摘要:用糞便檢查法對(duì)洛陽(yáng)地區(qū)有代表性的7個(gè)規(guī)模化奶牛場(chǎng)不同階段奶牛的226份糞便進(jìn)行結(jié)腸小袋纖毛蟲感染情況調(diào)查。結(jié)果發(fā)現(xiàn)奶牛場(chǎng)結(jié)腸小袋纖毛蟲陽(yáng)性率為100%,各奶牛場(chǎng)的感染率在26.32%~66.67%之間,平均感染率為49.56%;各奶牛場(chǎng)EPG在98~345之間。不同年齡階段奶牛結(jié)腸小袋纖毛蟲感染率不同,其中犢牛感染率為41.18%,育成牛為70.00%,成年牛為39.77%。
關(guān)鍵詞:奶牛;結(jié)腸小袋纖毛蟲;感染率
中圖分類號(hào):S858.23 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1007-273X(2012)05-0004-02
結(jié)腸小袋纖毛蟲?。ǎ拢幔欤幔睿簦椋洌椋铮螅椋螅┦怯山Y(jié)腸小袋纖毛蟲(Balantidium coli)引起的人畜共患寄生蟲病,呈世界性分布,主要流行于熱帶和亞熱帶地區(qū)。目前已知包括人在內(nèi)的33種動(dòng)物可以感染該病,人感染結(jié)腸小袋纖毛蟲病后在臨床上可表現(xiàn)為腹痛、腹瀉、里急后重等癥狀,有些病例還可表現(xiàn)為泌尿生殖道感染,對(duì)人體健康危害較大[1,2]。目前發(fā)現(xiàn),豬結(jié)腸小袋纖毛蟲感染非常普遍,感染率可高達(dá)20%~100%[3]。有關(guān)豬結(jié)腸小袋纖毛蟲病的研究較多,但有關(guān)奶牛結(jié)腸小袋纖毛蟲病的研究較少。徐立新等[4]2003年在江蘇發(fā)現(xiàn)奶牛感染結(jié)腸小袋纖毛蟲的臨床病例,并進(jìn)行了治療試驗(yàn),說明該蟲體對(duì)奶牛具有致病作用。葉秀娟等[5]于2010年調(diào)查了浙江金華奶牛結(jié)腸小袋纖毛蟲感染情況,發(fā)現(xiàn)奶牛場(chǎng)陽(yáng)性率達(dá)100%,平均感染率為63.26%,是奶牛寄生蟲中的優(yōu)勢(shì)種。洛陽(yáng)地區(qū)近幾年來奶牛養(yǎng)殖業(yè)得到了極大發(fā)展,但多數(shù)奶牛場(chǎng)規(guī)模較小,存在設(shè)施簡(jiǎn)陋、管理粗放、人牛混居等問題,因此,了解洛陽(yáng)地區(qū)規(guī)模化奶牛場(chǎng)結(jié)腸小袋纖毛蟲的感染情況,不僅可讓養(yǎng)殖人員正確認(rèn)識(shí)結(jié)腸小袋纖毛蟲對(duì)奶牛的致病性,對(duì)提高人畜結(jié)腸小袋纖毛病的防控效果也具有重要意義。
1 材料與方法
1.1 糞便采集
在洛陽(yáng)地區(qū)奶牛養(yǎng)殖比較集中的區(qū)域選取具有代表性的奶牛場(chǎng)進(jìn)行調(diào)查,采用直腸掏糞的方法采集新鮮糞便樣品,每份樣品不少于50g(每頭牛采集1份樣品),樣品裝入潔凈塑料袋內(nèi),標(biāo)記后放入冰筒內(nèi)迅速送至實(shí)驗(yàn)室,2~8℃保存,并于24h內(nèi)檢查完畢。共采集樣品226份,其中犢牛(小于9月齡)68份,育成牛(9~16月齡)70份,成年牛(大于16月齡)88份。
1.2 糞便中結(jié)腸小袋纖毛蟲的檢查
先用直接涂片法對(duì)每個(gè)糞便樣品進(jìn)行檢查,每份樣品涂3張載玻片,若發(fā)現(xiàn)有結(jié)腸小袋纖毛蟲包囊或滋養(yǎng)體者記作感染;若用直接涂片法未發(fā)現(xiàn)蟲體的樣品者再用水洗沉淀法對(duì)其進(jìn)行檢查。
