對哈爾濱工業大學體育場館細菌量安全的研究

王國濱，關亞軍

（哈爾濱工業大學體育部，黑龍江 哈爾濱 150001）

對哈爾濱工業大學體育場館細菌量安全的研究

王國濱，關亞軍

（哈爾濱工業大學體育部，黑龍江 哈爾濱 150001）

基于保障學校運動場館的微生物環境安全，對學校運動館空氣、器械表面的細菌量進行了測試實驗，選取學校各場館不同時間段和不同人數時進行細菌計數和鑒定。此研究目的旨在明確各場館中細菌總數和類別是否對運動人員健康造成影響，為場館日常清潔做參考，為運動人員提供更加良好的鍛煉環境，推動制定適用于體育運動場館設施的空氣質量、微生物安全標準。

運動館； 細菌量； 安全

我國學校體育教學場館是學生群體進行體育運動教學、訓練比賽、健身的公共場所，運動過程中對環境安全，如對空氣、微生物環境（即對飄塵、SO2 、CO、NO2及有毒金屬如鉛、汞） 、運動設施、器械共用表面（運動者接觸部分）、隱蔽部位有害微生物菌團（大腸桿菌、溶血性鏈球菌、綠膿桿菌）等有特殊的要求。同時這些場所也是使用人群集中、易成為公共群體交叉感染、傳播疾病的源頭。目前，國內相當多的運動場館沒有相關配套檢測、防控設備，而且我國體育場館微生物質量標準至今還沒有出臺。但近年來由于（大環境）空氣污染帶來的衍生體育場館（局部）環境安全條件（有害空氣、微生物致病種類與含量）因素增量變化趨勢，其中各種空氣污染以及其衍生環境對人們運動健康已然造成了負效影響。相比較社會商業性質的體育場館，高校的體育場館存在著體育場地質量一般，相關配套設施專業程度無法達到項目要求標準等問題[1]。本研究旨在明確場館中細菌總數和類別是否對運動人員健康造成影響，從而推動體育運動場館設施的空氣質量、微生物安全標準的制定，促進國家體育場館防控體系的建立，豐富運動場館安全質量管理理論體系，并以此為理論基礎保障學校運動場館空氣質量的安全。

1 實驗對象與實驗方法

1.1 實驗對象

實驗中選取籃球館、體操館、羽毛球館、體育舞蹈館、健身館各場館不同時間段和不同人數空氣中的微生物、物體表面細菌量，進行細菌計數和鑒定，旨在明確各場館中細菌總數和類別是否對運動人員健康造成影響。

1.2 實驗方法

1.2.1 實驗準備（1）材料準備：50ml一次性無菌注射器10只，培養皿90個，濾膜10個，50ml離心管（內裝無菌水）10個，20ml試管30個，供微生物計數使用。

（2）培養基的制備：經過滅菌的LB固體普通培養基500ml，我們選用的是牛肉膏蛋白陳普通固體培養基,比例為1000ml蒸餾水中，加牛肉膏10g蛋白陳3g，氯化鈉5g，瓊脂18g，.加熱溶解后調至中性或微堿性，滅菌條件為120℃，30min。未完全凝固時在無菌狀態下倒入平皿。

（3）培養皿和離心管等的準備：將培養皿和裝有無菌水的離心管用牛皮紙包好，和干凈的試管以及封裝好的無菌水一起放入滅菌鍋中，滅菌條件為120℃，30min，滅菌后放入無菌室等待采樣。

1.2.2 采樣方法（1）注射器采樣法：在場館內拆開無菌注射器包裝，抽取50ml空氣，之后在注射器前端裝濾膜，排出注射器內空氣，空氣中微生物被留在濾膜中，采樣完畢后雙手用75℃消毒擦拭消毒，取下濾膜放入離心管內，帶回實驗室進行計數。

（2）器械表面采樣法：器械表面材質為布質或皮革制品，選取相同材質的物品，制成 1cm2*1cm2的方塊，用75%酒精消毒后粘附與器械表面，所粘附器械仍正常使用。3天后取下方塊，放入裝有無菌水的50mL離心管，當天取離心管內水樣接種培養，進行平板計數。

（3）平板計數法對細菌進行計數：將離心管放入離心機中以8000r/min轉速離心，分離出濾膜中細菌，用磁力振蕩器振蕩5min，吸取1ml離心管中水樣，加入試管中，另加9ml無菌水，混勻后再吸取1ml試管中水樣加入另一試管中，再吸取9ml無菌水，重復一次，做3個梯度，每個梯度都進行3次平板涂布，選取細菌數量在30～300間的梯度進行計數，取平均值記為空氣中細菌數量。

