麻杏止咳片的薄層鑒別及HPLC含量測定研究

任娟 耿祥飛

麻杏止咳片的薄層鑒別及HPLC含量測定研究

任娟1耿祥飛2

目的建立麻杏止咳片中麻黃的薄層鑒別及麻黃堿含量的測定方法。方法采用薄層色譜法對麻黃進行鑒別;采用高效液相色譜法對麻黃堿進行含量測定。結果在薄層色譜上供試品與對照品及對照藥材色譜相應位置上顯相同的顏色斑點，陰性對照無相應斑點。鹽酸麻黃堿HPLC測得中線性關系良好(r=0.9995)。結論本法簡便、可靠、準確，可用于該制劑的質量控制。

麻杏止咳片;薄層鑒別;高效液相色譜法

引言

麻杏止咳片主要由麻黃、苦杏仁、石膏、炙甘草等四味中藥組成，其功效是鎮咳，祛痰，平喘。麻杏止咳片中的含量影響到用藥安全問題，故對麻杏止咳片中麻黃堿的含量測定具有重要意義［1］。本實驗選取麻黃建立一種簡單、方便、可行的薄層鑒定方法，對麻杏止咳片中的麻黃進行鹽酸麻黃堿的HPLC含量測定，采用薄層色譜對方中君藥麻黃進行鑒別和采用高效液相色譜法測定其鹽酸麻黃堿，為建立該制劑的質量標準提供了依據［2－3］。

1.材料與儀器

鹽酸麻黃堿對照品，購自中國藥品生物制品檢定所。

LC－2010C高效液相色譜儀(日本島津)，UV－2450紫外分光光度計，薄層板加熱器(瑞士Precisa);

2.方法與結果

(1)麻黃的薄層鑒別

①供試品溶液的制備

取本品8片，研細，加濃氨試液10滴與氯仿20ml，超聲處理20分鐘，濾過揮干，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液。

②陰性對照溶液的制備

按麻杏止咳片的工藝制成陰性樣品，再按“①”操作，得對照溶液。

③對照藥材的制備

取麻黃對照藥 1g，加甲醇 10ml，超聲處理20min，濾過蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為對照藥材溶液。

④對照品溶液的制備

取鹽酸麻黃堿對照品，加甲醇制成溶液，作為對照品溶液。

⑤薄層層析及結果

照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述供試品溶液10μl、陰性對照溶液10μl、對照藥材溶液和對照品溶液各5μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑鋪制的硅膠G薄層板上，以氯仿－甲醇－濃氨試液(20∶5∶0.5)為展開劑，噴以茚三酮試液，于105℃加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜和對照藥材色譜相應的位置上，顯相同的暗紅色斑點，陰性樣品無干擾(見圖1)。

圖1:(1－3.麻杏止咳片樣品;4.麻黃對照藥材;5.麻黃堿對照品;6.陰性對照品)

(2)鹽酸麻黃堿的含量測定

①色譜條件

色譜柱:Diamonsil C18(250mm ×4.6mm，5μm);流動相:乙腈- 水(1mL·L－1磷酸和 1mL·L－1三乙胺)3:97;流速 1mL·min－1;檢測波長207nm。

②供試品溶液的制備

取本品10片，研細粉約0.5g加入濃氨試液1.5ml，振搖，加三氯甲烷 50ml，超聲(120W，40KHz)30min，至室溫，搖勻，濾過，精密量取續濾液10ml，加0.1%鹽酸甲醇溶液2ml，搖勻，即得。

③對照品溶液的制備

稱取麻黃堿對照品10.04mg，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

④陰性對照品溶液的制備

按“②”供試品溶液的制備方法操作，制成陰性對照溶液。

⑤測定波長的選擇

麻黃堿對照品在207nm波長處有最大吸收，故選擇207nm為本品的測定波長(見圖2)。

圖2 鹽酸麻黃堿對照品紫外光譜圖(甲醇)

⑥系統適應性試驗

與供試品溶液色譜和鹽酸麻黃堿對照品色譜比較，結果表明陰性樣品無干擾(見圖3)。

圖3 麻杏止咳片HPLC圖

注:A為鹽酸麻黃堿對照品色譜圖;B為供試品溶液色譜圖;C為陰性溶液色譜圖.

結 論

經實驗證明，對麻杏止咳片中麻黃的薄層鑒別，其斑點清晰，展開效果好。采用HPLC法對鹽酸麻黃堿進行含量測定，方法重復性好，靈敏度高，定量準確，分離度高，可作為麻黃止咳片質量控制方法之一，為麻杏止咳片的質量控制和開發提供參考依據。

1 國家中醫藥管理局中華本草編委會.中華本草(精選本)［M］.上海:上海科技出版社，1998:830.

2 吳貽清，郭長強，程琳，等.麻黃中麻黃堿薄層層析檢測方法選擇［J］.時珍國醫國藥，1999，10(7):553-554.

3 Haller CA，Benowitz NL.Adverse cardiovascular and central nervous system events associated with dietary supplements containing ephedra alkaloids［J］.N Engl J Med，2000，343(25):1833-1838.

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