1.3 陽(yáng)性樣品中感染強(qiáng)度的確定[6]
定量取陽(yáng)性樣品適量(A,g),用3~5倍體積的常水混合均勻后,用金屬篩網(wǎng)過濾,將濾液以3 000 r/min離心3min,棄去適量上清液,用量筒核定沉淀液的體積(B,mL)。取均勻的沉淀充入蟲卵計(jì)數(shù)器的兩個(gè)計(jì)數(shù)室內(nèi),在顯微鏡下計(jì)數(shù)兩個(gè)計(jì)數(shù)室內(nèi)的滋養(yǎng)體/包囊數(shù),以下列公式計(jì)算每克糞便樣品中的滋養(yǎng)體/包囊數(shù)(EPG):EPG=計(jì)數(shù)器兩小方格內(nèi)的滋養(yǎng)體/包囊數(shù)×B/(A×0.2)。
1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及分析[7]
統(tǒng)計(jì)不同奶牛場(chǎng)、不同階段牛群結(jié)腸小袋纖毛蟲的感染率,用u檢驗(yàn)比較不同奶牛場(chǎng)結(jié)腸小袋纖毛蟲感染率、不同階段奶牛群感染率以及陽(yáng)性奶牛EPG的差異性。
2 結(jié)果
2.1 蟲體形態(tài)
在顯微鏡下觀察到較多量滋養(yǎng)體和少量包囊。滋養(yǎng)體呈卵圓形或梨形,周身被纖毛,蟲體借助纖毛的擺動(dòng)可旋轉(zhuǎn)式前行、后退或原地打轉(zhuǎn);包囊近圓形,不運(yùn)動(dòng),外被兩層較厚囊膜。滋養(yǎng)體和包囊內(nèi)均有1個(gè)明顯的大核,如圖1所示。
2.2 不同奶牛場(chǎng)結(jié)腸小袋纖毛蟲感染情況
本次共調(diào)查了洛陽(yáng)地區(qū)的7個(gè)奶牛場(chǎng),這些奶牛場(chǎng)分布于洛陽(yáng)地區(qū)的孟津縣(3個(gè))、偃師市(3個(gè)),洛龍區(qū)(1個(gè))等地,其中存欄400頭的奶牛場(chǎng)有2個(gè),存欄200~300頭的奶牛場(chǎng)有3個(gè),存欄100頭的奶牛場(chǎng)有2個(gè)。這些奶牛場(chǎng)基本代表了洛陽(yáng)地區(qū)的奶牛養(yǎng)殖水平。本次調(diào)查的7個(gè)奶牛場(chǎng)均有結(jié)腸小袋纖毛蟲感染,奶牛場(chǎng)陽(yáng)性率為100%。各奶牛場(chǎng)感染率在26.32%~66.67%,平均感染率為49.56%。各場(chǎng)感染牛的平均EPG為98~345。經(jīng)u檢驗(yàn),不同奶牛場(chǎng)牛群感染率及感染牛的平均EPG存在差異(表1)。
2.3 不同階段奶牛感染情況
由表2可見,犢牛、育成牛、成年牛結(jié)腸小袋纖毛蟲感染率分別為41.18%、70.00%、39.77%;感染牛的平均EPG分別是228、278和236。經(jīng)u檢驗(yàn),育成牛的感染率及平均EPG均極顯著高于犢牛和成年牛(P<0.01)。
3 討論