1.2.3 生理生化指標和脂肪酸鑒定對場館空氣中的微生物、物體表面細菌量進行生理生化指標和脂肪酸鑒定（見圖1）。

圖1 梯度稀釋示意圖

2 實驗結果與分析

2.1 檢測結果

對學校籃球館、羽毛球館、體育舞蹈館、健身館進行了空氣微生物、物體表面細菌量檢測。在上述的檢測中檢測出的細菌有: 煙曲霉、交鏈孢霉、微球菌屬等細菌并分析計算出單位平方厘米所含有的數量。對培養皿中細菌進行計數后得到微生物計數結果見表1～3。

表1 空氣中微生物細菌數量計數結果

每個場館的細菌種類和各種類含量相差不多,主要是青霉菌為多數,細菌數量并沒有太顯著的差別。因為平板計數采樣中的細菌有很大隨機性,所以可以認為這些細菌數量相當細菌污染程度與環境質量成正比。細菌數目的多少, 與人口密集程度, 人員流動有關。學校運動場館人群密度大, 流動性大, 揚起的灰塵多,人的呼吸道、皮膚及毛發上細菌的擴散, 都是細菌增多的因素。每天的清掃消毒, 細菌數就少。環境中細菌數與人數相關。人數越多,細菌污染越嚴重。

表2 物體表面細菌量計數結果

表3 各場館有害菌分類所占比例統計

每個場館的細菌種類和各種類含量相差不多,主要是青霉菌為多數,細菌數量并沒有太顯著的差別。因為平板計數采樣中的細菌有很大隨機性,所以可以認為這些細菌數量相當細菌污染程度與環境質量成正比。細菌數目的多少, 與人口密集程度, 人員流動有關。學校運動場館人群密度大, 流動性大, 揚起的灰塵多,人的呼吸道、皮膚及毛發上細菌的擴散, 都是細菌增多的因素。每天的清掃消毒, 細菌數就少。環境中細菌數與人數相關。人數越多,細菌污染越嚴重。

2.2 淺析細菌量、特征與危害

2.2.1 細菌量由表1可知，籃球館和乒乓球館中原有細菌數量并不多于羽毛球館，但活動人數較多時細菌數量激增。同樣數量人員在不同館內運動時，乒乓球館內細菌數量最多，健身館、籃球館次之，然后是羽毛球館內細菌數量最少。空氣中微生物數量與人員數量、活動方式有關。原因為籃球館和乒乓球館中有人活動時人員密度大，活動量大，呼吸道和皮膚及毛發中的攜帶細菌擴散積累很快，遠高于羽毛球館和健身館；空氣中微生物數量與環境有關。籃球場和乒乓球館中無人時細菌數量很少，空氣清潔度高，表明日常清潔程度要高于另外兩個場館。室內空氣中細菌總數規定4000cfu/m3。由實驗結果看出各場館中細菌數最高時為970個/L，換算結果遠遠小于國家標準值，此外空氣中基本不含有致病菌，故空氣質量良好。 此外由生理生化指標測定和脂肪酸鑒定結果得知各場館內微生物種類主要有細菌和真菌。微生物中細菌占絕大數量,其中球形菌比例居首，未檢測出溶血性菌和綠色鏈球菌，表明場館的日常維護良好，無滋生細菌的衛生死角。

2.2.2 細菌特征與危害

（1）煙曲霉：（Aspergillus fumigatus）是一種重要的致病菌，煙曲霉進入人體后，能引起多重變應性和侵入性疾病，支氣管肺病屬于侵入性曲霉病最普通的臨床表現。屬于子囊菌類，它能夠產生菌絲體。通過從菌絲體釋放出來的無性孢子進行傳播，這種孢子是一種極為堅固、生命力持久的芽胞。 菌落形態為初期氣生菌絲為白色，基內菌絲土黃色，菌落表面呈干粉狀，邊緣整齊，后轉為黃綠色霉層，基質顏色不變；無滲出液。 反面呈微黃褐色；缺乏可溶性色素。菌絲、分生孢子梗發生于基質和表面菌絲，菌絲有隔，孢子為分生孢子，孢子絲末端有分生孢子梗，帚狀枝大而規則；分生孢子串生，單孢，孢子呈圓球形。分生孢子穗圓筒形，呈深淺不同的綠色，分生孢子梗光滑，帶綠色；頂囊燒瓶狀，僅上半部產生孢子；分生孢子球形，有刺，綠色。感染所致侵襲性肺曲霉病（IPA）是引起高危患者（如中性粒細胞減少癥、造血干細胞移植、長期高劑量使用激素和血液惡性腫瘤等免疫力低下患者）致死性感染的主要原因。由于IPA的發病率高、病情進展迅速、死亡率高（60%～90%）及缺乏有效的治療藥物，其相關研究受到了極大關注。

（2）交鏈孢霉：（Alternaria）是土壤、空氣、工業材料上常見的腐生菌，植物的葉子、種子和枯草上也常見到，有的是栽培植物的寄生菌。菌絲暗至黑色，有隔膜，以分生孢子進行無性繁殖。分生孢子梗較短，單生或叢生，大多數不分枝，與營養菌絲幾乎無區別。分生孢子呈紡錘狀或倒棒狀，頂端延長成喙狀，多細胞，有壁磚狀分隔，分生孢子常數個成鏈，一般為褐色。尚未發現有性世代。有些菌種可用于生產蛋白酶，某些種可用于甾族化合物轉化。

