Snail在胃癌中的表達及其臨床意義

張五德 周業江 王志軍 段勛偉

1)河南汝州市第一人民醫院 汝州 467500 2)瀘州醫學院附屬醫院 瀘州 64600

Snail在胃癌中的表達及其臨床意義

張五德1)周業江2)王志軍1)段勛偉1)

1)河南汝州市第一人民醫院 汝州 467500 2)瀘州醫學院附屬醫院 瀘州 64600

目的研究Snail在胃癌的表達與腫瘤轉移的關系。方法采用免疫組化S－P法分別檢測Snail在胃癌及切緣組織中的表達。結果Snail高表達于胃癌組織的細胞核，在胃癌及切緣組織中的表達率分別為85.42%、27.08%，兩者差異有統計學意義(P＜0.05)。Snail高表達與胃癌分化程度、浸潤深度、淋巴結轉移密切相關(P＜0.05)。結論胃癌中Snail高表達與腫瘤的浸潤轉移密切相關，Snail可能是胃癌侵襲轉移的生物學標志之一。

胃癌;Snail;腫瘤轉移;E－cadherin

鋅轉錄因子Snail在果蠅中首次被發現，在食管癌、結腸癌、肝癌及乳腺癌等惡性腫瘤中高表達，研究證實與E－cadherin表達下調有關，但在胃癌中的表達及其意義尚不清楚。本文采用免疫組化S－P法檢測Snail在胃癌及其對應切緣組織中的表達，探討其表達與胃癌臨床病理因素的關系，旨在分析其在腫瘤演進中的作用。

1 材料與方法

1.1 材料 48例胃癌標本收集自瀘州醫學院附屬醫院2008—2009年住院經手術的標本，取胃癌及距腫瘤邊緣＞5cm切緣組織，均經常規病理檢查證實為胃癌。其中，男28例，女20例;年齡35～78歲，平均56.2歲。按照WHO胃癌分類標準，高/中分化腺癌14例，低分化腺癌34例。所有患者術前均未接受放化療及生物學治療。根據浸潤深度分類，T1+T2期的29例，超過漿膜層T3+T4期的19例;有淋巴轉移18例，無淋巴轉移30例;TNM I期和Ⅱ期共27例，Ⅲ期和Ⅳ期共21例。兔抗人Snail多克隆抗體購自Ab－com公司，免疫組化SP試劑盒及DAB顯色劑購自北京博奧森生物技術有限公司。

1.2 實驗步驟 所有標本經10%福爾馬林固定，石蠟包埋、4 μm連續切片，Snail的免疫組化染色行SP法。操作步驟嚴格按照試劑說明書進行。磷酸鹽緩沖液代替一抗作為陰性對照。

1.3 統計學分析 采用x2檢驗。

1.4 結果判定 Snail蛋白陽性表達主要定位于細胞核內，部分表達于細胞質，并可見間質細胞中有部分散在表達，呈棕黃色。在高倍鏡下選取10個高倍視野，按著色細胞占視野總細胞數的百分比分為四級:無著色，輕度;著色細胞數1%～30%;中度:31%～60%;重度:＞60%;無著色及輕度為陰性組，中、重度染色為陽性組［1］。

2 結果

2.1 胃癌組織及切緣組織中Snail的表達 Snail在胃癌中的表達顯著高于切緣組織，陽性率分別為85.4%和27.1%，差異具有統計學意義。見表1。

表1 胃癌組織及切緣組織中Snail的表達

2.2 Snail蛋白表達與胃癌臨床病理特征的關系 Snail蛋白在胃癌中高表達，與腫瘤的分化程度、浸潤深度及淋巴結轉移密切相關(P＜0.05)，而與年齡、性別及 TNM 臨床分期無關(P＞0.05)。Snail蛋白表達與年齡、性別無關(P＞0.05)。見表2。