奶牛的規(guī)?;B(yǎng)殖已成為我國(guó)畜牧業(yè)的重要組成部分,采用標(biāo)準(zhǔn)化的舍飼方式減少了奶牛接觸寄生蟲的中間宿主或傳播媒介的機(jī)會(huì),干草和青貯飼料經(jīng)過干燥和發(fā)酵可殺死多數(shù)寄生蟲蟲卵或幼蟲,同時(shí),人們大多比較重視蠕蟲的驅(qū)除,所以奶牛腸道寄生蟲感染種類由以蠕蟲為主轉(zhuǎn)向以原蟲為主。結(jié)腸小袋纖毛蟲生活史簡(jiǎn)單,動(dòng)物食入的包囊在消化液的作用下破壁,釋放出滋養(yǎng)體,滋養(yǎng)體在體內(nèi)以橫二分裂法繁殖,并在一定條件下危害動(dòng)物健康。規(guī)?;膛?chǎng)養(yǎng)殖條件下,奶牛個(gè)體可近距離接觸,帶蟲牛排出的包囊可通過飼料、飲水及環(huán)境設(shè)施而感染健康牛,增加了病原傳播的機(jī)會(huì)。本次調(diào)查的7個(gè)奶牛場(chǎng)均有結(jié)腸小袋纖毛蟲感染,不同奶牛場(chǎng)感染率在26.32%~66.67%之間,平均感染率為49.56%。平均感染率略低于葉秀娟等[5]在浙江金華地區(qū)調(diào)查的結(jié)果,但育成牛感染率極顯著高于犢牛和成年牛,這一結(jié)果與之一致。Bilal等[8]報(bào)道了巴基斯坦拉維河流域牛結(jié)腸小袋纖毛蟲感染情況,總感染率為25%,不同性別、年齡和飼養(yǎng)方式的牛差異不顯著。Hussanjak等[9]報(bào)道了克羅地亞地區(qū)牛結(jié)腸小袋纖毛蟲感染率達(dá)48%。感染率的差異可能與不同地區(qū)的環(huán)境條件、飼養(yǎng)方式及衛(wèi)生管理措施差異有關(guān)。
一般情況下,結(jié)腸小袋纖毛蟲的致病力不強(qiáng),其在寄生部位可與宿主呈共生狀態(tài),主要以腸壁細(xì)胞、淀粉、細(xì)菌、糞便中的碳水化合物、紅細(xì)胞和白細(xì)胞等為營(yíng)養(yǎng),宿主多不表現(xiàn)明顯的臨床癥狀。但當(dāng)宿主的消化功能紊亂,特別是合并感染沙門氏菌時(shí),蟲體可乘機(jī)侵入并破壞組織,造成潰瘍性腸炎,出現(xiàn)腹瀉癥狀。徐立新等[4]報(bào)道了奶牛結(jié)腸小袋纖毛蟲臨床病例,病牛初期體溫升高,便秘與腹瀉相交替,之后主要以腹瀉為主,糞便中帶有腸黏膜碎片且腥臭,經(jīng)對(duì)癥治療后癥狀減輕,但不久后又出現(xiàn)反復(fù)。發(fā)病期間采食正常,但產(chǎn)奶量下降,用甲硝唑治療后恢復(fù)正常[4]。本次調(diào)查所涉及養(yǎng)殖場(chǎng)中沒有一家使用過抗原蟲藥,雖然在采樣過程中個(gè)別奶牛已表現(xiàn)出一定的臨床癥狀,如糞樣稀薄、惡臭等,但養(yǎng)殖業(yè)主或獸醫(yī)并未認(rèn)識(shí)到該病及其對(duì)奶牛的危害性,或是誤診為他病,其采取的措施難以取得明顯效果。
王天奇等[10]發(fā)現(xiàn)斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征(PMWS)豬群結(jié)腸小袋纖毛蟲感染率極顯著地高于健康豬群;曲莉芝等[11]利用免疫抑制劑地塞米松誘發(fā)大鼠結(jié)腸小袋纖毛蟲病。這些研究證明,動(dòng)物感染結(jié)腸小袋纖毛蟲可能與其免疫抑制有關(guān)。但有關(guān)結(jié)腸小袋纖毛蟲對(duì)牛特別是奶牛的致病機(jī)制尚未見到研究和報(bào)道,因此,加強(qiáng)這方面的研究對(duì)預(yù)防和控制奶牛結(jié)腸小袋纖毛蟲病極為重要。
考慮到結(jié)腸小袋纖毛蟲可感染人,造成結(jié)腸和盲腸的深層發(fā)生潰瘍,并可轉(zhuǎn)移至其他組織和器官,因此,奶牛場(chǎng)飼養(yǎng)管理人員應(yīng)注意個(gè)人衛(wèi)生,防止經(jīng)口或其他途徑感染而造成嚴(yán)重后果[2,12]。
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