（3）微球菌屬：(Micrococcus Cohn) 細胞球形，直徑0.5～2.0μm，成對、四聯或成簇出現，但不成鏈。革蘭氏陽性。罕見運動，不生芽孢。嚴格好氧。菌落常有黃或紅的色調。具呼吸的化能異養菌，從糖常產少量酸或不產酸。通常生長在簡單的培養基上。接觸菌落呈絨毛狀，多為灰黑色至黑色。 交鏈孢霉產生的交鏈孢霉毒素，有交鏈孢霉酚，酶陽性，氧化酶常常是陽性的，但往往是很弱的。通常耐鹽，可在5%NaCl中生長。含細胞色素，抗溶菌酶(Schleifer&Kloos，J Clin Microbiol 337～338，1975)。最適溫度25～37℃。最初出現在脊椎動物皮膚和土壤，但從食品和空氣中也常常能分離到。 DNA的G+C mol%為64～75(Tm，Bd)。模式種：藤黃微球菌(Micrococcus luteus)，細菌——腸桿菌。

以上細菌在空氣中主要以兩種形式存在: 一是附著于空氣顆粒物上, 直徑大于10 μm 顆粒物可同細菌一起降落地面, 直徑小于10μm的細菌在空氣中主要以兩種形式存在: 一是附著于空氣顆粒物上, 直徑小于10μm 顆粒物則攜菌長時間漂浮在空氣中; 二是含于飛沫中, 當人們噴嚏、咳嗽、唱歌、談話時, 由口、鼻噴出飛沫, 附于飛沫中的細菌或附于飛沫蒸發而形成的“飛沫核”上的細菌，迅速分散于室內各處, 長時間漂浮空氣中。在通風不良, 空氣污濁,細菌數量多的室內, 極容易傳播呼吸道傳染病。

3 結論與建議

3.1 結論

（1）空氣中微生物數量與人員數量、活動方式有關。籃球館和乒乓球館中原有細菌數量并不多于羽毛球館，但活動人數較多時細菌數量激增。原因為籃球館和乒乓球館中有人活動時人員密度大，活動量大，呼吸道和皮膚及毛發中的攜帶細菌擴散積累很快，所以要遠高于羽毛球館和健身館。

（2）各運動場館的空氣微生物菌團數量低于現有國內有關標準，說明各場館的空氣微生物量對運動訓練是安全的。

3.2 建議

（1）加強體育館日常衛生管理。由于到館人員大多要進行劇烈的體育活動,而這種活動會使沉積的灰塵、隱匿的細菌、人體呼吸道中的細菌彌散到空氣中,從而導致空氣中可吸入塵濃度升高,含菌量增加,小氣候惡化,空氣質量下降，所以體育館工作人員要嚴格把握館內的清掃次數以及認真徹底清掃窗臺、更衣柜、暖氣等一些死角，尤其是健身館的地毯,健身器械表面要經常吸塵。

（2）嚴格執行換鞋制度是決定各功能場館衛生狀況的主要因素。

（3）保證館內通風設備的正常運行，從而保證空氣環境質量。

［1］殷亮，溫超.黑龍江省高校體育場館經營管理SWOT分析［J］.哈爾濱體育學院學報，2012,（2）:58-61.

［2］姚小林，韓冰，等.我國高校體育場館考核評估問題調查［J］.哈爾濱體育學院學報, 2010,（3）:48-50.

［3］張金萍,張寅平,高鵬,等.奧運場館室內空氣品質測評［J］. 建筑科學，2009,（ 6）：34-38.

［4］臧廣悅，沈陽體院室內體育場館空氣衛生學狀況研究［J］.遼寧師專學報(自然科學版)，2006,（3）：24-28.

The Study of Gym Microorganism Environment Safety at Harbin Institute of Technology

WANG Guo-bin, GUAN Ya-jun
(Department of Physical Education, Harbin Institute of Technology，Harbin 150001, Heilongjiang China )

In order to ensure the safety of the microorganism environment in our Gym, we underwent an experiment about the microorganism in the atmosphere and the equipments in our Gym in various time period and different density of people. The purpose of this experiment is to clarify the harm to those exercisers who work out in our Gym in terms of the kinds and amount of the microorganism, to set up guidance of daily housekeeping job, to provide better exercising environment. Meanwhile, it is also used to help set up the criteria of air quality and microorganism, set up the harm preventing system in all Gyms throughout the nation.

Gym; Microorganism; Safety

G818

A

1008-2808(2012)03-0107-04

G818

A

1008-2808(2012)03-0107-04

2012-05-13；

2012-05-29

2009年黑龍江省自然科學基金項目（項目編號：G200901G0312）。

王國濱（1957－），男，教授，雙學士學位，研究方向為體育教育。