腫瘤病理組織庫的建設及發展現狀

李巖 沈雄虎 張松男 金鐵峰，3 林貞花，3

（1.延邊大學醫學院病理學教研室，吉林 延吉 133002； 2.延邊大學附屬醫院腫瘤科，吉林 延吉 133000；3.延邊大學腫瘤研究中心，吉林 延吉 133002）

組織庫（tissue bank）包含的內容廣泛，主要是指組織和器官移植以及各種疾病的大體和體液標本的儲存、臨床應用、科學研究和管理。本文所討論的“腫瘤病理組織庫”是指由病理醫師和外科醫師組織建立的組織庫，主要目的是為了保證在腫瘤的分級、分期、腫瘤的分子標記物篩查以及藥物靶向治療的臨床工作及研究工作中有足量的腫瘤標本，從而提高臨床腫瘤診斷的準確性和治療的有效性并為后續科學研究提供標本資源［1］。目前隨著科研手段的更新和技術的發展，對于腫瘤的研究已經從形態學發展到了遺傳學領域，腫瘤的相關基因和蛋白質的結構和功能研究已經成為腫瘤研究的熱點并為腫瘤的病理診斷和臨床治療提供了堅實的理論依據。因此，作為這些重要信息資源載體的腫瘤組織就顯得非常珍貴。它們不但可以用于腫瘤的診斷、分類、治療、療效評估等，更重要的是可以作為具體的研究對象來探索腫瘤的發生、發展中各種生物因子的作用機制，從而進一步揭示腫瘤的生物學特性，更好地為臨床患者服務［2－3］。

1 國內外病理組織庫的發展現狀

在國際上，美國癌癥研究所在1987年建立了美國國家級的腫瘤組織庫。該組織庫包含有6個分散在全美各地的大型教學醫院。這6個醫院統一執行一個標準化的標本采集、存儲和數據信息化及管理。截止到2004年，他們已經擁有70萬個病例標本［4］。1993年，美國MD Anderson癌癥中心首先建立頭頸部腫瘤組織庫，經過15年的發展，到2008年，其收集的腫瘤樣本已經超過2.5萬例［5］。在2000年，該中心又建立了胰腺癌組織庫，同時又下設了25個分支組織庫，并實現了區域內資源共享［6］。在全美，到2004年為止，經過美國組織庫協會（American association of tissue bank，AATB）認證的組織庫已經達到了70家以上［7］。與此同時，歐洲也建立了以歐洲癌癥研究所為中心，分散于整個歐洲的腫瘤組織庫體系。這些分散在歐洲各個國家和地區的大型醫院負責腫瘤及相關組織的采集、儲存以及臨床資料信息的錄入，而歐洲癌癥研究所則主要負責數據的加工和管理［8－9］。在亞洲，日本、韓國等國家也都紛紛開展了自己的病理組織庫項目，例如韓國高麗大學醫科大學自2003年起建立的肺癌組織庫、韓國延世大學醫科大學自2006年起建立的消化道腫瘤組織庫等。

在我國，北京大學臨床腫瘤學院在1996年首先成立了中國第一個病理組織庫，主要是對本院的腫瘤標本進行保存和整理。2000年以后，中山大學、廣州醫學院第一附屬醫院、天津醫科大學附屬腫瘤醫院和河南省腫瘤醫院等相繼建立了自己的腫瘤組織庫［10］。但是，總體而言，病理組織庫的建設在我國目前還處在起步階段。不過可喜的是，我們看到一些地方的病理學科根據本地區的實際建立了有自己特色的疾病病理組織庫。例如，云南省已經建立了遺傳性大腸癌組織庫［11］，中南大學湘雅醫院也正在積極組建鼻咽癌組織庫［12］。這都是各地根據地方多發疾病建立相應病理組織庫的實例。在延邊地區，丙型肝炎病毒（hepatitis C virus，HCV）的感染率為4.78%，顯著高于3.2%的全國平均水平［13］。另外，我們的前期研究發現延邊地區女性宮頸癌的發病率有明顯的上升趨勢且發病年齡在逐漸年輕化。根據這種現狀，2004年6月我們開始了延邊地區“腫瘤組織庫”（Tumor Tissue Bank，TTB）的建設工作。經過多年的摸索與實踐，我們建立了以HPV感染相關宮頸癌和HCV感染相關肝癌為特色、以宮頸癌和肝癌為主體同時包括各器官常見腫瘤的腫瘤病理組織庫。這對保存和研究延邊地區遺傳性腫瘤家族系、朝漢兩民族的腫瘤易感性對比、多發性腫瘤資源及腫瘤診斷和治療、完善病理診斷依據等都有非常重要的意義。

