ＣＥＬ）則為陰性反應(yīng)，以上結(jié)果與大腸桿菌生化反應(yīng)結(jié)果一致。

２．２ 藥敏試驗(yàn)結(jié)果

由表２可見，分離的大腸桿菌菌株對卡那霉素、新霉素、壯觀霉素中度敏感，對強(qiáng)力霉素輕度敏感，對其他１１種藥物均表現(xiàn)耐藥現(xiàn)象。

３ 小結(jié)

（１）從宜昌龍泉養(yǎng)豬戶仔豬白痢糞便中分離的菌株經(jīng)細(xì)菌鑒別培養(yǎng)、染色形態(tài)觀察、生化試驗(yàn)鑒定為大腸桿菌。

（２）從試驗(yàn)中得知分離的大腸桿菌菌株對目前臨床常用的氟苯尼考、恩諾沙星、氟哌酸、環(huán)丙沙星、慶大霉素耐藥，而對卡那霉素、新霉素、壯觀霉素敏感。由此看來及時地選對藥物治療或預(yù)防仔豬白痢，減少養(yǎng)豬戶的損失，是獸醫(yī)工作者需要重視并解決的問題。