表2 Snail蛋白表達與胃癌臨床病理特征的關系

3 討論

實驗結果表明，Snail在胃癌組織中高表達，陽性率為85.42%(41/48)，Snail在切緣組織中的陽性表達率為27.08%(15/48)，具有統計學意義(P＜0.05)。Snail在胃癌中高表達，尤以差分化組、浸潤程度深及有淋巴結轉移組為著，并與相應對照組比較差異有統計學意義(P＜0.05)。提示:Snail參與胃癌的浸潤和轉移，是腫瘤的不良預后的指標。

近年的研究表明，Snail高表達于胃癌、乳腺癌、結腸癌、肝癌等上皮細胞來源腫瘤，并與乳腺癌、胃癌組織學分級、淋巴結轉移及遠處轉移相關。Snail在胃癌中高表達，而在切緣組織中低表達，提示Snail是參與胃癌的發生、發展的因素。金麗等［2］在研究胃癌中Snail的表達發現，陽性表達率為89.6%，而正常胃組織為29.1%，差異有統計學意義(P＜0.05)，Snail表達與胃癌的臨床病理性質有關，Snail表達水平與胃癌的分化程度、浸潤深度、淋巴結轉移以及臨床TNM分期有關。體外實驗［3］中將反義Snail轉染人結腸癌細胞HT－29，觀察到HT－29細胞偽足縮短、細胞變圓，呈現間質細胞樣表型轉變的特征。表明Snail在一定程度上反映癌細胞的侵襲能力，是上皮性腫瘤進展過程中的一個重要調節因素。

研究發現，Snail蛋白高表達的同時，E－cadherin蛋白表達常下調或丟失。E－cadherin是維持正常上皮細胞特性的蛋白，其下調正是導致上皮細胞來源惡性腫瘤侵襲和轉移的重要因素。在對鱗狀細胞癌的研究發現，侵襲力強的E－cadherin陰性克隆細胞呈現 Snail的高表達，而侵襲力弱的E－cadherin陽性克隆細胞幾乎檢測不到Snail的表達［4］。在腸型胃癌中，E－cadherin表達下調與SIP1有關，而在彌漫性胃癌中，E－cadherin表達下調與 Snail相關，與 SIP1無關。提示Snail在胃癌的演進中發揮促進作用，E－cadherin則扮演抑癌角色。

Snail除了能夠競爭性地與E－cadherin基因啟動子區的E－box結合，導致E－cadherin表達下調促進上皮細胞間質轉化(EMT)外，還能與具有促進細胞生長、浸潤和遷移的促肝細胞再生磷酸酶－3(PRL－3)基因的啟動子結合［5］，而使其轉錄上調，從而發揮PRL－3促腫瘤轉移的作用。因此，Snail不僅誘導EMT發生，上調轉移基因PRL－3，調節腫瘤細胞與細胞外間質的黏附，促進血管生成及轉移，從而導致腫瘤細胞的局部浸潤和遠處轉移。

總之，Snail在胃癌中高表達，通過EMT促進腫瘤的侵襲和轉移，與胃癌的不良預后有關，檢測其在腫瘤中的表達可以作為判斷腫瘤細胞生物學行為的指標。

［1］Jang TJ，Jeon KH，Jung KH.Cyclooxygenase－2 expression is re－lated to the epithelial－to－mesenchymal transition in human colon cancers［J］.Yonsei Med J，2009，50(6):818－824.

［2］金麗，耿敬妹.Snail蛋白表達與胃癌浸潤轉移的相關性研究［J］.腫瘤預防與治療，2008，21(1):22－24.

［3］Miyoshi A，Kitajima Y，Kido S，et a1.Snail accelerates cancer invasion by upregulating MMP expression and is associated with poor prognosis of hepatocellular carcinoma［J］.Br J Cancer，2005，92(2):252－258.

［4］Thiery JP.Epithelial－mesenchymal transitions in tumour pro－gresssion［J］.Nat Rev Cancer，2002，2(6):442－454.

［5］周軍，李建明，楊發達，等.人PRL－3基因啟動子的克隆及轉錄因子Snail結合位點的初步鑒定［J］.生物化學與生物物理進展，2008，35(2):187－194.

R735.2

A

1007－8991(2012)04－0026－02

(收稿 2012－02－01)