2 病理組織庫在我國發展的重要意義

我國幅員遼闊，各地區由于自然、社會環境的不同，其常見的疾病種類也不盡相同。但是隨著城市化的進程，人口流動日益頻繁，原有疾病發展的自然模式已經逐漸被破壞，對于遺傳、自然、社會等因素在疾病發生發展中的作用的研究也日益困難。目前在我國，仍然存在一些極具價值的疾病遺傳模型和區域多發病，但是隨著衛生保健工作的深入和城市化進程的加快，原有的疾病資源正在逐漸消失。因此，現有的疾病資源和資料，特別是人體組織（疾病組織和非疾病組織）已經成為一種不可再生的資源，應備受關注［14－15］。大量的病理組織標本，可以為疾病的流行病學和疾病的發生、演進機理的研究提供幫助。由于居民生活條件和醫療資源緊張等的限制，大量的腫瘤患者只能在地方基層醫療機構接受治療。因此，絕大多數常見的腫瘤病理組織在地方基層醫院更容易獲得。但是，一些地方醫療機構由于認為自身條件有限，一直沒有系統性的開展組織庫的建設。組織庫的建設主要取決于疾病數量和（或）種類。各個地方基層醫院可以逐步建立自己的組織庫，同時也為建立全國統一的組織庫中心做準備。

3 病理組織庫的建立過程

病理組織庫的建立不僅涉及醫患雙方，而且還需要護士、技師及計算機輔助人員等多方面協作參與。

首先，在病理組織庫的建立過程中要遵循一定的程序。借鑒國外的標準化流程結合我國各地區的實際情況，我們總結如下：（1）經過醫院倫理委員會批準；（2）患者簽署知情同意書；（3）向手術室遞交標本收集申請；（4）術中切除的組織由病理醫師記錄大體情況并拍照；（5）病理醫師保留足夠臨床病理診斷的組織并將其固定于常規的病理組織標本固定液中，其余的標本按照一定的標準取材并凍存；（6）將組織入庫，并完善記錄患者的臨床信息及臨床病理診斷結果；（7）將組織與信息編號進行數字化管理；（8）隨診補充和完善臨床資料信息。在整個操作過程中有幾點問題是需要注意的。組織從取出到快速冷凍所需的時間越短越好，應控制在30 min以內。同時，最好不要把組織浸于任何溶液中，只需簡單地將組織放在無菌的塑料袋中并置于冰上［16］。美國臨床乳腺保護計劃（Clinical Breast Care Project，CBCP）經過大量的實踐發現，把新鮮大體標本放入干冰中速凍的效果優于液氮速凍。經干冰速凍的標本，其后期研究中應用激光切割時，更符合激光切割的最佳切割溫度，從而更好的保護組織生物信息（DNA、RNA和蛋白質）［17］。這種方法可以更加完整和充分地保護組織樣本，同時又能最大程度地節省儲存組織樣本的空間。組織的規范取材和有效、安全的保存是病理組織庫建立的最基本條件，也是病理組織庫建立的重中之重。

那么，當病理組織庫中有了大量的組織標本時，如何合理有效地使用這些標本？怎樣才能使病理組織庫發揮其最大的作用呢？這就需要將臨床資料信息與組織緊密地聯系在一起。因此，在病理組織庫的建立過程中臨床資料數據庫的建立也是十分重要的。疾病的個體差異較大，同樣的疾病由于環境因素、診治過程的不同，使疾病的結局特別是腫瘤組織的特性具有很大差異。患者詳細的初診、治療經過、臨床病理診斷、術后隨訪等各個方面的完整數據對于腫瘤的基礎研究和臨床治療指導都有重要的意義。此過程需要病理組織庫工作人員與臨床醫師通力合作，同時也需要醫院的病歷管理系統在技術上給予支持，使病歷資料在庫間傳輸成為可能。有了腫瘤的組織樣本和完整的臨床資料信息，我們就可以建立一個相對完善的腫瘤數據庫。腫瘤數據庫除了有病理組織、組織大體情況、臨床資料、隨訪資料外還應擁有組織庫管理信息、數據整合分析、數據查詢和數據存儲等眾多功能。現在國外的腫瘤數據庫中加入了該組織的病理學圖像信息，其中既包括收集的組織標本的大體照片，也包括該組織已做成的常規H＆E切片的鏡下采集圖片［14］。總之，沒有完善的腫瘤數據庫，不利于標本和數據的管理，使腫瘤標本的應用價值大大降低。有了腫瘤數據庫的數字化管理，使得科研工作變得有效便捷，也使得病理組織庫能發揮其最大的作用。

目前，我國病理組織庫還處于起步階段，組織庫以小規模為主且在各地的大醫院單獨存在。這樣不但不能充分利用資源，而且難以進行多中心合作的科學研究。在這一點上我們應向美國和歐洲學習，建立全國性的病理組織庫管理中心，制定統一的組織采集和管理的操作標準，應用統一的網絡數字化管理系統，使分散在全國各大醫院的組織庫整合成為龐大的組織庫網絡系統，同時建立網絡信息共享平臺，使組織庫內的資源和信息得到充分利用。這樣既促進了國內醫療研究機構的科研發展，也有利于國際間科研項目的交流與合作。未來，在國際間交流合作的基礎上，可以建立更加開放的國際組織庫共享平臺。這將為疾病在不同種族和地區的橫向研究做出巨大貢獻。進而在制定疾病的標準化診斷指標和治療原則的基礎上研究疾病區域特異性，然后可以縱向深入，在微觀上對疾病的發生和演進進行研究。在以病理學工作者為基礎，醫學各個學科通力合作的基礎上，病理組織庫在未來醫學研究中一定會發揮更加重要的作用。

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